תאים כליליים ובסמנים מסיסים בפרוגנוזה לב וכלי דם לאחר אנגיופלסטיקה כלילית
Summary
פיתוח של אירועים משמעותיים וכלי דם לוואי, אשר השפעה פרוגנוזה לב וכלי דם לאחר הניתוח אנגיוקולרי, מושפעים במידה של נזק כלילית ותיקון כלי דם. השימוש בסמנים מסיסים בעלי כלילית תאית ומסיס, מגיב לנזק ולתיקון כלי דם, שימושיים לניבוי התפתחות של MACEs ופרוגנוזה.
Abstract
מייג אירועים שליליים לב וכלי דם (MACEs) השפעה שלילית על הפרוגנוזה לב וכלי דם של חולים שעברו אנגיופלסטיקה כלילית עקב פציעה איסכמי כלילית. היקף הנזק הכלילי ומנגנוני תיקון כלי הדם הם גורמים המשפיעים על התפתחות עתידית של MACEs. תכונות כלי דם פנימיים כמו מאפייני הפלאק ומורכבות עורק כלילית הפגינו מידע התחזיות של MACEs. עם זאת, השימוש בסמנים מחזורי במחזור תאיים כבר היסוד כשיטה נוחה לזיהוי מוקדם הפרוגנוזה של MACEs, כפי שהם יותר קרוב לשקף מנגנונים דינאמיים מעורבים נזק כלילית ותיקון. קביעת כלילית מחזורי הסמנים במהלך הניתוח אנגיופלסטיקה, כגון מספר אוכלוסיות משנה של בתאי מחולל קדמון (MPCs), כמו גם ריכוז של מולקולות מסיסים המשקף דלקת, הדבקה תא, ותיקון, מאפשר הערכה של ההתפתחויות בעתיד ואת הפרוגנוזה של MACEs 6 חודשים לאחר הניתוח אנגיופלסטיקה. שיטה זו מודגשת על ידי הטבע הטרנסג שלה וביצועים טובים יותר מאשר דם היקפי מחזורי ביואריטים לגבי חיזוי של MACEs ואת השפעתו על פרוגנוזה לב וכלי דם, אשר ניתן להחיל על ריבוד סיכון של חולים עם מחלת עורקים בעורק כלילי.
Introduction
אנגיופלסטיקה כלילית והסטטינג מייצגים הליך הצלה עבור חולים עם מחלת עורקים כלילית (CAD). עם זאת, אירועים משמעותיים וכלי דם שליליים (MACEs), כולל מוות לב וכלי דם, אוטם שריר הלב, היצרות מחדש כלילית, ופרקים של אי ספיקת לב או חוסר התאמה, עלול להתרחש חודשים לאחר התערבות כלילית, הצגת ביקורים לא מתוכננת לבית החולים. מק נפוצים ברחבי העולם והתמותה המורבית שלהם הוא גבוה1.
