गंभीर अंग इस्केमिया के साथ एंजियोप्लास्टी-इलाज रोगियों में स्थानीय परिसंचारी मोनोन्यूक्लियर प्रोजेनिटर कोशिकाओं का उपयोग कर विच्छेदन की भविष्यवाणी
Summary
क्रिटिकल लिफ इस्केमिया (सीएलआई) में बाधित जहाजों की एंजियोप्लास्टी के बाद भी निचले अंग विच्छेदन हो सकते हैं। मोनोन्यूक्लियर प्रोजेनिटर सेल (एमपीसी) संवहनी मरम्मत को दर्शाते हैं। वर्तमान प्रोटोकॉल एंजियोप्लास्टी के करीब परिसंचरण से एमपीसी के परिमाणीकरण और एंडोथेलियल डिसफंक्शन और निचले अंग विच्छेदन की भविष्यवाणी के साथ इसके संबंधों का वर्णन करता है।
Abstract
क्रिटिकल लिंब इस्केमिया (सीएलआई) परिधीय धमनी रोग के एक उन्नत चरण का प्रतिनिधित्व करता है। एंजियोप्लास्टी निचले अंग में रक्त प्रवाह में सुधार करती है; हालांकि, कुछ रोगियों को अपरिवर्तनीय रूप से अंग विच्छेदन के लिए प्रगति । संवहनी क्षति की सीमा और संवहनी मरम्मत के तंत्र एंजियोप्लास्टी के बाद के परिणाम को प्रभावित करने वाले कारक हैं। मोनोन्यूक्लियर प्रोजेनिटर कोशिकाएं (एमपीसी) संवहनी क्षति और मरम्मत के लिए प्रतिक्रियाशील होती हैं, जिसमें संवहनी रोगों को प्रतिबिंबित करने की क्षमता होती है। वर्तमान प्रोटोकॉल एंजियोप्लास्टी साइट के करीब पोत से रक्त परिसंचरण से प्राप्त एमपीसी के मात्राकरण के साथ-साथ सीएलआई के साथ रोगियों में एंजियोप्लास्टी के बाद अगले 30 दिनों में एंडोथेलियल डिसफंक्शन और अंग विच्छेदन के लिए इसकी भविष्य कहनेवाला क्षमता के साथ अपने संबंधों का वर्णन करता है ।
Introduction
परिधीय धमनी रोग (पैड) रक्त की आपूर्ति की सीमा के साथ एक पुरानी और प्रगतिशील संवहनी बाधा की विशेषता है1। वैश्विक स्तर पर, निचले अंगों का पैड लगभग 10% बुजुर्ग आबादी को प्रभावित करता है, जबकि ऐसे मामलों का 7% तक अंग विच्छेदन2,3 में प्रस्तुत कियाजाताहै।
क्रिटिकल लिम्ब इस्केमिया (सीएलआई) पैड1की सबसे गंभीर प्रस्तुति का प्रतिनिधित्व करता है । रोगी आमतौर पर आराम, अल्सर, या गैंग्रीन में दर्द का अनुभव करते हैं जो ओक्लाइड धमनियों के कारण होते हैं; जबकि क्लीनिकल रोग का निदान प्रतिकूल है और 1 वर्ष 3 , 4,5के दौरान अंग विच्छेदन और मृत्यु दर के30%जोखिम से चिह्नित है .
एंजियोप्लास्टी एक न्यूनतम आक्रामक एंडोवैस्कुलर प्रक्रिया है जो सीएलआई के रोगियों में निचले अंग में रक्त प्रवाह को बहाल कर सकती है; हालांकि, कुछ रोगियों को अनिवार्य रूप से प्रमुख अंग विच्छेदन की आवश्यकता होगी, यहां तक कि एंजियोप्लास्टी थेरेपी1,5केबाद . चिकित्सा प्रवर्तन की संभावना के कारण एंजियोप्लास्टी के बाद प्रतिकूल परिणामों की प्रारंभिक पहचान काफी मूल्यवान है।
पारंपरिक जोखिम कारक एंजियोप्लास्टी6से गुजर रहे सीएलआई वाले रोगियों में प्रमुख अंग विच्छेदन के लिए सीमित भविष्य कहनेवाला क्षमता प्रदान कर सकते हैं । रोगविज्ञान उन्मुख बायोमार्कर संभावित नैदानिक अनुप्रयोगों के साथ उपन्यास विधियों का प्रतिनिधित्व करते हैं, जिसके परिणामस्वरूप विशेष रूप से संवहनी चोट7से संबंधित रोगों में उपयोगी हो सकता है। आजकल, एथेरोस्क्लेरोटिक पट्टिका की साइट पर एंडोथेलियल मरम्मत गुणों के मालिक सेलुलर आबादी की भागीदारी को तेजी से8,9मान्यता दी गई है।
मोनोन्यूक्लियर प्रोजेनिटर सेल (एमपीसी) बोन मैरो और संवहनी पुनर्योजी क्षमताओं के साथ स्टेम कोशिकाओं की अपनी संरचनात्मक और कार्यात्मक विशेषताओं से प्राप्त होते हैं। एमपीसी की पैदा करने की क्षमता के कारण, माइग्रेट करें और संवहनी पालन दिखाएं; इन कोशिकाओं को इस्केमिया10 , 11,12के जवाब में एंडोथेलियल रिपेयर को प्रतिबिंबित करने के लिए अच्छे उंमीदवार बन गए हैं . इसके अलावा, संवहनी चोट अंतर्निहित तंत्र में निरंतर रुचि ने स्थानीय होने वाले बायोमार्कर की शकुन भूमिका की खोज करने के लिए प्रेरित किया है, क्योंकि उन्हें संवहनी क्षति को प्रतिबिंबित करने और7,13, 14की मरम्मत करने के लिए मानाजाताहै।
