현재 연구에서 개발된 급성 간 부전 동물 모델은 잠재적인 치료법의 연구를 위한 실행 가능한 대안을 제시합니다. 현재 모델은 물리적 및 약물 유발 간 손상의 결합 된 효과를 채택하고 새로운 치료의 잠재력을 연구하기에 적합한 시간 창을 제공합니다.
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이 논문에서
요약
초록
급성 간 부전 (ALF) 신진 대사의 손실의 결과로 다양 한 병 인에 의해 발생 하는 임상 상태, 생 화 확 적인, 합성, 그리고 간 기능 해독. 대부분의 돌이킬 수없는 간 손상 의 경우, 직교 간 이식 (OLT) 유일한 가능한 치료 남아. ALF에 대 한 치료의 치료 잠재력을 연구 하기 위해, ALF의 동물 모델에서 그것의 이전 테스트필수적이다. 현재 연구에서, 쥐에 있는 ALF 모형은 48 시간의 치료 창을 제공하는 70% 부분 간절제술 (PHx) 및 아세트아미노펜 (APAP)의 주사를 결합해서 개발되었습니다. 간 질량의 70%를 절제하기 위해 간 중도 및 좌측 엽을 제거하고 APAP는 2일 동안 수술 후 24시간 주어졌다. ALF 유도 동물에서의 생존은 심각하게 감소되는 것으로 나타났다. ALF의 발달은 알란닌 아미노 트랜스퍼라제(ALT), 아스파르타테 아미노 트랜스퍼라제(AST), 알칼리성 인산파타제(ALP)의 혈청 수준을 변경하여 확인하였다; 프로트롬빈 시간의 변화 (PT); 국제 정상화 비율(INR)의 평가. qPCR에 의한 유전자 발현 프로필에 대한 연구는 세포사멸, 염증 및 간 손상의 진행에 관여하는 유전자의 발현 수준 증가가 나타났다. 간세포의 확산변성 및 면역세포의 침투는 조직학적 평가에 의해 관찰되었다. ALF의 가역성은 합성 건강한 랫트 간세포의 인트라스장내 이식 후 ALT, AST 및 ALP의 생존 및 혈청 수준의 복원에 의해 확인되었다. 이 모델은 ALF의 병리생리학을 연구하고 ALF에 대한 새로운 치료법의 잠재력을 평가하기 위해 이용 가능한 ALF 동물 모델에 대한 신뢰할 수 있는 대안을 제시한다. 두 개의 다른 접근의 사용은 또한 가능한 물리적 및 약물 유발 간 손상의 결합 된 효과 공부. 현재 절차의 재현성과 타당성은 모델의 추가적인 이점입니다.
서론
급성 간부전(ALF)은 미국 간질환 연구에 의해 사전 손상 징후 없이 급성 간 손상의 급속한 발달로 정의되며 간장의 합성, 대사 및 해독 기능의 심각한 손상을 특징으로 한다1. ALF는 장기간 에 걸쳐 발생하는 간 손상의 결과로 실패가 발생하는 만성 간 부전과 급성 만성 간 부전 (ACLF)에서 발생하는 만성 간 기능 부전과 는 다르며, 만성 간 질환의 결과로 갑작스러운 간 손상이 발생하는2,3,4. ALF를 위한 유효한 치료는 정형외 간 이식 (OLT) 또는 죽음이 생길 수 있습니다. 간 기증자의 부족으로 인해 ALF를 앓고있는 환자의 사망률이 매우 높습니다.
대체 치료 접근법의 잠재력을 연구하고 ALF의 병리생리학을 더 잘 이해하기 위해서는 인간에서 발생하는 ALF를 반영할 수 있는 동물 모델이 필요합니다. 이미 사용 가능한 ALF 동물 모델의 대부분은 몇 가지 단점이 있습니다. 아세트아미노펜(APAP) 효과는 재현하기 어렵지만 시간적, 임상적, 생화학적 및 병리학적 매개 변수측면에서 가장 유사한 점이 있습니다. APAP-유도 동물....
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프로토콜
아래에 설명된 절차는 뉴델리 국립 면역학 연구소의 기관 동물 윤리 위원회에 의해 승인되었습니다. 승인의 일련 참조 번호는 IAEC#355/14입니다.
1. 준비
- Das B 외26에의해 설명된 바와 같이 외과 적 수술을 준비하십시오.