פגיעה איסכמי כלילית גורמת התגובה כלי דם מוקדם מנגנונים מגיבים מעורבים הגיוס של mpcs בשל יכולת הבידול שלהם ו/או הפוטנציאל מגיב, כמו גם את הייצור של מולקולות מסיסים כמו מולקולות הדבקה התרבות (icams), מטריקס מטלומטיות (mmps), ומינים חמצן תגובתי, המשקף תא ה למרות התכונות הפנימיות כלי דם כמו מאפייני פלאק ומורכבות עורק כלילי שימשו כדי לנבא maces, מחקרים מסוימים הראו כי בסמנים הקשורים מנגנונים של פציעה ותיקון המתרחשים אנדותל כלילית יכול להיות מאוד שימושי לזיהוי מוקדם ופרוגנוזה של אירועי לב וכלי דם בחולים עם CAD נשלח לניתוח כלילית2,
עניין מתמשך של הבנת המנגנונים בבסיס הפציעה CAD ותיקון יש מוטיבציה חוקרים לחקור בסמנים מחזורי במחזור תאיים, כי דגימה כלילית יותר משקף נזק כלי דם ותיקון6. עם זאת, אפיון של סמנים כליליים במחקרים אנושיים כבר נדיר7,8,9. לכן, מטרת המחקר הנוכחי היה לתאר שיטה כדי לקבוע את הכמות של מחזורי כלילית MPCs ו מולקולות מסיסים, המשקף הן פגיעה בכלי הדם ותיקון, כדי להראות אם אלה בסמנים הקשורים MACEs ואת הפרוגנוזה הקלינית של מטופלים CAD שעברו כלילית אנגיופלסטיקה. שיטה זו מבוססת על שימוש בכלי דם הקשורים, מחזורי MPCs ו מולקולות מסיסים שהתקבלו על ידי מיקומים דגימה הקרובה ביותר לנזק כלי. זה עשוי גם להיות שימושי עבור מחקרים קליניים עבור איסכמיה הגפיים התחתונה, שבץ, דלקת כלי דם, פקקת ורידי, ופציעות אחרות הקשורות לפציעה ותיקון של נימי דם.
Protocol
Representative Results
Discussion
איסוף הדם מעורק העורקים המושפע עלול להיות קשה. לפעמים, עורק העורק הראשי. בקושי נגיש במקרה זה, דגימת סינוס של הורידים עשויה להיות חלופה. בוצעו בדיקות אימות השוואת ביורים מחזורי הסמנים בעורק כלילי לעומת הסינוס ורידי, ללא הבדלים משמעותיים. עם זאת, הביצועים של מחזורי הסמנים הבין-מסתובבים אומתו…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
המחברים מודים בתמיכת התוכנית המוסדית E015; וfondo Sectorial-CONACYT, SALUD-2014-1-233947.
Materials
| BSA | Roche | 10735086001 | Bovine Serum Albumin (BSA) as a buffering agent, stabilizer, standard and for blending. |
| Calibration Beads | Miltenyi Biotec / MACS | #130-093-607 | MACQuant calibration beads are supplied in aqueous solution containing 0.05% sodium azide. 3.5 ml for up to 100 tests |
| CD133/1 (AC133)-PE | Milteny Biotec / MACS | #130-080-801 | Antibody conjugated to R-Phycoerythrin in PBS/EDTA buffer |
| CD184 (CXCR4)-PE-VIO770 | Miltenyi Biotec / MACS | #130-103-798 | Monoclonal, Isotype recombinant human IgG1, conjugated |
| CD309 (VEGFR-2/KDR)-APC | Miltenyi Biotec / MACS | #130-093-601 | Antibody conjugated to R-Phycoerythrin in PBS/EDTA buffer |
| CD34-FITC | Miltenyi Biotec / MACS | #130-081-001 | The monoclonal antibody clone AC136 detecs a class III epitope of the CD34 |
| CD45- VioBlue | Miltenyi Biotec / MACS | #130-092-880 | Monoclonal CD45 Antibody, human conjugated |
| Conical Tubes | Thermo SCIENTIFIC | #339651 | 15ml conical centrifuge tubes |
| Cytometry Tubes | FALCON Corning Brand | #352052 | 5 mL Polystyrene Round-Bottom Tube. 12×75 style. Sterile. |
| EDTA | BIO-RAD | #161-0729 | Heavy metals, (as Pb) <10ppm, Fe <0.01%, As <1ppm, Insolubles <0.005% |
| Improved Neubauer | Without brand | Without catalog number | Hemocytometer for cell counting. (range 0.1000mm, 0.0025mm2) |
| K2 EDTA Blood Collection Tubes | BD Vacutainer | #367863 | Lilac plastic vacutainer tube (K2E) 10.8mg, 6 mL. |
| Lymphoprep | Stemcell Technologies | 01-63-12-002-A | Sterile and checked on the presence of endotoxins. Density: 1.077±0.001g/mL |
| Paraformaldehyde | SIGMA-ALDRICH | #SZBF0920V | Fixation of biological samples, (powder, 95%) |
| Pipette Transfer 1,3mL | CRM Globe | PF1016, PF1015 | The transfer pipette is a tool that facilitates liquid transfer with greater accuracy. |
| Test Tubes | KIMBLE CHASE | 45060 13100 | Heat-resistant test tubes. SIZE/CAP 13 x 100 mm |
References
- Cassar, A., Holmes, D. R., Rihal, C. S., Gersh, B. J. Chronic coronary artery disease: diagnosis and management. Mayo Clinic Proceedings. 84 (12), 1130-1146 (2009).
