ويرد في الدراسة الحالية بروتوكول غير الغازية لتقييم التخطيط صدي القلبية الصدرية لتشريح القلب ووظيفة للفئران الكبار. يتم دراسة صمامات القلب ، وجميع غرف القلب الاربعه والشريان الابهر التصاعدي ، وقوس الابهر ، والشريان الابهري النازل بالتفصيل.
أصبح استخدام النماذج الحيوانية التجريبية أمرا حاسما في علوم القلب والاوعيه الدموية. تركز معظم الدراسات التي تستخدم نماذج القوارض علي التصوير ثنائي الابعاد لدراسة تشريح القلب في البطين الأيسر والصدى M-mode لتقييم ابعاده. ومع ذلك ، فان هذا يمكن ان يحد من دراسة شامله. هنا ، ونحن وصف البروتوكول الذي يسمح لتقييم حجم غرفه القلب ، وظيفة البطين الأيسر (الانقباضي والانبساطي) ووظيفة صمامي. وقد استخدمت اله الموجات فوق الصوتية الطبية التقليدية في هذا البروتوكول وتم الحصول علي وجات النظر صدي مختلفه من خلال اليسار parasternal ، قمي والنوافذ سوبرااسترانال. في النافذة اليسرى ، تم الحصول علي المحور الطويل والقصير لتحليل ابعاد الغرفة اليسرى ، والبطين الأيمن وابعاد الشريان الرئوي ، ووظيفة الصمام التاجي والرئوي والاورطي. يسمح الإطار قمي قياس ابعاد غرفه القلب وتقييم المعلمات الانقباضي والانبساطي. كما انه يسمح بتقييم دوبلر مع الكشف والتقدير الكمي لاضطرابات صمام القلب (قلس أو تضيق). يتم تصور الأجزاء والجدران المختلفة للبطين الأيسر في جميع المناظر. وأخيرا ، يمكن ان يكون الشريان الابهر التصاعدي ، والقوس الابهري ، والشريان الابهري التنازلي من خلال النافذة فوق الفوقية. وقد تم الحصول علي مزيج من التصوير بالموجات فوق الصوتية ، وتدفق دوبلر والانسجه دوبلر التقييم لدراسة المورفولوجية القلب ووظيفة. وهذا يمثل مساهمه هامه لتحسين تقييم وظيفة القلب في الفئران البالغين مع تاثير للبحوث باستخدام هذه النماذج الحيوانية.
امراض القلب والاوعيه الدموية هي السبب الرئيسي للوفاة في أوروبا ، والمسؤولة عن أكثر من 4,000,000 وفاه سنويا ، علي الرغم من التقدم في العلاج والتشخيص والرصد التي تحسنت نتائج المرضي في السنوات الاخيره. وقد ساهم التطور التكنولوجي السريع في التقدم في رعاية المرضي القلب والاوعيه الدموية. وفي اطار هذه الاداات التشخيصية ، تم إيلاء اهتمام خاص للتصوير الطبي الإحيائي ، الذي يسمح باجراء تقييم تشريحي ووظيفي بطريقه غير تدخليه1و2و3. المثل ، يستفيد الطب من نتائج البحوث الطبية الحيوية. نماذج الحيوانية التجريبية هي مفيده جدا لاختبار فرضيات مستمده من الاعداد السريرية وتطوير العلاجات المبتكرة4،5.
هناك اهتمام متزايد في استخدام تخطيط صدي كاداه بحثيه في النماذج الحيوانية التجريبية ، مما يسمح بالحصول علي قياسات متعددة من الحيوانية واحده في الدراسات الطولية. من المهم ان نلاحظ ان هناك بعض المزايا في استخدام نماذج murine أو القوارض. الفترة القصيرة الحمل ، وانخفاض تكلفه تربيه والإسكان ، ومعرفه الجينوم وامكانيه تطوير الكائنات المحورة وراثيا هي المزايا الرئيسية لهذه الأنواع ، مما يجعلها جذابة لدراسة أليات المعنية في امراض القلب والاوعيه الدموية4،5،6،7،8،9. علي الرغم من ان نماذج الفئران والفار تظهر مزايا مماثله, الفئران هي الخيار الكلاسيكي في دراسات القلب والاوعيه الدموية بسبب البعد المادي الأكبر وانخفاض معدل ضربات القلب التي توفر صورا أفضل في دراسات تخطيط صدي4,5,6,7,8,9,10.
