여기에서 우리는 뼈 재생 능력의 관점에서 뼈 치환 물질을 평가하는 것을 목표로 토끼에 있는 외과 프로토콜을 제시합니다. 토끼 두개골에 고정된 PEEK 실린더를 사용하여, 골전도, 골연, 골형성 및 물질에 의해 유도된 혈관발생은 살아있는 동물 또는 안락사된 동물상에서 평가될 수 있다.
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방법 논문
뼈 치환 재료의 뼈 성장 및 혈관 혈관 의 평가를 위한 토끼에 있는 뼈 증강의 Calvarial 모형
이 논문에서
요약
초록
토끼 calvarial 모형의 기본적인 원리는 두개골의 피질 부분의 위에 수직으로 새로운 뼈 조직을 성장하는 것입니다. 이 모형은 뼈 성장 및 신생혈관 지원의 관점에서 경구와 두개안면 뼈 재생을 위한 뼈 치환 물자의 평가를 허용합니다. 일단 동물이 마취되고 환기 (endotracheal 삽관) 일단, polyether 에테르 케톤 (PEEK)로 만든 4개의 실린더는 중앙분리대와 관상 봉합사의 양쪽에 두개골에 나사로 조입니다. 각 실린더에 의해 구분된 뼈 영역 내에서 5개의 침구구멍을 뚫어 골수 세포의 유입을 허용합니다. 재료 샘플은 실린더에 배치된 다음 닫힙습니다. 마지막으로, 수술 부위는 봉합되고 동물은 깨어있습니다. 뼈 성장은 현미경 촬영을 사용하여 살아있는 동물에 평가될 수 있습니다. 일단 동물이 안락사되면, 뼈 성장 및 신생혈관은 현미경 단층 촬영, 면역 조직학 및 면역 형광을 사용하여 평가 될 수있다. 재료의 평가에는 최대 표준화 및 교정이 필요하므로 종변 계열 모델이 이상적으로 나타납니다. 접근이 매우 용이하며, 정의된 실린더를 사용하여 교정 및 표준화가 용이하며 4개의 샘플을 동시에 평가할 수 있습니다. 더욱이, 살아있는 단층 촬영은 사용될 수 있고 궁극적으로 안락사되는 동물의 큰 감소가 예상될 수 있다.
서론
뼈 확대의 calvarial 모형은 경구와 두개안면 외과 도메인에 있는 지도한 뼈 재생 (GBR)의 개념을 낙관하는 것을 목표로 90 년대에 개발되었습니다. 이 모델의 기본 원리는 두개골의 피질 부분 위에 수직으로 새로운 뼈 조직을 성장하는 것입니다. 이를 위해, 반응기(예를 들어, 티타늄-돔, -실린더 또는 -케이지)는 이식편(예를 들어, 하이드로겔, 뼈 대용 등)에 의해 수행된 골 재생을 보호하기 위해 두개골 상에 고정된다. 이 모델의 도움으로, 티타늄 또는 세라믹케이지 1,2,3,4,5,6,GBR 멤브레인7,8,9 ,10,골생성 요인11,
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프로토콜
스위스 의정서는 스위스 의정서의 승인을 받았으며 주 및 연방 수의학 기관(승인 n° GE/16/16 및 GE/100/18)의 감독을 받았습니다.
1. 특정 장치 및 동물
-
실린더
- PEEK에서 측면 안정화 탭이 있는 기계 실린더는 내경 5mm, 외경 8mm, 높이5mm(그림 1)입니다.
- 실린더 의 상단에 정확하게 클립 할 수 있도록 디자인 기계 PEEK 캡 (두께 1mm).
- 수술 전에 오토클레이브를 통해 PEEK 실린더와 캡을 살균합니다.
-
나사
- 자체 드릴링 마이크로 나사(상업용 순수 티타늄(5등급)로 제작)을 사용하여 실린더(직경 1.2mm, 길이 4mm)를 고정합니다. 수술 전에 오토클레이브에 의해 살균.
-
동물
- 3개월 된 뉴질랜드 흰 토끼(남성 또는 암컷)를 구입하여 각각 2.5kg의 무게를 측정합니다.
참고 : 우리는 제네바 대학에서 사육하여 토끼를 얻었다.
- 3개월 된 뉴질랜드 흰 토끼(남성 또는 암컷)를 구입하여 각각 2.5kg의 무게를 측정합니다.
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결과
본 원에 기재된 모델은 골 치환에서 골전도의 평가에 전념한다. 골형성 및 또는 골대체의 골형성(pre--)세포화 또는 생체활성 분자로 적재된 골형성은 또한 혈관발생 1,2,3,4, 5개 , 6개 , 7명 , 8개 , 9개 , 10개 ,
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토론
본 명세서에 설명된 모델은 간단하며 모든 단계를 따르고 장비가 적합한 한 매우 쉽게 개발되어야 합니다. 설명된 프로토콜은 외과 적 방법이므로 모든 단계가 중요하고 올바르게 따라야합니다. 특히 토끼 취급 및 마취에서 동물 실험에 대한 교육을받는 것이 중요합니다. 전문 마취전문의와 수의사의 도움을 요청하는 것을 망설이지 마십시오. 봉합사 제거 전후에 동물의 매일 시각적 모니터링을 주장하는 것이 중요합니다. 두개골의 피부가 두껍고 풍부하고 느슨하더라도 실린더의 고정은 큰 긴장을 유발합니다. 봉합사가 너무 일찍 제거되면 상처가 다시 열릴 수 있으며 1 주일 이상의 봉합과 새로운 항생제 치료가 필요합니다. 상처 라인에서 탈의 경우, 외과 의사는 봉합이 가능한지 아닌지 고려해야합니다. 그렇지 않은 경우 샘플 거부를 고려해야 합니다.
