إنشاء نموذج الفئران من القوس العليا الجيوب الأنفية انسداد عبر طريقة الخيط والانصمام
Summary
هنا، ونحن إنشاء رواية سبراغ دولي (SD) نموذج الفئران من تجلط الجيوب الأنفية القوس متفوقة (SSS) عن طريق طريقة الانسداد الخيط، وتم التحقق من استقرار وموثوقية النموذج.
Abstract
الآليات المساهمة في البداية الطبيعية لتجلط الجيوب الأنفية الوريدية الدماغية (CVST) غير معروفة في الغالب ، وتشارك مجموعة متنوعة من العوامل التي لا يمكن السيطرة عليها في مسار المرض ، مما يؤدي إلى قيود كبيرة في البحوث السريرية. لذلك ، ساعد إنشاء نماذج حيوانية مستقرة CVST التي يمكن أن توحد مجموعة متنوعة من العوامل المحيرة التي لا يمكن السيطرة عليها على التحايل على أوجه القصور في البحوث السريرية. في العقود الأخيرة ، تم بناء مجموعة متنوعة من نماذج الحيوانات CVST ، ولكن النتائج المستندة إلى هذه النماذج كانت غير متسقة وغير مكتملة. ومن ثم، من أجل مواصلة استكشاف الآليات المرضية الفسيولوجية للCVST، من الضروري إنشاء نموذج حيواني جديد ومتوافق للغاية، له قيمة عملية هامة وأهمية علمية لتشخيص وعلاج CVST. في هذه الدراسة، تم إنشاء رواية سبراغ دولي (SD) نموذج الفئران من تجلط الجيوب الأنفية القوس متفوقة (SSS) عن طريق طريقة الانسداد الخيط، وتم التحقق من استقرار وموثوقية النموذج. بالإضافة إلى ذلك، قمنا بتقييم التغيرات في تدفق الدم الوريدي الدماغي في الفئران بعد تشكيل CVST. بشكل جماعي ، يمثل نموذج SSS-thrombosis SD-rat نموذجا حيوانيا جديدا CVST يتم إنشاؤه بسهولة ، ويقلل من الصدمة ، وينتج عنه استقرار جيد ، ويسمح بالتحكم بدقة في التوقيت والموقع الإقفاري.
Introduction
تجلط الجيوب الأنفية الوريدية الدماغية (CVST) هو مرض نادر في الجهاز الوريدي الدماغي الذي يمثل فقط 0.5-1.0٪ من جميع أسباب السكتة الدماغية ولكن لديه معدل حدوث مرتفع نسبيا في الأطفال والشباب1. أثناء تشريح الجثة، تم العثور على CVST أن يكون السبب في 10٪ من وفيات الأمراض الدماغية الوعائية2. يمكن أن يحدث تجلط الدم في أي جزء من الجهاز الوريدي داخل الجمجمة. الجيوب الأنفية القوسية متفوقة (SSS) هي واحدة من المناطق الأكثر تضررا في CVST ويمكن أن تنطوي على الأوعية الدموية متعددة. بسبب تضيق أو انسداد الجيوب الوريدية ، يتم حظر العودة الوريدية داخل الجمجمة ، والتي غالبا ما يصاحبها زيادة الضغط داخل الجمجمة3. المظاهر السريرية للCVST معقدة وتختلف مع مرور الوقت; على الرغم من عدم وجود خصوصية الأعراض، وتشمل الأعراض الأكثر شيوعا الصداع (77.2٪)، والمضبوطات (42.7٪)، والعجز العصبي (39.9٪). في الحالات الشديدة ، قد تحدث غيبوبة وحتى الموت4،5. في السنوات الأخيرة، وبسبب التحسن العام في المعايير الطبية والصحية والوعي بالصحة العامة، تغيرت نسبة عوامل الخطر ذات الصلة، وانخفضت نسبة الصدمات والعدوى، وارتفعتتدريجيا نسبةCVST الناجمة عن الحمل، والبريوم، ووسائل منع الحمل عن طريق الفم، وغيرها من الأسباب 5 .