نحن وصف بروتوكول تخطيط صدي باستخدام معدات الموجات فوق الصوتية الطبية التقليدية لتقييم غرف القلب وصمامات القلب (التشريح والوظيفة) باستخدام الفئران Wistar. هذا بروتوكول مختصر وكامل للصور القصيرة والحلقات التي تسمح بالقياسات غير المتصلة ، والتي يمكن مراجعتها لاحقا لدمج متغيرات أو قياسات جديده مع مرور الوقت.
يسمح هذا البروتوكول دراسة تخطيط صدي كامله باستخدام معدات الموجات فوق الصوتية الطبية التقليدية ومسبار عالي التردد في الفئران الكبار. هذا هو جانب مهم من البروتوكول ، لان معدات الموجات فوق الصوتية مخصصه للحيوانات الصغيرة مكلفه والاستثمار ليست دائما مبرره.
كما تتطلب الدراسات التصويرية الطولية التخدير المتكرر ، واقترح مزيج من ميديميودين-ميدازولام-الفنتانيل في هذا البروتوكول لأنها أكثر ملاءمة للاستخدام التسلسلي بالمقارنة مع ايزوفلوراني أو خليط من الكيتامين-اكسيليازين ، في الفئران Wistar. ومع ذلك ، فان بروتوكول تخطيط صدي المقترح متوافق مع اي بروتوكول تخدير آخر16. كما هو موضح ، يتضمن بروتوكول تخطيط صدي لدينا تقييم العديد من المعلمات التي تمكن من تحديد التغيرات القلبية التشريحية والوظيفية.
التركيز علي توصيف التشريحية ، فمن الممكن لتقييم ابعاد جميع غرف القلب والتخفيفات الخاصة بهم ، تضخم البطين الأيسر ، التليف الليفي أو كالسيكاتشنز. فيما يتعلق بوظيفة القلب ، يمكن تحليل وظيفة الانقباضي البطيني الأيسر والانبساطي والوظيفة الانقباضية البطينية اليمني1،3،4. أيضا ، يتم دراسة تشريح صمام القلب ووظيفته ، وذلك باستخدام 2D-صدي لتوصيف التشريحية (تحديد التليف ، تكلس أو فتح غير طبيعي) واستخدام دوبلر التصوير لتوصيف وظيفية والكشف عن تضيق أو ارتجاع. التصوير دوبلر اللون يتيح الكشف عن اتجاه التدفق والاضطرابات وموجات دوبلر الطيفية تسمح قياسات السرعات والتدرجات1،3.
تم الحصول علي جوده الصورة المناسبة في جميع الفئران تقريبا (أصغر وزن من 200 غرام) ، علي الرغم من انه نظرا للاختلافات بين الافراد في علم التشريح ، لا يمكن الحصول علي وجات النظر تخطيط صدي مع التعريف نفسه بالبالضبط بين الفئران ، والتي قد يكون لها تاثير في قياسات البعد تجويف. وهناك 5% من المراقبين الداخليين الذي تم الإبلاغ عنه في قياسات البطين الأيسر17. وبصفه خاصه ، عند استخدام وضع M لقياسات البطين الأيسر ، قد توجد القيود التالية: صعوبات في الحصول علي زاوية متعامدة ؛ بما في ذلك الأجزاء القاعدية فقط (مما يؤدي إلى قياسات غير دقيقه في وجود تضخم غير متناظرة أو خلل الانقباضي الإقليمي) ؛ والافتراضات الهندسية (بالنظر إلى ان البطين الأيسر هو الاهليلجي المتاخر مع 2:1 المحور الطويل/القصير والتوزيع المتماثل لتضخم). كما ان ادراج قياسات مكعب قد يؤثر علي الدقة ، لأنه حتى خطا صغير في الابعاد قد يؤدي إلى المبالغة في تقدير الكتلة1،3،10. حتى عند استخدام وحدات التخزين وكسر الطرد المحسوب بواسطة أسلوب سيمبسون ، هناك عيوب: القمه غالبا ما تقصير ؛ التسرب الشغاف يمكن ان التحيز القياس واعمي لتشكيل تشوات لا يتصور في الاربعه والثانية 2-الغرفة وجات النظر1,3,10.