- Regueiro, A., et al. Mobilization of endothelial progenitor cells in acute cardiovascular events in the PROCELL study: time-course after acute myocardial infarction and stroke. Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 80, 146-155 (2015).
- Sen, S., McDonald, S. P., Coates, P. T., Bonder, C. S. Endothelial progenitor cells: novel biomarker and promising cell therapy for cardiovascular disease. Clinical Science (Lond). 120 (7), 263-283 (2011).
- Samman Tahhan, A., et al. Progenitor Cells and Clinical Outcomes in Patients With Acute Coronary Syndromes. Circulation Research. 122 (11), 1565-1575 (2018).
- Tomulić, V., Gobić, D., Lulić, D., Židan, D., Zaputović, L. Soluble adhesion molecules in patients with acute coronary syndrome after percutaneous coronary intervention with drug-coated balloon, drug-eluting stent or bare metal stent. Medical Hypotheses. 95, 20-23 (2016).
- Jaumdally, R., Varma, C., Macfadyen, R. J., Lip, G. Y. Coronary sinus blood sampling: an insight into local cardiac pathophysiology and treatment?. European Heart Journal. 28 (8), 929-940 (2007).
- Kremastinos, D. T., et al. Intracoronary cyclic-GMP and cyclic-AMP during percutaneous transluminal coronary angioplasty. International Journal of Cardiology. 53 (3), 227-232 (1996).
- Karube, N., et al. Measurement of cytokine levels by coronary sinus blood sampling during cardiac surgery with cardiopulmonary bypass. American Society for Artificial Internal Organs Journal. 42 (5), M787-M791 (1996).
- Truong, Q. A., et al. Coronary sinus biomarker sampling compared to peripheral venous blood for predicting outcomes in patients with severe heart failure undergoing cardiac resynchronization therapy: the BIOCRT study. Heart Rhythm. 11 (12), 2167-2175 (2014).
- Suárez-Cuenca, J. A., et al. Coronary circulating mononuclear progenitor cells and soluble biomarkers in the cardiovascular prognosis after coronary angioplasty. Journal of Cellular and Molecular Medicine. 23 (7), 4844-4849 (2019).
- Suárez-Cuenca, J. A., et al. Relation of Coronary Artery Lumen with Baseline, Post-angioplasty Coronary Circulating Pro-Inflammatory Cytokines in Patients with Coronary Artery Disease. Angiology Open Access. 7, 01 (2019).
- Schmidt-Lucke, C., et al. Quantification of circulating endothelial progenitor cells using the modified ISHAGE protocol. PLoS One. 5 (1), e13790 (2010).
- Moyer, C. F., Sajuthi, D., Tulli, H., Williams, J. K. Synthesis of IL-1 alpha and IL-1 beta by arterial cells in atherosclerosis. American Journal of Pathology. 138 (4), 951-960 (1991).
- Morales-Portano, J. D., et al. Echocardiographic measurements of epicardial adipose tissue and comparative ability to predict adverse cardiovascular outcomes in patients with coronary artery disease. International Journal of Cardiovascular Imaging. 34 (9), 1429-1437 (2018).
- Huang, X., et al. Endothelial progenitor cells correlated with oxidative stress after mild traumatic brain injury. Yonsei Medical Journal. 58 (5), 1012-1017 (2017).
