두개 내 뇌 전이 모델링은 정확하고 시기 좋은 방법으로 치료에 종양 크기와 반응을 모니터링할 수 없다는 것에 의해 복잡합니다. 제시된 방법론은 자기 공명 화상 진찰 분석과 두개 내 종양 주입을 결합할 때, 정확하고 일관된 주사, 향상된 동물 감시 및 정확한 종양 부피 측정을 육성합니다.
이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.
두개 내 뇌 전이 모델링은 정확하고 시기 좋은 방법으로 치료에 종양 크기와 반응을 모니터링할 수 없다는 것에 의해 복잡합니다. 제시된 방법론은 자기 공명 화상 진찰 분석과 두개 내 종양 주입을 결합할 때, 정확하고 일관된 주사, 향상된 동물 감시 및 정확한 종양 부피 측정을 육성합니다.
암의 전이성 확산은 질병 진행, 공격적인 암 아류형 및 /또는 늦은 진단의 불행한 결과입니다. 뇌 전이는 특히 파괴적이고 치료하기 어렵고 가난한 예후를 부여합니다. 미국에 있는 두뇌 전이의 정확한 부각은 추정하기 어려운 남아 있는 동안, 외두개 치료가 암 치료에 있는 더 효과적인 되기 위하여 계속됨에 따라 증가할 가능성이 높습니다. 따라서, 이 사이트에서 전이를 치료하기 위한 새로운 치료 접근법을 식별하고 개발할 필요가 있다. 이를 위해 암세포의 두개내 주사는 뇌전이를 모델링하는 잘 확립된 방법이 되고 있다. 이전에는 종양 성장을 직접 측정할 수 없는 것이 이 모델에 기술적 장애가 되었습니다. 그러나 자기 공명 영상(MRI)과 같은 작은 동물 이미징 양식의 가용성과 품질을 높이는 것은 시간이 지남에 따라 종양 성장을 모니터링하고 실험 기간 동안 뇌 내의 변화를 추론하는 능력을 크게 향상시키고 있다. 본명, 뮤린 유방 종양 세포의 두개 내 주입을 면역능력 마우스로 내하여 MRI가 입증된다. 제시된 사출 접근법은 이소플루란 마취와 디지털 제어, 자동 드릴 및 바늘 주입을 사용하여 정밀도를 향상시키고 기술적 오류를 줄이는 스테레오전술 설정을 활용합니다. MRI는 오하이오 주립 대학 제임스 종합 암 센터 작은 동물 화상 진찰 공유 자원에 있는 9.4 테슬라 계기를 사용하여 시간이 지남에 측정됩니다. 종양 부피 측정은 ImageJ의 사용을 통해 매 시점에서 입증됩니다. 전반적으로, 이 두개 내 주입 접근은 두뇌 전이의 드라이버에 새로운 가설을 시험하기 위하여 이 모형 시스템의 유용성을 크게 향상시키는 결합된 정확한 주입, 일상적인 감시 및 정확한 종양 부피 측정을 허용합니다.
뇌전이 성인 1차 중추신경계 종양1보다10배 더 흔하며, 폐암, 유방암, 흑색종을 가진 거의 모든 고형종양 유형에서 가장 높은부각2를나타낸다고 보고되었다. 1차 종양 부위에 관계없이 뇌 전이의 발달은 인지 기능 저하, 지속적인 두통, 발작, 행동 및/또는 성격 변화와 종종 연관되는 불량 예후로 이어집니다1,,3,,4,,5. 유방암의 관점에서, 질병의 예방 및 치료에 많은 진보가 있었습니다. 그러나, 유방암으로 진단된 여자의 30%는 전이를 개발하기 위하여 계속될 것이고, 단계 IV 질병을 가진 그들, 대략 7%(SEER 2010-2013)에는 두뇌 전이6,,7이있습니다. 뇌 전이에 대한 현재 치료 옵션은 외과 절제술, 입체 방사선 수술 및 / 또는 전체 뇌 방사선 요법을 포함한다. 그러나, 이 적극적인 치료에도, 이 환자를 위한 중앙생존은 짧은 8-11 달
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
본 명세서에 기재된 모든 방법은 오하이오 주립대학(P.I. Gina Sizemore)의 기관 동물 관리 및 사용 위원회(IACUC)에 의해 승인되었습니다. 프로토콜 #2007A0120). 모든 설치류 생존 수술 IACUC 정책은 멸균 기술, 소모품, 악기 뿐만 아니라 절개 부위의 모피 제거 및 멸균 제제의 사용을 포함하여 다음과 같습니다.
1. 유방암 세포의 두개 내 주입
참고: 본 명세서에서 기재된 방법은 1차 MMTV-PyMT 종양(23)으로부터유래된 DB7 뮤린 유방 종양 세포주를 이용하였다. 이전 연구는 인간 질환의 것을 모방 하는 역사를 가진 BCBM의 모델로 DB7 세포의 두개 내 주입을 설립했다 12. 중요하게도, 면역능력이 있는 FVB/N 마우스는 이 마우스 균주로부터 DB7 세포가 유래되었기 때문에 이 모델에 사용된다. 이것은 유방암 모형이기 때문에, 성인 여성 마우스는 이 연구 결과에 이용됩니다.