والاهم من ذلك ، يسلط هذا البروتوكول الضوء علي استخدام القياسات والتقييمات المتقدمة ، مثل سلاله البطين الأيسر ومعدل السلالة ، التي يتمتقييمها عن طريق تتبع البقع ، لتحقيق المزيد من المعلومات الكاملة حول سلوك ألياف عضلهالقلب 1 ،3. للحصول علي تقييم أكثر دقه لسلاله وسلاله ، والاستفادة المثلي من جوده الصورة ، والتعظيم من معدل الإطار ، والتقليل من تقصير ابيكس مطلوبه. يتم استخدام السلالة الطولية العالمية midwall لأنها توافق مع المزيد من البيانات المتاحة المنشورة وقد أظهرت في العديد من الدراسات السريرية لتكون قويه وقابله للتكرار10. اليكتروكارديوجرافيك الرصد المتكاملة في المعدات عرضه جدا للتحف ، وهو قيد. أيضا ، من المهم جدا القول بان حاله القلب الوظيفي أو الدموي للفئران يمكن ان تعتمد علي متغيرات مثل درجه الحرارة وضغط الدم ومعدل ضربات القلب4،5،6،7،8،9،13،14،17.
وبما ان القرار مرتبط بتردد المسبار ، فمن المتوقع ان تتطور التطورات المستقبلية لتحقيق ترددات اعلي التالي دقه اعلي وتعريف صوره في التصوير غير الغازي للقلب والاوعيه الدموية في الكائنات الصغيرة ، مع هذا النوع من المعدات. ويعتبر توحيد الأساليب والقياسات أمرا حاسما في هذا المجال من البحوث ، والتوصل إلى تشخيص تخطيط صدي أكثر دقه من نماذج الفئران التجريبية والتي تؤدي إلى فهم أفضل للاحياء الجزيئية للقلب والاوعيه الدموية البشرية الامراض.
The authors have nothing to disclose.
ويدعم المعهد الوطني للمنح الدراسية و ATP الزمالات SFRH/BD/121684/2016 و SFRH/برميل/123181/2016 ، علي التوالي ، من Fundação para a Ciência e Tecnologia.
12S-RS Probe | GE Medical Systems | H44901AB | |
Antisedan (5 mg/ml) | Esteve | P01B9003 | |
EKG monitoring unit | GE Medical Systems | N/A | |
Electrodes | FIAB | F9089/100 | |
Fentanilo (0.05 mg/ml) | B.Braun | BB3644960 | |
Flumazenilo (0.1 mg/ml) | Generis | MUEH5933080 | |
Insuline Syringe 1ml | SOL M | 1612912 | |
Lubrithal gel (10mg) | Dechra | NC519 | |
Medetor (1 mg/ml) | Vibarc | P01B0308 | |
Midazolan (5 mg/ml) | Labesfal | MUEH5506191 | |
Shaver Razor AESCULAP Isis GT608 | Braun | 90200714 | |
Small Animal Heated Pad 120volts | K&H Manufacturing inc. | 655199010608 | |
Ultrasound Gel | Parker Laboratories | REF 01-08 | |
Ultrasound machine | GE Medical Systems | VIVID T8 | |
Underpads | Henry Schein | 900-8132 |