Summary

Angiografia di fluorescenza per la valutazione dell'aneurisma perfusione e patriera arteriosa dei genitori nei modelli di aneurisma per ratti e conigli

Published: July 24, 2019
doi:

Summary

Presentiamo un protocollo per valutare in modo efficiente la perfusione di aneurisma e la patenza del recipiente dell’aneurisma laterale in ratti e conigli, utilizzando l’angiografia videoatologa (FVA) a fluorescenza a base di fluorescenza. Con un valore predittivo positivo del 92,6%, si tratta di un metodo semplice ma molto efficace ed economico senza attrezzature speciali richieste.

Abstract

Trattamento dell’aneurisma cerebrale si concentra sul raggiungimento di occlusione completa, così come preservare il flusso sanguigno nell’arteria genitore. Fluoresceina sodio e verde indocianina sono utilizzati per consentire l’osservazione del flusso sanguigno e lo stato di perfusione del vaso, rispettivamente. Lo scopo di questo studio è quello di applicare l’FVA per verificare il flusso sanguigno in tempo reale, lo stato di perfusione del vaso e l’occlusione degli aneurismi dopo l’induzione di aneurismi sidewall in conigli e ratti, nonché per convalidare la procedura in queste specie.

Venti aneurismi laterali sono stati creati in 10 conigli suturando un sacchetto del vaso arterioso decellularizzato sull’arteria carotide di un coniglio donatore. Inoltre, 48 aneurismi microchirurgici laterali sono stati creati in 48 ratti. Durante il follow-up ad un mese dopo la creazione, il complesso dell’arteria/aneurisma genitore è stato sezionato e l’FVA è stata eseguita utilizzando un’iniezione di fluoresceina endovenosa (10%, 1 mL) tramite cateterizzazione della vena dell’orecchio nei conigli e una catherizzazione della vena femorale nei ratti. Gli aneurismi sono stati poi raccolti, e la patenza è stata valutata macroscopicamente.

Macroscopicamente, 14 aneurismi su 16 nei conigli non indicavano alcuna perfusione di arteria madre residua con luminae totalmente occlusa, tuttavia 11 (79%) sono stati rilevati dall’FVA. Quattro aneurismi sono stati esclusi a causa di problemi tecnici. Nei ratti, la perfusione dell’aneurisma residuo è stata osservata macroscopicamente in 25 casi su 48. Dei 23 senza prove macroscopiche di perfusione, FVA ha confermato l’incidenza di 22 aneurismi (96%). Non ci sono stati eventi avversi associati all’FVA. La fluoresceina è facilmente applicabile e non è necessaria alcuna attrezzatura speciale. È un metodo sicuro ed estremamente efficace per valutare l’integrità dell’arteria genitore e la perfusione aneurisma/perfusione residua in un ambiente sperimentale con conigli e ratti. L’FVA che utilizza la fluoresceina come agente di contrasto sembra essere efficace nel controllare la patenza degli aneurismi e del recipiente sottostante e può anche essere adattata per bypassare la chirurgia.

Introduction

La prova dell’aneurisma completo e dell’integrità dell’arteria genitore è della massima importanza nella chirurgia dell’aneurisma. Ci sono diverse opzioni per confermare la patenza dell’arteria madre e l’occlusione dell’aneurisma, come la sonografia Doppler, l’angiografia cerebrale convenzionale (DSA), l’angiografia della tomografia computerizzata (CTA) o l’angiografia a risonanza magnetica (MRA)1, 2.Tuttavia, si tratta di metodi costosi e dispendiosi in termini di tempo che spesso non sono disponibili in laboratorio. Inoltre, possono avere effetti collaterali rilevanti come l’esposizione alle radiazioni o la necessità di una sedazione aggiuntiva di animali sperimentali per evitare il movimento artefatto.

Con l’emergere di un numero crescente di nuovi dispositivi endovascolari, è necessario testare in modo riservato tali dispositivi. Tuttavia, questi studi spesso si basano sull’analisi post-mortem (ad esempio, macro patologia e istologia) e mancano di informazioni sulla perfusione dinamica. Inoltre, per il ricercatore può essere fondamentale ottenere informazioni immediate e affidabili durante una procedura chirurgica sperimentale. L’angiografia della fluorescenza è una tecnica di visualizzazione conveniente e facile da eseguire1,3,4.

