Summary

길들여진 돼지 뇌의 추출 및 해부

Published: April 25, 2021
doi:

Summary

이 프로토콜은 일반적으로 신경 과학에서 공부 여러 뇌 영역의 전체 및 해부에 돼지 뇌의 제거를위한 기술을 자세히 설명합니다.

Abstract

돼지를 전임상 및 전염성 동물 모델로 사용하는 것은 심혈관 시스템, 위장 시스템 및 영양을 조사하는 연구 분야에서 잘 문서화되고 받아들여졌으며 돼지는 점점 더 신경 과학의 큰 동물 모델로 사용되고 있습니다. 또한, 돼지는 인간에서 일어나는 것과 유사한 두뇌 성장 및 발달 패턴을 표시하기 때문에 신경 발달을 공부하는 허용된 모형입니다. 신경 과학에서 덜 일반적인 동물 모델로, 돼지에 외과 및 해부 절차는 연구원 중 친숙 하거나 잘 연습 되지 않을 수 있습니다. 따라서 일관된 추출 및 해부 방법을 자세히 설명하는 표준화된 시각적 프로토콜은 돼지와 함께 일하는 연구자에게 가치가 있음을 증명할 수 있습니다. 다음 비디오는 피질과 뇌간을 그대로 유지하면서 돼지 뇌를 제거하는 기술을 보여주고 뇌간, 소뇌, 중뇌, 해마, 줄무늬, 시상 및 내측 전두엽 피질을 포함하여 여러 일반적으로 조사되는 뇌 영역을 해부하는 방법을 검토합니다. 이 비디오의 목적은 연구원에게 4주 된 돼지의 뇌 추출 및 해부를 일관되게 수행하는 데 필요한 도구와 지식을 제공하는 것입니다.

Introduction

돼지는 잘 문서화되어 심혈 관계 시스템1,위장 시스템2,영양3,4,당뇨병5,독성학6및 수술 기술7에서연구를위한 번역 가능한 동물 모델로 받아들여졌습니다. PubMed가 “돼지 뇌 동물 모델”이라는 키워드를 검색하여 1996-2005년 보다 4배 더 많은 결과를 초래함에 따라 신경 과학에서 돼지의 사용이 증가하기시작했으며,현재는 더 많은 결과가 나타나고 있습니다. 돼지 모델의 인기가 확대되는 주된 이유는 인간과 비교할 때 뇌의 성장, 구조 및 기능의 유사성 때문입니다. 인간의 뇌에 비해 돼지 뇌는 회색과 백색 물질의 유사한 자랄 패터닝, 혈관화 및 분포를 나타낸다9. 더욱이, 돼지 뇌는 신경 이미징 절차에 사용되어, 잠재적인 기록을 불러 일으켰으며, 신경외과 기술수립8,9. 다른 동물 모델과는 달리, 그러나, 돼지와 인간의 경험 주산기 뇌 성장 분출, 산전 또는 산후 성장 분출 반대로. 출생 시, 인간과 돼지 뇌는 성인 뇌 체중의 약 27%와 25%의 무게를 가지고 있으며, 성인 뇌 체중의 12%와 성인 체중10%의rhesus 원숭이 뇌의 무게가 있는 쥐 뇌에 비해 각각 무게를 측정합니다.

돼지가 신경 과학을 위한 동물 모형으로 서게 채택된 한 가지 이유는 많은 연구원이 이 맥락에서 동물에 익숙하지 하기 때문입니다. 연구원은 필드에 있는 그것의 잠재적인 사용을 인식하지 않을 수 있습니다 또는 그 같은 모형을 사용하는 데 필요한 적당한 기술을 모르는 수 있습니다. 생물 의학 및 전임상 모델로 돼지를 사용하면 신경 과학에 대한 관심과 사용이 증가함에 따라 연구 전반에 걸친 데이터의 정확한 비교를 보장하기 위해 조직 제거의 표준화 된 절차를 수립해야합니다. 돼지 뇌와 관련된 해부 및 외과 기술은 다른 곳에서 출판되었지만11,12,13,돼지 뇌 조직을 수집하는 간단하고 표준화 된 프로토콜에 대한 필요성이있다, 특히 생화학 적 분석에 사용하기 위해. 따라서 이 비디오의 목적은 연구원이 표준화된 뇌 추출 및 해부를 수행할 수 있도록 하는 데 필요한 지식을 제공하는 것입니다. 이 비디오는 피질과 뇌간을 그대로 유지하면서 돼지 뇌를 제거하는 하나의 적절한 기술을 설명하고, 그 후 여러 주요 뇌 영역을 해부하는 방법을 검토합니다.

Protocol

어바나 샴페인 일리노이 대학의 기관 동물 관리 및 사용 위원회(IACUC)에 의해 동물 과목과 관련된 절차가 승인되었습니다. 참고 : 안락사 전에, 돼지는 텔라졸 : 케타민 : 자일라진의 조합과 근육 주사를 통해 마취되었다 (50.0 타일 타민 HCl 플러스 졸라제팜 H의 50.0 mg Cl은 케타민 HCl (100 g/L)의 2.50 mL및 자일라진 (100 g /L)의 2.50 mL로 재구성하고 0.06 mg / kg BW로 투여됩니다. 일단 마취?…

Representative Results

이 섹션에서는 4주 된 돼지 뇌의 정확한 추출 및 해부 후 얻은 결과의 예를 설명합니다. 그림 1은 해부 동안 가이드로 사용하기 위해 각 뇌 영역의 모양을 간략하게 설명합니다. 뇌의 일부는 소뇌의 제거 후 두개골에 남아있을 수 있습니다(도 1B). 이것은 소뇌의 원하는 영역을 격리하는 동안 제거 될 수있다. 표 1은 해부된 각 뇌 영역(n=5)에 ?…

Discussion

본 명세서에 기술된 기술은 약 4주 의 돼지를 위해 디자인되었다. 돼지가 뇌 조직 구조의 무결성을 유지하기 위해 인도적으로 안락사 된 직후이러한 단계를 수행하는 것이 중요합니다, 특히 후속 생화학 적 분석을 고려할 때. 처음 기술을 배울 때 아틀라스 또는 섬유16 해부 가이드를 사용하는 것이 도움이됩니다. 실험자는 데이터 수집을 위한 샘플을 얻기 전에 여러 뇌 추출 및 ?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

저자는 짐 노블라우치와 마틴 부스 호지스 농업, 소비자 및 환경 과학 정보 기술 및 통신 서비스 대학의 촬영, 녹음 및 오디오 및 비디오 편집에 대한 전문 지식을 인정하고 싶습니다.

Materials

#22 Scalpel Blades for #4 Handles Ted Pella, inc. 549-4S-22
11 1/2" Satterlee Bone Saw Leica Biosystems 38DI13425
5 1/2" Skull Breaker with Chisel End (Meat Hook) Leica Biosystems 38DI37636
5-inch Heavy Duty Workshop Bench Vise Pony 29050
Butcher Knife 25cm Victorinox 5.7403.25 Sharpen before use
CM40 Light Duty Drop Forged C Clamps Bessey 00655BC3120
Diamond Hone Knife Shaper Chef’s Choice 436-3
Shandon Stainless-Steel Scalpel Blade Handle #4 ThermoScientific 5334
Tissue Forceps Henry Schein 101-5132
Vinyl Dissecting pad Carolina 629006

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Cite This Article
Fleming, S. A., Monaikul, S., Mudd, A. T., Jacob, R., Dilger, R. N. Extraction and Dissection of the Domesticated Pig Brain. J. Vis. Exp. (170), e62030, doi:10.3791/62030 (2021).

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