- 체중이 200-250g인 6-8주 된 근친 위스타 쥐를 사용하십시오.
- 표준 동물 관리 조건하에 동물을 수용하고 시술 전후에 쥐 차우와 리비툼으로 먹이십시오.
- 70% PHx를 수행할 때, 피복중 으로 주입되는 케타민 염산염(100 mg/kg 체중)과 자일라진(10 mg/kg 체중)의 표준 칵테일 믹스를 사용하십시오.
참고 : 사용되는 마취제의 유형은 사망률과 이환율에 수술 후 영향을 미칠 수 있습니다. - 세포 이식 동안, 흡입제 마취 이소플루란(2-클로로-2-(디플루오로메톡시)-1,1,1-트리플루오로-에탄)을 사용하여 이식 수술 후 동물의 회복 시간을 단축한다.
- 유도 및 사용자 정의 마취 시스템을 사용하여 흡입 마취를 유지합니다. 산소 흐름을 4 L/min으로 유지합니다. 유도 사용에 대 한 isoflurane 에 4% 그리고 유지 보수 사용에 대 한 2-3% 수술....
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결과
ALF의 동물 모델에서 생존 율
70% PHx와 함께 ALF를 유발하는 APAP의 최적 용량은 750 mg/kg 체중으로 표준화되었다. 치료 요법 시작 24 시간 후 70% PHx, 때 동물 완전히 수술에서 회복 했다, 그리고 24 시간 간격에 두 개의 APAP 복용량으로 구성. 사망률은 APAP의 두 번째 투여 후 80%의 비율로 관찰되었고, 48시간 수술 후. 생존율을 카플란-마이어 방법을 통해 분석하고 플롯하였다(도1). 이 모형에 의해 제공된 죽음의 시간 그리고 기간에 있는 재현성은 ALF에 대하여 치료 내정간섭을 공부하기 위한 적당한 후보를 만듭니다.
동물의 4 개의 그룹 연구에 대 한 고려 되었다: 그룹 1 (대조군, 만 식염수 치료), 그룹 2 (만 APAP 에서 750 mg/kg 체중), 그룹 3 (식염수 치료 70% PHx) 그리고 그룹 4 (APAP 에서 750 mg/kg .......
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토론
ALF에 적합한 동물 모델의 개발은 ALF의 병인과 진행을 더 잘 이해하기 위해 가장 중요합니다. 잘 특성화 된 ALF 동물 모델은 또한 ALF에 대한 새로운 치료 접근법의 개발 및 시험을위한 기회를 제공합니다. ALF6,12,21, 23,46,47,48의임상적으로 관련 모델을 개발하기 위해 많은 시도가 이루어졌다. 이러한 연구의 대부분은 외과 적 절차를 활용하거나 간 독성 화학 물질에 의해 간 손상을 유도.
PHx는 괴사 및 사멸 조직에 기인한 염증의 부재 때문에 A.......
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공개 사항
저자는 공개 할 것이 없다.
감사의 글
이 작품은 생명 공학의 부서에서 받은 핵심 보조금에 의해 지원 되었다, 면역학의 국립 연구소에 인도정부, 뉴델리.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 아세트아미노펜(Biocetamol) | EG Pharmaceuticals | 특정 카탈로그 번호 없음(현지 조달) | |
| 알칼리성 포스파타아제 키트(DEA) | Coral Clinical System, 인도 | 특정 카탈로그 번호 없음(현지 구매) | |
| 자동화 분석기 | Tulip, Alto Santracruz, India | Screen Maaster 3000 | 간 기능 검사용 생화학 분석기 |
| 베타딘( 포비돈-요오드 용액) | Win-Medicare; 인도 | 특정 카탈로그 번호 없음 (현지 조달) | |
| 생물 안전 캐비닛 (클래스 I) | Kartos international; 인도 | 특정 카탈로그 번호 없음 (현지 조달) | |
| 명시야 현미경 | Olympus, 일본 | LX51 | |
| Cefotaxime (Taxim®) | 알켐; 인도 | 세포탁심 나트륨 주입, 특정 카탈로그 번호 없음(현지 조달) | |
| 셀 스트레이너 | 시그마; US | CLS431752 | |
| Collagenase Type I | Gibco by Life Technologies | 17100-017 | |
| 면봉 | 순수 면봉 Pvt Ltd; 인도 | 특정 카탈로그 번호 없음 (현지 구매) | |
| Drape Sheet | JSD Surgicals, Delhi, India | 특정 카탈로그 번호 없음 (현지 구매) | |
| DPX Mountant | Sigma; US | 6522 | |
| Eosin Y 용액, 알코올 시 | 그마; 미국 | HT110132 | |
