रोगी-व्युत्पन्न ज़ेनोबेड़ा (पीडीएक्स) मॉडल और प्रत्यारोपण आनुवंशिक रूप से इंजीनियर माउस मॉडल ईमानदारी से मानव रोग का पुनर्पूंजीकरण करते हैं और बुनियादी और ट्रांसलेशनल स्तन कैंसर अनुसंधान के लिए पसंदीदा मॉडल हैं। यहां, ट्यूमर जीव विज्ञान का अध्ययन करने और दवा प्रतिक्रिया का मूल्यांकन करने के लिए स्तन ट्यूमर के टुकड़ों को स्तन ट्यूमर के टुकड़ों को स्तन वसा पैड में ऑर्थोटोपिकली प्रत्यारोपण करने के लिए एक विधि का वर्णन किया गया है।
प्रीक्लिनिकल मॉडल जो ईमानदारी से ट्यूमर विषमता और चिकित्सीय प्रतिक्रिया का पुनर्पूंजीकरण करते हैं, अनुवाद स्तन कैंसर अनुसंधान के लिए महत्वपूर्ण हैं। अमर कोशिका रेखाओं को विकसित करने के लिए आसान कर रहे है और आनुवंशिक रूप से आणविक तंत्र का अध्ययन करने के लिए संशोधित, अभी तक सेल संस्कृति से चयनात्मक दबाव अक्सर समय के साथ आनुवंशिक और एपीजेनेटिक परिवर्तन की ओर जाता है । रोगी-व्युत्पन्न ज़ेनोबेड़ा (पीडीएक्स) मॉडल ईमानदारी से मानव स्तन ट्यूमर की विषमता और दवा प्रतिक्रिया को फिर से रीकैपिटल करता है। पीडीएक्स मॉडल ऑर्थोटोपिक प्रत्यारोपण के बाद अपेक्षाकृत कम विलंबता प्रदर्शित करते हैं जो स्तन ट्यूमर जीव विज्ञान और दवा प्रतिक्रिया की जांच की सुविधा प्रदान करता है। प्रत्यारोपण आनुवंशिक रूप से इंजीनियर माउस मॉडल स्तन ट्यूमर प्रतिरक्षा के अध्ययन की अनुमति देते हैं । वर्तमान प्रोटोकॉल दवा उपचार के बाद स्तन वसा पैड में ऑर्थोटॉपिकली प्रत्यारोपण स्तन ट्यूमर के टुकड़े करने की विधि का वर्णन करता है । ये प्रीक्लिनिकल मॉडल स्तन ट्यूमर जीव विज्ञान, दवा प्रतिक्रिया, बायोमार्कर खोज और दवा प्रतिरोध के तंत्र की जांच करने के लिए मूल्यवान दृष्टिकोण प्रदान करते हैं।
स्तन कैंसर से होने वाली अधिकांश मौतों को आवर्ती रोग के लिए जिम्मेदार ठहराया जा सकता है जो पारंपरिक उपचारों के लिए प्रतिरोधी है1,2. स्तन कैंसर की अंतर और अंतर-ट्यूमर विषमता चिकित्सा प्रतिरोध में योगदान देती है। इसके अलावा, ट्यूमर विषमता सटीक पूर्वानुमान पर अतिक्रमण कर सकती है और रोग प्रबंधन3,4को चुनौती दे सकती है। प्रतिक्रिया के भविष्य कहनेवाला बायोमार्कर की पहचान स्तन कैंसर के रोगियों के नैदानिक परिणामों में काफी सुधार होगा। हालांकि अधिकांश स्तन कैंसर प्रकार इम्यूनोलॉजिकल रूप से ‘ठंड’ ट्यूमर हैं जो इम्यूनोथेरेपी के प्रति अनुत्तरदायी हैं, प्रतिरक्षा चेकपॉइंट अवरोधकों ने नैदानिक परीक्षणों में वादा दिखाया है2,5। उदाहरण के लिए, एक चरण III परीक्षण में सुधार रोग मुक्त अस्तित्व (DFS) और प्रारंभिक सबूत है कि aezolizumab (पीडी-L1 के खिलाफ मोनोक्लोनल एंटीबॉडी) एनएबी-paclitaxel के साथ संयुक्त एक समग्र अस्तित्व लाभ प्रदान कर सकते है के रूप में एक समग्र अस्तित्व लाभ प्रदान कर सकते है के रूप में अकेले एनएबी-paclitaxel के साथ ट्यूमर में ≥1% पीडी-L1 दाग6। इम्यूनोथेरेपी के लिए स्तन ट्यूमर को जागरूक करने वाले उपचारों का विकास उपचार आहार में क्रांतिकारी बदलाव लाएगा।