프로토콜 섹션에 설명된 중요한 단계 외에도 아래 세부 사항은 이 프로토콜의 적절한 구현에 도움이 될 수 있습니다. 기술적 관점에서, 사용되는 토끼는 젊고 작기 .......
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공개 사항
저자는 공개 할 것이 없다.
감사의 글
저자는 가이스트틀리치 AG (울후센, CH)와 골학 재단 (루체른, CH) (그랜트 n ° 18-049)뿐만 아니라 글로벌 D (Brignais, FR)에 빚을지고 나사를 제공합니다. 특히 가이스트틀리히의 B. 셰퍼 박사에게 특별한 감사를 전합니다. 우리는 또한 뛰어난 조직학적 처리와 소중한 조언에 대해 엘리안 더보이스와 클레어 헤르만에게 감사드립니다. 마지막으로, 우리는 자비에 벨린, 실비 룰렛과 Pr Walid Habre의 전체 팀을 따뜻하게 인정, "실험 수술 Dpt", 그들의 놀라운 기술 지원에 대한.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Drugs | |||
| Enrofloxacine Baytril 10% | Bayer | 항생제 | |
| Fentanyl | Bischel | 진통제를 위한 | |
| Ketalar 50mg/ml | Pfizer | 케타민 마취를 위한 | |
| Lidohex | Bichsel | 눈을 위한 윤활 젤 | |
| Opsite | Smith 및 조카 | 66004978 | 스프레이 가능한 드레싱 |
| 포비돈 요오드 10%, 베타딘 | 문디파마 | 항감염제 | |
| 프로포폴 2% | 브라운 | 3538710 | 마취용 |
| 라피도카인 2% | 신테티카 | 국소 마취 | |
| 링거-아세테이트 | 프레제니우스 카비 | 부피 보상 | |
| 롬푼 2% | 바이엘 | 마취용 자일라진 | |
| Sevoflurane 5% | Abbvie | 마취용 | |
| 멸균 식염수 | Sintetica | ||
| Temgesic | Reckitt Benckiser | 부프레노르핀 염산염, 진통제 | |
| Thiopental Inresa | Ospediala | 마취용 | |
| Xylocaine 10% 스프레이 | Astra Zeneca | 삽관용 | |
| Name | Company | 카탈로그 번호 | Comments |
| Equipment | |||
| Fresenius Vial pilot C | Imexmed | 주입 펌프 | |
| 가열 패드 | 하버드 장치 | ||
| 흡입 지배적 인 50 | Medela | ||
| 흡입 튜브 Optimus | Promedical | 80342.2 | |
| 수술 모터 | Schick 치과 | 큐브 | 골수 구멍 드릴링 |
| 환기 | Maquet Servo1 | ||
| Name | Company | 카탈로그 번호 | 코멘트 |
| Material | |||
| Cylinders and caps | Boutyplast | 맞춤형 | 구성: PEEK (폴리 에테르 에테르 케톤) |
| 수동 자체 유지 샤프트 | GlobalD | ACT1K | |
| 자체 유지 샤프트용 모바일 핸들 | GlobalD | MTM | |
| 자체 드릴링 나사 | GlobalD | VA1.2KL4 | 티타늄 grade5, ISO 5832-3 |
| Name | Company | 카탈로그 번호 | 코멘트 |
| >Surgical tray | |||
| Entrocale tube Shiley 직경 2,5mm | Covidien | 86233 | 삽관용 |
| 기관내관, Shiley 직경: 4,9mm | , Covidien | : 107-35G | : 삽관용 |
| Ethicon prolene 4-0 | Ehticon | 8581H | 비흡수성 봉합 |
| 겸자 | Marcel Blanc | BD027R | 145mm |
| 삽관용 삽관 카테터 | 쿡 의료 | 가이드 | |
| 바늘 홀더 | Marcel 블랑 | BM008R | |
| 바늘 BD Microlance3 | Becton Dickinson | 300300/304622 | 26G; 18G |
| Periosteal | HU-Friedy | P9X | |
| 라운드 외과 burs | Patterson | 78000 | 직경 0.8mm, 골수 구멍 드릴링 |
| 메스 | Swann-Morton | n° 10 및 N° 15 | |
| 가위 | Marcel Blanc | 00657 | 180mm |
| 주사기 Omnifix | Braun | 4616057V | 5ml, 10ml 및 50ml |
| Venflon G22 | Braun | 42690985-01 | 귀 iv 라인용 Vasofix 안전 |
참고문헌
- Anderud, J., et al. Guided bone augmentation using a ceramic space-maintaining device. Oral Surgery, Oral Medicine, Oral Pathology and Oral Radiology. 118 (5), 532-538 (2014).
- Lundgren, A. K., Lundgren, D., Hammerle, C. H., Nyman, S., Sennerby, L.
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