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
도 3는 뮤린 유방 종양 세포의 두 시간 지점(7일 및 10일)에 단일 마우스에 대한 종양 부피 정량화를 간과한다. 이 실험을 위해, 50,000 DB7 세포가 주입되었고, 동물의 뇌는 MRI에 의해 평가되었다. 각 스캔에 대해 30개의 슬라이스(두께 0.5mm)가 캡처되었습니다. 스캔당 30슬라이스의 평가에 따르면 7일째 주사 후 5개의 슬라이스가 종양부담(도 3A)을나타내고 10일째에 주사 후 9슬라이스가 종양 부담(도3B)을나타냈다. 각 이미지는 설명된 바와 같이 종양 영역에 대해 평가되었고, 각 프레임에 대한 영역은 도 3C에묘사된다. 총 종양 부피는 슬라이스 두께에 대해 결정되고 조정됩니다. 도 4는 대표적인이미지(도 .......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
MRI를 통한 직렬 모니터링에 이어 두개 내 주사의 활용은 시간이 지남에 따라 종양 부피 정확도로 종양 성장을 시각화하는 독특한 능력을 제공한다. 디지털 이미징 분석의 적용은 종양 부피, 출혈, 괴사 및 치료에 대한 반응에 대한 뇌 병변의 해석을 허용합니다.
모든 절차와 마찬가지로 성공을 위해 따라야 할 주요 단계가 있습니다. 첫째, 입체 장치의 신중한 설정은이 기술의 성공에 필수적이다. 뮤린 크라늄의 작은 크기로 인해 약간의 위화감은 종양 증가율에 극적으로 다른 영향을 초래하고 실험 동물에서 걸릴 수 있습니다. 따라서 이러한 계측기의 사용에 대한 적절한 교육이 필요합니다. 둘째, 절차 전반에 걸쳐 가열 원은 마취 평면이 너무 낮게 떨어지지 않도록 합니다. 낮은 체온은 약물 대사 감소와 마취 및 /또는 회복 시간을 연장 할 수 있기 때문에 마취하에 갑자기 죽을 위험에 동물을 배치합니다. 조립식 가열 패드는 부피가 크고 스테레오 전술 기계에서 기동하기 어려울 수 있지만, 모든 상용.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
저자는 어떤 공개가 없습니다.
대표적인 데이터는 국립암연구소(K22CA218472~G.M.S.를 통해 지원되었다. 두개 내 주사는 오하이오 주립 대학 포괄적 인 암 센터 표적 검증 공유 자원 (이사 - 레나 Shakya 박사)에서 수행되며 MRI는 오하이오 주립 대학 포괄적 인 암 센터 소형 동물 이미징 공유 리소스 (디렉터 - Kimerly Powell 박사)에서 완료됩니다. 공유 자원은 OSUCCC, 국립 암 연구소 (P30 CA016058)의 OSUCCC 암 센터 지원 보조금, 오하이오 주립 대학 대학 및 부서와의 파트너십 및 설립 된 충전 시스템을 통해 자금을 조달합니다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Surgical Materials | |||
| Betadine | Purdue Products | 19-027132 | 포비돈-요오드, 7.5% |
| 뼈 왁스 | 수술 전문 분야 | 903 | 멸균 및 가단성 밀랍 및 이소프로필 팔미테이 |
| Buponorphine SR-Lab | ZooPharm | N/A | 장기형 주사 가능한 진통제 5 mL (0.5 mg/mL) 폴리메트릭 제형 |
| 코튼 팁 어플리케이터 | Puritan | 25-806 10WC | 멸균 긴 줄기 코튼 팁 어플리케이터 |
| 눈 연고 | Puralube | 17033-211-38 | 윤활 바셀린 및 미네랄 오일 기반 안과 연고 |
| 손난로 Hothands | HH2 | 공기 활성화 열 팩 | |
| 이부프로펜 | 업 & 최대 | 094-01-0245 | 액체 현탁액에 5mL당 100mg |
| Isoflurane | Henry Schein INC | 1182097 | 마취제에 사용하기 위한 액체 마 |
| 메스 | Integra Miltex | 4-410 | #10 일회용 메스 블레이드 |
| 스킨 접착제 | Vetbond | 1469SB | 피부 안전 상처 접착제 |
| 멸균 드레싱 | TIDI 제품 | 25-517 | 개별 포장된 멸균 드레이프 |
| 봉합 | Covidien | SP5686G | 45cm 쐐기 5-0 모노필라멘트 폴리프로필렌 봉합 |
| Stereotaxic Unit | |||
| High Speed Drill (Foredom)Kopf | Model 1474 | Max of 38,000 RPM | |
| Mouse Gas Anesthesia Head Holder | Kopf | Model 923-B | 이빨 구멍과 노즈콘이 있는 마우스 바 |
| 파열 방지 이어바 | Kopf | 모델 922 | 마우스 애플리케이션에 적합한 이어바 |
| 입체 계측기 | Kopf | 모델 940 | 디지털 판독 모니터 |
| <<강>인젝터/강> | |||
| 인젝터 바늘 및 주사기 | Hamilton | 80366 | 26 게이지 바늘, 51mm 바늘 길이 및 10 μ L 볼륨 주사기 |
| Legato 130A 자동 주사기 펌프 | KD Scientific | P/N: 788130 | 자동 인젝터 |
| Anesthesia Machine | |||
| SomnoSuite 저유량 디지털 기화기 | Kent Scientific | SS-01 | 디지털 마취기 |
| SomnoSuite Kent | Scientific | SOMNO-MSEKIT | 에는 인덕션 챔버, 마취 주사기 2개, 18인치 튜브, 플라스틱 노즈콘, 폐 마취 가스 캐니스터 2개가 포함되어 |
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.