प्रीक्लिनिकल मॉडल जो ईमानदारी से मानव स्तन कैंसर विषमता और दवा प्रतिक्रिया का पुनर्पूंजीकरण करते हैं, ट्यूमर जीव विज्ञान का अध्ययन करने और लक्षित चिकित्सा के लिए संभावित बायोमार्कर की पहचान करने के लिए महत्वपूर्ण हैं। अमर कोशिका लाइनों व्यापक रूप से स्तन कैंसर अनुसंधान के लिए उपयोग किया जाता है के बाद से इन सेल लाइनों को विकसित करने के लिए आसान कर रहे है और आनुवंशिक रूप से आणविक तंत्र का अध्ययन करने के लिए संशोधित । हालांकि, विट्रो में दीर्घकालिक सेल संस्कृति के चयनात्मक दबाव के कारण, समय के साथ आनुवंशिक बहाव हो सकता है और स्तन कैंसर कोशिका लाइनों में सेल लाइन-विशिष्ट जीनोमिक परिवर्तन हो सकते हैं जो प्राथमिक स्तन ट्यूमर7,8,9में विपथन से अलग हैं।
रोगी-व्युत्पन्न ज़ेनोबेड़ा (पीडीएक्स) ट्यूमर का हिस्सा मानव रोग की विषमता को फिर से काटना करने में सक्षम हैं, और हिस्टोलॉजिकल और इम्यूनोहिस्टोकेमिक रूप से मूल के ट्यूमर के समान हैं10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21, 22 ,23,24,25,26 ,27,28,29. महत्वपूर्ण बात यह है कि पीडीएक्स मॉडल कई प्रत्यारोपणों में फेनोथिपाइपिक रूप से स्थिर हैं, जैसा कि हिस्टोलॉजी, ट्रांसक्रिप्टोम, प्रोटेम और जीनोमिक विश्लेषण10,11,12, 13,14,15,16,17,18,19,20,21,22 ,23,24,25,26 ,27,28,29. पीडीएक्स मॉडल चिकित्सकीय रूप से देखे गए लोगों के तुलनीय प्रतिक्रियाएं दिखाते हैं10,11,12, 13,14,15,16,17,18,19,20,22,23,24 25,26,27,28,29. एस्ट्रोजन रिसेप्टर पॉजिटिव (ईआर+),प्रोजेस्टेरोन रिसेप्टर पॉजिटिव (पीआर+),एपिडर्मल ग्रोथ फैक्टर 2 पॉजिटिव (ERBB2+,HER2+)और ट्रिपल निगेटिव ब्रेस्ट कैंसर (टीएनबीसी) पीडीएक्स मॉडल के लिए पीडीएक्स मॉडल स्थापित किए गए हैं, और एंडोक्राइन-, कीमो-और लक्षित चिकित्सा का परीक्षण करने के लिए एक उत्कृष्ट मंच प्रदान करते हैं। हालांकि, वर्तमान में पीडीएक्स मॉडल की एक मुख्य चेतावनी माउस में एक कार्यात्मक प्रतिरक्षा प्रणाली की कमी है।
आनुवंशिक रूप से इंजीनियर माउस मॉडल (जीईएम), जैसे टीआरपी 53 होमोज़िगस नल, सीएसवाईसी, डब्ल्यूएनटी 1, पाइएमटी, या हर् 2 ओवरएक्सप्रेशन मॉडल, एक अक्षुण्ण प्रतिरक्षा प्रणाली के संदर्भ में सहज ट्यूमर दीक्षा, प्रगति और मेटास्टेसिस के अध्ययन की अनुमति देते हैं। हालांकि, ट्यूमर विलंबता लंबी है, जिससे कईहथियारों 30, 31के साथ प्रीक्लिनिकल परीक्षणों का संचालन करना मुश्किल होजाताहै। हालांकि, जीईएम को सिंजेनिक मेजबानों में प्रत्यारोपित किया जा सकता है ताकि पर्याप्त संख्या में ट्यूमर उत्पन्न हो सके जो मानव ट्यूमर32,33, 34, 35,36, 37,38,39,40,41,42,43, 44,45, 46,47,48,49,50,51,52,53,54,55. उदाहरण के लिए, एक p53-null BALB/c माउस से स्तन एपिथेलियम को प्राथमिक ट्यूमर बनाने के लिए सिनेनिक जंगली प्रकार के प्राप्तकर्ता चूहों के स्वीकृत वसा पैड में प्रत्यारोपित किया गया था, जिसे सिंजेनिक मेजबान56,57में आगे प्रत्यारोपित किया जा सकता है। p53-नल ट्यूमर मानव ट्यूमर के विभिन्न उपप्रकारों का पुनर्पूंजीकरण ।
