Évaluation hémodynamique invasive pour le système ventriculaire droit et l'hypertension artérielle pulmonaire induite par l'hypoxie chez les souris
Summary
Ici, nous présentons un protocole pour effectuer une évaluation hémodynamique invasive du ventricule droit et de l’artère pulmonaire chez les souris utilisant une approche de chirurgie à coffre ouvert.
Abstract
L’hypertension artérielle pulmonaire (HAP) est un trouble cardio-pulmonaire chronique et grave. Les souris sont un modèle animal populaire utilisé pour imiter cette maladie. Cependant, l’évaluation de la pression ventriculaire droite (RVP) et de la pression d’artère pulmonaire (PAP) demeure techniquement provocante chez les souris. RVP et PAP sont plus difficiles à mesurer que la pression ventriculaire gauche en raison des différences anatomiques entre les systèmes cardiaques gauche et droit. Dans cet article, nous décrivons une méthode de mesure hémodynamique de coeur droit stable et sa validation utilisant des souris saines et de PAH. Cette méthode est basée sur la chirurgie à poitrine ouverte et le soutien de la ventilation mécanique. Il s’agit d’une procédure compliquée par rapport aux procédures thoraciques fermées. Tandis qu’un chirurgien bien formé est exigé pour cette chirurgie, l’avantage de cette procédure est qu’elle peut produire des paramètres de RVP et de PAP en même temps, ainsi c’est une procédure préférable pour l’évaluation des modèles de PAH.
Introduction
L’hypertension artérielle pulmonaire (HAP) est un trouble cardio-pulmonaire chronique et grave avec élévation de la pression artérielle pulmonaire (PAP) et de la pression ventriculaire droite (RVP) qui est causée par la prolifération cellulaire et la fibrose des petites artères pulmonaires 1. Les cathéters pulmonaires d’artère, également appelés cathéters de cygne-Ganz2,sont couramment employés dans la surveillance clinique de RVP et de PAP. En outre, un système de surveillance sans fil PAP a été utilisé cliniquement3,4,5. Pour imiter la maladie pour l’étude chez la souris, un environnement hypoxique est employé pour simuler des manifestations cliniques humaines de PAH6. Dans l’évaluation du PAP chez les animaux, les grands animaux sont relativement faciles à surveiller à travers les cathéters d’artère pulmonaire utilisant la même technique que pour les sujets humains, mais les petits animaux tels que les rats et les souris sont difficiles à évaluer en raison de leur petite taille du corps. La mesure hémodynamique du système ventriculaire droit chez la souris est possible avec un cathéter de taille ultrasmall 1 Fr7. Une méthode pour mesurer RVP et PAP chez les souris a été rapportée dans la littérature8,9, mais la méthodologie manque d’une description détaillée. RVP et PAP sont plus difficiles à mesurer que la pression ventriculaire gauche en raison des différences anatomiques entre les systèmes cardiaques gauche et droit.
Pour obtenir les paramètres PAP et RVP dans la même souris, nous décrivons une approche basée sur la chirurgie de la poitrine ouverte pour les mesures hémodynamiques du cœur droit, sa validation avec des souris saines et HAP, et comment éviter de générer des données artificielles pendant la poitrine ouverte compliquée chirurgie. Bien que cette technique soit mieux réalisée par un chirurgien bien formé, elle a l’avantage d’être en mesure d’évaluer PAP et RVP dans la même souris.
Protocol
Representative Results
Discussion
L’intubation trachéale est la première étape importante pour les chirurgies à poitrine ouverte. La méthode classique d’intubation trachéale pour les petits animaux, comme les rats ou les souris, consiste à faire une incision en forme de T sur la trachée et à insérer directement des tubes trachéaux de type Y dans la trachée. Dans la pratique, nous constatons que cette méthode n’est pas facile pendant le fonctionnement. Le tube trachéal de type Y est trop grand pour les petits animaux et forme un angle avec l…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Cette recherche est soutenue par le Projet de réforme de l’enseignement supérieur de l’Union de Pékin (10023-2016-002-03), le Fonds pour la jeunesse de l’hôpital Fuwai (2018-F09) et le Fonds des directeurs du Laboratoire clé de recherche préclinique et Évaluation des matériaux d’implant cardio-vasculaire (2018-PT2-ZR05).
Materials
| 2,2,2-Tribromoethanol | Sigma-Aldrich | T48402-5G | For anesthesia |
| Animal temperature controller | Physitemp Instruments, Inc. | TCAT-2LV | For temperature control |
| Dissection forceps | Fine Science Tools, Inc. | 11274-20 | For surgery |
| Gemini Cautery System | Gemini | GEM 5917 | For surgery |
| Intravenous catheter (22G) | BD angiocath | 381123 | For intubation |
| LabChart 7.3 | ADInstruments | For data analysis | |
| Light illumination system | Olympus | For surgery | |
| Mikro-Tip catheter | Millar Instruments, Houston, TX | SPR-1000 | For pressure measurement |
| Millar Pressure-Volume Systems | Millar Instruments, Houston, TX | MVPS-300 | For pressure measurement |
| O2 Controller and Hypoxia chamber | Biospherix | ProOx 110 | For chronic hypoxia |
| PowerLab Data Acquisition System | ADInstruments | PowerLab 16/30 | For data recording |
| Scissors | Fine Science Tools, Inc. | 14084-08 | For surgery |
| Small animal ventilator | Harvard Apparatus | Mini-Vent 845 | For surgery |
| Stereomicroscope | Olympus | SZ61 | For surgery |
| Surgery tape | 3M | For surgery | |
| Terg-a-zyme enzyme | Sigma-Aldrich | Z273287-1EA | For catheter cleaning |
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