| 집게 | 주요 외과; 인도 | 특정 카탈로그 번호 없음 (현지 조달) | |
| 가스 마취 시스템 | Ugo Basile; 이탈리아 | 211000 | |
| 포도 | Himedia, 인도 | GRM077 | |
| 제모 크림 (Veet®) | Reckitt Benckiser, 인도 | 특정 카탈로그 번호 없음(현지 조달) | |
| Hematoxylin Solution, Mayer's | Sigma; 미국 | MHS16 | |
| 헤파린 나트륨 염 | Himedia; 인도 | RM554 | |
| Sheep Testes Sigma의 히알루로니다아제 | ; 미국 | H6254 | |
| I.V. 캐뉼라(Plusflon) | 메디플러스, 인도 | Ref 1732411420 | |
| 인슐린 주사기 | BD; US | REF 303060 | |
| 이소플루란(Forane®) | Asecia Queenborough | No B506 | 흡입 마취 |
| 케타민(Ketamax®) | 트로이카 제약 회사 | 케타민 염산염 IP, 특정 카탈로그 번호 없음(현지 조달) | |
| Meloxicam(Melonex®) | Intas 제약 회사; 인도 | 특정 카탈로그 번호 없음 (현지 구매) | |
| 마이크로 니들 홀더 스트레이트 & 곡선 | Mercian; 잉글랜드 | BS-13-8 | |
| 마이크로 니들 홀더 스트레이트 & 곡선 | Mercian; 영국 | BS-13-8 | |
| Microtome | Histo-Line Laboratories, 이탈리아 | MRS3500 | |
| 나일론 스레드 | 마이티; 인도 | 특정 카탈로그 번호 없음 (현지 조달) | |
| 파라 포름 알데히드 | Himedia; 인도 | GRM 3660 | |
| Percoll® | GE Healthcare | 17-0891-01 | |
| Refresh Tears/Eyemist Gel | Allergan India Private Limited/Sun Pharma, India | P3060 | 특정 카탈로그 번호 |
| 없음 RPMI | Himedia; 인도 | 특정 카탈로그 번호 없음 (현지 조달) | |
| 메스 | 주요 외과; 인도 | 특정 카탈로그 번호 없음 (현지 조달) | |
| 가위 | 주요 외과; 인도 | 특정 카탈로그 번호 없음 (현지 구매) | |
| SGOT (ASAT) KIT | Coral Clinical System, 인도 | 특정 카탈로그 번호 없음 (현지 구매) | |
| SGPT (ALAT) KIT | Coral Clinical System, 인도 | 특정 카탈로그 번호 없음 (현지 구매) | |
| Shandon Cryotome E Cryostat | Thermo Electron Corporation; 미국 | 특정 카탈로그 번호 없음 | |
| : 설탕, | 시그마; US | S0389 | |
| Surgical Blade No. 22 | La Medcare, India | 특정 카탈로그 번호 없음(현지 조달) | |
| Surgical Board | 현지에서 제작 | 특정 카탈로그 번호 없음(현지 조달) | |
| Surgical White Tape | 3M 인도; 인도 | 1530-1 | 미세공 수술 테이프 |
| 봉합 | Ethicon, Johnson & Johnson, India | NW 5047 | |
| 주사기 (1ml, 26 g) | Dispo Van; 인도 | 특정 카탈로그 번호 없음 (현지 구매) | |
| 트리머 (클리퍼) | Philips | NL9206AD-4 DRACHTEN QT9005 | |
| 계량 기계 | Braun | 특정 카탈로그 번호 없음 (현지 구매) | |
| William's E Media | Himedia; 인도 | AT125 | |
| 자일라진(Xylaxin®) | Indian Immunologicals Limited | 진정제, 마취 전, 진통제 및 근육 이완제 |
참고문헌
- Polson, J., Lee, W. M. AASLD position paper: the management of acute liver failure. Hepatology. 41, 1179-1197 (2005).
- Chung, R. T., et al. Pathogenesis of liver injury in acute liver failure. Gastroenterology. 143, 1-7 (2012).
- Fyfe, B., Zaldana, F., Liu, ....
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