पीडीएक्स मॉडल और प्रत्यारोपण जीईएम का संयोजन स्तन ट्यूमर जीव विज्ञान, दवा प्रतिक्रिया और ट्यूमर विरोधी प्रतिरक्षा की जांच करने के लिए मूल्यवान प्रीक्लिनिकल उपकरण प्रदान करता है। वर्तमान प्रोटोकॉल में, माउस स्तन वसा पैड में पीडीएक्स और जेईएम ट्यूमर के टुकड़ों के ऑर्थोटोपिक प्रत्यारोपण की एक विधि वर्णित है। ये मॉडल धारावाहिक मार्ग के लिए उत्तरदायी हैं और आमतौर पर एक स्थिर फेनोटाइप बनाए रखते हैं। समय के साथ मार्ग में आनुवंशिक बहाव या विषमता के नुकसान के जोखिम को कम करने के लिए, इस घटना में बाद के प्रत्यारोपण के लिए प्रत्येक मार्ग पर कई ऊतकों के टुकड़े क्रायोप्रीड किए जाते हैं कि समय29,58के साथ जैविक या रूपात्मक परिवर्तन देखे जाते हैं।
जानवरों में ट्यूमर के विकास में भिन्नता को कम करने के लिए, प्रत्यारोपण के लिए ट्यूमर ऊतक को 1 मिमी3 टुकड़ों में काटना महत्वपूर्ण है। नरम ऊतक बढ़ने वाले मॉडल के साथ काम करना कठिन होता है और ट्यूमर के ट?…
The authors have nothing to disclose.
इस काम को राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थानों (R37CA228304 और R01HL146642 से शी चेन, CA148761 से जेफरी एम रोसेन), अमेरिकी रक्षा विभाग (W81XWH-19-1-0524 Xi चेन को समर्थन मिला, W81XWH-19-1-0035 Xiangdong Lv करने के लिए, अमेरिकन कैंसर सोसायटी (RSG-181-01-TBE से शी चेन) और कैंसर की रोकथाम और अनुसंधान टेक्सास के अनुसंधान संस्थान (RR150009 CPRIT विद्वान कैंसर अनुसंधान पुरस्कार में शी चेन), बायलोर कॉलेज ऑफ मेडिसिन में वीवो मॉडल कोर में रोगी-व्युत्पन्न Xenograft और उन्नत (RP170691 CPRIT कोर सुविधा पुरस्कार और NCI-CA125123 P30 कैंसर सेंटर सपोर्ट ग्रांट से धन) ।
1 mg/mL Buprenorphine-SR | ZooPharm (via BCM veterinarians) | Sterile | |
26G syringe | BD | 148232E | Sterile |
Betadine Scrub | Fisher | 19-027132 | |
Cotton Swabs | VWR International Laboratory | 89031-272 | Sterile |
DMEM | Fisher | MT 10-013-CM | Sterile |
Electric shaver | Oster | 78005-050 | |
Glass beads sterilizer (Germinator) | Roboz Surgical Store | DS-401 | |
Lubricant ophthalmic ointment | Akorn Animal Health | 17478-062-35 | |
Micro Dissecting Forceps; Serrated, Angular (regular forceps) | Roboz Surgical Store | RS-5139 | Sterile |
Micro Dissecting Spring Scissors (fat pad cutter) | Roboz Surgical Store | RS-5658BT | Sterile |
Micro Forceps (tissue placing forceps) | Roboz Surgical Store | RS-5069 | Sterile |
Petri Dish | Fisher | 08-757- 100D | Sterile |
Sterile drape | Sai Infusion Technology | PSS-SD1 | Sterile |
Surgery scissors | Roboz Surgical Store | RS-5960 | Sterile |
Tissue Forceps (claw forceps) | Roboz Surgical Store | RS-5158 | Sterile |
Wound clip applier | BD Autoclip Wound System | 01-804 | Sterile |
Wound clip remover | BD Autoclip Wound System | 01-804-15 | Sterile |
Wound clips | BD Autoclip Wound System | 01-804-5 | Sterile |