간 알코올 탈수소효소의 SNS 핀서 코발트(II) 모델 복합체의 제조가 여기에 제시된다. 복합체는 CoCl2·6H2O로 리간드 전구체를 반응시킴으로써 제조될 수 있고, 디에틸 에테르가 코발트 복합체를 함유하는 아세토니트릴 용액으로 천천히 확산되도록 함으로써 재결정화될 수 있다.
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이 논문에서
요약
초록
화학 모델 복합체는 효소의 활성 부위를 나타내기 위해 제조된다. 이 프로토콜에서 삼각측량 집게 리간드 전구체(각각 2개의 유황 및 1개의 질소 공여자 원자 기능(SNS)를 소유하고 비스-이미다졸 또는 비스트리아졸 화합물을 기반으로)의 패밀리는 CoCl2·6H2O와 함께 금속화되어 삼지창 면체 코발트(II) 복합체를 감당할 수 있다. 코발트(II) 모델 복합체의 간 알코올 탈수소효소의 제제는 허구이다. 리간드 전구체를 함유하는 아세토니트릴 용액에 CoCl2·6H2O를 첨가할 때 빠른 색상 변화에 기초하여, 복합체는 빠르게 형성된다. 금속 복합체의 형성은 용액이 하룻밤 동안 역류할 수 있도록 허용한 후에 완료된다. 이러한 코발트(II) 복합체는 간 알코올 탈수소효소(LADH)에서 아연 활성 부위의 모델역할을 한다. 복합체는 단결정 X선 회절, 전기 분무 질량 분광법, 자외선 이시광선 분광법 및 원소 분석을 사용하는 것이 특징입니다. 정확하게 복잡한의 구조를 결정하기 위해, 그 단결정 구조를 결정해야합니다. X 선 회절에 적합한 복합체의 단결정은 디에틸 에테르의 느린 증기 확산을 통해 코발트 (II) 복합체를 포함하는 아세토나이트트릴 용액으로 성장합니다. 고품질 결정의 경우, 재결정화는 일반적으로 1주일 이상 또는 그 이상에 걸쳐 이루어집니다. 이 방법은 다른 모델 조정 단지의 준비에 적용 될 수 있으며 학부 교육 실험실에서 사용할 수 있습니다. 마지막으로, 다른 사람들이 자신의 연구에 유익한 단결정을 얻기 위해이 재결정 방법을 찾을 수 있다고 믿어진다.
서론
제시된 방법의 목적은 금속로효소의 촉매 활성을 더 이해하기 위해 LADH의 소분자 유사체를 제조하는 것이다. LADH는 보조 인자 결합 도메인 및 아연(II) 금속 함유 촉매 도메인1을포함하는 디메릭 효소이다. LADH는, 공동 인자 NADH의 존재, 케톤 및 알데히드각각의 알코올 유도체2를감소시킬 수 있다. NAD+의존재에서, LADH는 케톤과 알데히드2에알코올의 산화의 역 촉매를 수행 할 수 있습니다. LADH의 활성 부위의 결정 구조는 그것의 아연 (II) 금속 센터가 히스티딘 측사슬과 2 개의 유황 원자에 의해 제공되고 두 개의 시스테인 리간드3에의해 제공되는 하나의 질소 원자에 결합되어 있음을 보여줍니다. 추가 연구는 아연 금속 센터가 비질 물 분자로 결찰되어 금속 센터 주위에 의사 - 적층 기하학의 결과로4.
우리는 이전에 보고및 활용 SNS 핀터 리간드 전구체뿐만 아니라 삼각리그 리간드 전구체를 포함하는 Zn (II) 복합체를 형성하기 위해 ZnCl2와 리간드 전구체를 금속화
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프로토콜
1. 클로로-(n3-S,S,N)-[2,6-비스(N-이소프로필-N'-메틸렌에미다졸-2-티오네)피리딘]코발트(II)테트라클로로코발테이트 [4]
- 복잡한 4를준비하려면 2,6-bis (N-isopropyl-N'-methyleneimidazole-2-thione)의 0.121 g (3.12 x 10-4 mol)을 추가하십시오.피리딘 (C19H25N5S2)100 mL 의 아세토니트릴 6 ~ 15 mL. 다음으로, 이 용액에 0.0851 g (3.58 x 10-4 mol)의 코발트 염화물 (II) 헥사 하이드레이트 (CoCl2·6H2O)를 추가하십시오. 반응 용액은 코발트(II) 염화물 헥사하이드레이트가 첨가된 직후 밝은 노란색에서 에메랄드 그린으로 변해야 합니다.
- 플라스크에 볶음 바를 추가합니다. 역류및 완전한 반응을 보장하기 위해 20 시간 동안 반응을 저어. 감소된 압력하에서 로토바를 사용하여 용매를 제거합니다.
2. 클로로-(n3-S,S,N....