वर्तमान अध्ययन का उद्देश्य यह वर्णन करना है कि एमपीसी की मात्रा का निर्धारण कैसे किया जाए जो सीएलआई के साथ एंजियोप्लास्टी के साथ रोगियों में संवहनी बाधा के करीब प्रसारित होता है; और एंडोथेलियल डिसफंक्शन और अंग विच्छेदन के संकेतकों के साथ एमपीसी के बीच संबंध का मूल्यांकन कैसे करें।
comorbidities और आंतरिक संवहनी सुविधाओं के आधार पर पूर्वानुमान की तुलना में, स्थानीय एमपीसी की मात्रा एंडोथेलियल दोष और अंग विच्छेदन के बारे में नैदानिक परिणाम की भविष्यवाणी करने की विशिष्ट क्षमता दिखाती है। लगातार, कुछ अध्ययनों ने पैड15,16वाले रोगियों के मूल्यांकन के दौरान समान बायोमार्कर की शकुन भूमिका का वर्णन किया है ।
पिछले परिणामों के आधार पर7,यहां वर्णित विधि कई नैदानिक सेटिंग्स में प्रतिकूल संवहनी परिणामों के खतरे में जनसंख्या की प्रारंभिक पहचान के लिए उपयोगी हो सकती है, जैसे निचले अंग और कोरोनरी इस्केमिया, स्ट्रोक, वैक्यूलाइटिस, वेनस थ्रोम्बोसिस और संवहनी चोट और मरम्मत से जुड़े अन्य।
Protocol
Representative Results
Discussion
संवहनी ब्लॉक के सटीक स्थल पर रक्त संग्रह तकनीकी कठिनाइयों को दिखा सकता है; इसलिए, हमने संवहनी ब्लॉक के निकट रक्त संग्रह किया। इसी तरह, संवहनी पट्टिका के करीब एमपीसी की मात्रा अत्यधिक गतिशील प्रतीत होत?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
लेखक परियोजना आईडी 356.2015 के लिए संस्थागत कार्यक्रम E015 के समर्थन का शुक्रिया अदा करते हैं।
Materials
| BSA | Roche | 10735086001 | Bovine Serum Albumin (BSA) as a buffering agent, stabilizer, standard and for blending. |
| Calibration Beads | Miltenyi Biotec / MACS | #130-093-607 | MACQuant calibration beads are supplied in aqueous solution containing 0.05% sodium azide. 3.5 ml for up to 100 tests |
| CD133/1 (AC133)-PE | Milteny Biotec / MACS | #130-080-801 | Antibody conjugated to R-Phycoerythrin in PBS/EDTA buffer |
| CD184 (CXCR4)-PE-VIO770 | Miltenyi Biotec / MACS | #130-103-798 | Monoclonal, Isotype recombinant human IgG1, conjugated |
| CD309 (VEGFR-2/KDR)-APC | Miltenyi Biotec / MACS | #130-093-601 | Antibody conjugated to R-Phycoerythrin in PBS/EDTA buffer |
| CD34-FITC | Miltenyi Biotec / MACS | #130-081-001 | The monoclonal antibody clone AC136 detecs a class III epitope of the CD34 |
| CD45- VioBlue | Miltenyi Biotec / MACS | #130-092-880 | Monoclonal CD45 Antibody, human conjugated |
| Conical Tubes | Thermo SCIENTIFIC | #339651 | 15ml conical centrifuge tubes |
| Cytometry Tubes | FALCON Corning Brand | #352052 | 5 mL Polystyrene Round-Bottom Tube. 12×75 style. Sterile. |
| EDTA | BIO-RAD | #161-0729 | Heavy metals, (as Pb) <10ppm, Fe<0.01%, As<1ppm, Insolubles<0.005% |
| Improved Neubauer | Without brand | Without catalog number | Hemocytometer for cell counting. (range 0.1000mm, 0.0025mm2) |
| K2 EDTA Blood Collection Tubes | BD Vacutainer | #367863 | Lilac plastic vacutainer tube (K2E) 10.8mg, 6 mL. |
| Lymphoprep | Stemcell Technologies | 01-63-12-002-A | Sterile and checked on the presence of endotoxins. Density: 1.077±0.001g/mL |
| Paraformaldehyde | SIGMA-ALDRICH | #SZBF0920V | Fixation of biological samples, (powder, 95%) |
| Pipette Transfer 1,3mL | CRM Globe | PF1016, PF1015 | The transfer pipette is a tool that facilitates liquid transfer with greater accuracy. |
| Test Tubes | KIMBLE CHASE | 45060 13100 | Heat-resistant test tubes. SIZE/CAP 13 x 100 mm |
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