Come tale, l’angiografia videologica verde indocianina (ICG) è spesso utilizzata nelle procedure neurochirurgiche cliniche ed è stata ampiamente studiata5,6. L’angiografia video fluoresceina (FVA) è una tecnica alternativa, con l’ulteriore vantaggio di creare un segnale di fluorescenza che si trova all’interno della gamma di lunghezze d’onda della visione umana, e può quindi essere visto ad occhio nudo senza una telecamera a infrarossi a spettro esteso 7. L’angiografia video fluoresceina è meno spesso utilizzata nella chirurgia clinica cerebrovascolare e i rapporti sull’IEd in ambienti sperimentali sono scarsi1,4.

L’obiettivo di questa relazione è dimostrare la fattibilità e la portata delle applicazioni dell’IVA nella ricerca cerebrovascolare preclinica di ratti e conigli.

Protocol

I roditori sono stati alloggiati in un impianto di cura degli animali e gli esperimenti sono stati esaminati e approvati dal Comitato per il benessere degli animali presso l’Università di Berna, in Svizzera (BE 108/16) e (BE65/16). Tutti gli animali sono stati mantenuti su una dieta di laboratorio standard con libero accesso al cibo e all’acqua. Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati condotti sotto un’attenta considerazione delle 3R (sostituzione, riduzione e raffinatezza). Sono stati inclusi dieci conigli bianc…

Representative Results

La frequenza cardiaca e la pressione sanguigna sono state monitorate durante l’intervento chirurgico. La frequenza cardiaca media era 193/min nei conigli e 196/min nei ratti. Il peso corporeo dei conigli variava da 3,05-4,18 kg, e i ratti pesavano 335-690 g. Siamo stati in grado di eseguire FVA in otto conigli su dieci (Figura 1). Quattro esami di aneurisma in due conigli non sono stati registrati con la telecamera a causa di difficoltà tecniche. Non sono state s…

Discussion

L’FVA è un metodo promettente e semplice per esaminare le navi nei roditori e può essere eseguita con dispositivi commerciali e attrezzature pronte all’uso. L’FVA può essere implementato durante qualsiasi intervento chirurgico in cui è necessaria una valutazione intraoperatoria dell’integrità della nave, poiché i vasi necessitano prima di essere adeguata.

Gli autori hanno preferito l’iniezione venosa all’iniezione arteriosa a causa del minor rischio di eventi involontari come infezione, …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Questo studio è stato sostenuto in parte da una sovvenzione di ricerca del Kantonsspital Aarau, Svizzera.

Materials

For rabbits
Aluminium foil
Animal shaver
Black tape
Blue filter Thorlabs MF475-35
Body warm plate
Camera Sony NEX-5R
Catheter 22G Vasofix Safety
Disinfictant
Fluorescein sodium Fluorescein Faure 10%
Glas plate
Green filter Thorlabs MF539-43
Incontinence pad
Infusion pump Perfusor Secura
Ketamine hydrochloride any generic products
Needle 25G
Oxygen
Ringer's Solution
Sterile sheets
Surgical instruments micro forceps, micro scissor, blunt surgical scissor
Surgical microscope OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany
Syringe 2ml, 5ml, 50ml
Tape
Three-way-stopcock
Torch light
Xylazin any generic products
For rats
Aluminium foil
Animal shaver
Black tape
Blue filter Thorlabs MF475-35
Body warm plate
Camera Sony NEX-5R
Disinfictant
Fluorescein sodium Fluorescein Faure 10%
Green filter Thorlabs MF539-43
Incontinence pad
Isoflurane
Ketamine hydrochloride any generic products
Medetomidine hydrochloride any generic products
Needle 25G
Oxygen
Plate
Ringer's Solution
Sterile sheets
Surgical instruments micro forceps, micro scissor, blunt surgical scissor
Surgical microscope OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany
Syringe 2ml, 5ml
Tape
Torch light

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Cite This Article
Strange, F., Sivanrupan, S., Gruter, B. E., Rey, J., Taeschler, D., Fandino, J., Marbacher, S. Fluorescence Angiography for Evaluation of Aneurysm Perfusion and Parent Artery Patency in Rat and Rabbit Aneurysm Models. J. Vis. Exp. (149), e59782, doi:10.3791/59782 (2019).

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