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결과
합성
복합체 4 및 5의 합성은 코발트(II) 염화물 헥사하이드레이트와 함께 비스티온 리간드 전구체를 함유하는 아세토니트릴 용액을 반응시킴으로써 성공적으로 수행되었다(도2). 이 반응은 공기가있는 환류 온도에서 발생했습니다. 일반적으로, 복합체 4 및 5는 아세토니트릴, 디메틸 설폭사이드, 디클로로메탄 및 메탄올에 용해되는 것으로 관찰되었다. 복합 4는 녹색이고 복잡한 5는 파란색이었습니다. 단지 4와 5의 백분율 수율은 양적이었습니다.
엑스레이 결정학
복합체 4 및 5의<.......
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토론
단지 4와 5의 준비는 허구입니다. 핵심 단계는 각각의 리간드 전구체를 포함하는 아세토니트릴 용액에 고체 CoCl2·6H2O를 추가하는 것이다. 이 용액은 CoCl2·6H2O를 첨가한 후 몇 초 만에 진한 녹색으로 변하여 복잡한 4를형성한다. 이 용액은 CoCl2·6H2O를첨가한 후 밝은 파란색으로 변하여 복잡한 5를형성한다. 완전한 반응을 보장하기 위해 용액은 하룻밤 동안 역류에 놓입니다.
복합체 4 및 5의단결정 성장하려면 복합체 4 또는 5를 포함하는 아세토니트릴 용액을 농축해야합니다. 복합체는 가능한 한 농축된 복합체.......
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공개 사항
저자는 공개 할 것이 없다.
감사의 글
존 Miecznikowski는이 프로젝트에 대한 다음과 같은 재정 지원을 받았다: 코네티컷 NASA 우주 보조금 얼라이언스 (수상 번호 P-1168), 페어 필드 대학 과학 연구소, 예술과 과학 출판 기금, 페어 필드 대학 학부 여름 연구 수급, 그리고 국립 과학 재단 - 주요 연구 계측 프로그램 (그랜트 번호 CHE-1827854) 자금을 획득하는 자금 400 MHz의 NMR 분광계. 그는 또한 테렌스 우 (예일 대학) 전기 스프레이 질량 스펙트럼을 획득하는 데 도움을 주셔서 감사합니다. Jerry Jasinski는 X 선 회절계를 구입하는 기금에 대한 국립 과학 재단 - 주요 연구 계측 프로그램 (그랜트 번호 CHE-1039027)을 인정합니다. 쉴라 보니타티부스, 에밀세 알만자, 라미 하르부흐, 사만다 지그몬트는 여름 연구 비를 제공하는 하디만 학자 프로그램을 인정한다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 100mL 원형 바닥 플라스크 | 화학 유리 | CG150691 | 100mL 단일 목 원형 바닥 플라스크, 19/22 외부 조인트 |
| Acetonitrile | Fisher | HB9823-4 | HPLC 등급 |
| 냉각기 | Lauda | L000638 | Alpha RA 8 |
| Cobalt Chloride hexahydrate | Acros Organics | AC423571000 | Acros Organics |
| Diethyl Ether | Fisher | E-138-1 | Diethyl Ether Anhydorus |
| 눈금 실린더 | Fisher | S63456 | 25 mL 눈금 실린더 |
| 핫 플레이트 | Fisher | 11-100-49SH | Isotemp Basic Stirring Hotplate |
| jars | Fisher | 05-719-481 | 250 mL jars |
| Ligand | ----- | ----- | Miecznikowski 교수에 의해 이전에 Synthezied |
| 면봉 | Fisher | 22-456-80 | 중간 면봉 1 |
| 드람 바이알 | Fisher | 03-339 | TFE 라이닝 캡이있는 1 드람 바이알 |
| 피펫 Fisher | 13-678-20B | 5.75 인치 피펫 피펫 | |
| 전구 | Fisher | 03-448-21 | Fisher 브랜드 라텍스 전구 |
| 모래 목욕용 피펫 재결정 접시 | Fisher | 08-741 D | 325 mL 모래 목욕 |
| 역류 응축기 | Chem Glass | CG-1218-A-22 | 콘덴서 (19/22 내부 조인트 |
| Rotovap | Heidolph Collegiate | 36000090 | Brinkmann; Heidolph Collegiate 로터리 증발기, Heidolph WB 에코 배스, Heidolph 로터리 증발기 |
| 모래 목욕용 바다 모래 | Acros Organics, | 612355000모래 | 목욕용 세척 바다 모래 |
| 교반 바 | Fisher | 07-910-23 | 달걀 모양의 자기 교반 바 |
| 진공 그리스 | Fisher | 14-635-5D | 다우 코닝 |
| 로토밥 | Heidolph Collegiate | 36302830 | Heidolph Rotovac 밸브 제어 |
참고문헌
- Holm, R. H., Kennepohl, P., Solomon, E. I. Structural and Functional Aspects of Metal Sites in Biology. Chemical Reviews. 96 (7), 2239-2314 (1996).
- Ibers, J. A., Holm, R. H. Modeling coordination sites in metallobiomolecules. Science. 209 (4453), 223-235 (1980).
- Kannan,....
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재인쇄 및 허가