في الوقت الحاضر ، لا يزال مرض CVST غير مفهوم جيدا. لاستكشاف CVST في العمق ، هناك حاجة إلى مزيد من البحوث المرضية الفسيولوجية. ومع ذلك، فإن معظم هذه الطرق البحثية الغازية وبالتالي من الصعب تنفيذها سريريا. نظرا للعديد من القيود على البحوث السريرية، والنماذج الحيوانية لها مزايا لا تعوض من حيث البحوث الأساسية والتواتيالية.
سبب CVST معقد ، حيث غالبا ما لا يتم التعرف على بدايته الأولية وموقع تكوين الجلطة متغير للغاية. لحسن الحظ، يمكن للنماذج الحيوانية تحقيق سيطرة أفضل على هذه العوامل. في العقود القليلة الماضية، تم إنشاء مجموعة متنوعة من نماذج الحيوانات CVST، ولكل نموذج عيوبه الخاصة. وفقا لأساليب الإنتاج المختلفة، يمكن تقسيمها تقريبا إلى الفئات التالية: نموذج SSS-ربطبسيطة 6،7؛ SSS الداخلية الحقن مسرع نموذج8; النموذج تجلط SSS الناجم عن فيريريك-كلوريد9; نموذج تجلط SSS الناجم عن الكيماويات الضوئية10؛ وصنع الذاتي الانسداد- انسداد SSS نموذج11. ومع ذلك ، فإن معظم هذه النماذج غير قادرة على التحايل على الأضرار الغازية التي لحقت قشرة الدماغ للحيوان وغير قادرة على التحكم بدقة في الوقت والمكان الإقفاري. في بعض النماذج، سوف الخفقان إعادة تشكيل تلقائيا. في نماذج أخرى، يصبح SSS انسداد بشكل دائم. وبالإضافة إلى ذلك، قد تؤثر العمليات المعقدة و/أو الإصابات الخطيرة على النتائج المرضية الفسيولوجية اللاحقة في هذه النماذج.
في هذه الدراسة، تم إدراج سد الموضوع في SSS من الفئران سبراغ دولي (SD) لإنشاء بنجاح نموذج CVST التي قللت من الضرر، وتمكين السيطرة الدقيقة، وأسفرت عن استقرار جيد. بالإضافة إلى ذلك، تم الجمع بين التصوير بالرنين المغناطيسي للحيوانات الصغيرة (MRI) وتصوير تدفق الدم بقع الليزر للتحقق من فعالية النموذج. قمنا بتقييم التغيرات في تدفق الدم الدماغي قبل وبعد إنشاء نموذجنا ، وكذلك تقييم استقرار نموذجنا ، ووضع الأساس لمزيد من الدراسات التي تستكشف حدوث وتطور وآليات الفيزيولوجيا المرضية ذات الصلة من CVST.
Protocol
Representative Results
Discussion
في هذه الدراسة، تم إنشاء نوع جديد من نموذج CVST بنجاح عن طريق إدراج سد العجز الموضوع عصامي في SSS من الفئران SD. بالإضافة إلى ذلك ، تم الجمع بين تصوير تدفق الدم بالليزر والتصوير بالرنين المغناطيسي للحيوانات الصغيرة لرصد التغيرات في تدفق الدم على سطح الدماغ من فئران SD قبل وبعد الانسداد من أجل تو?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
تم دعم هذه الدراسة من قبل مؤسسة البحث العلمي منحة للمواهب رفيعة المستوى، جامعة فوجيان للطب الصيني التقليدي (X2019002-المواهب).
Materials
| 2 mL syringe | Becton,Dickinson and Company | 301940 | |
| brain stereotaxic instrument | Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd | 68025 | |
| dissecting microscope | Wuhan SIM Opto-technology Co. | SIM BFI-HR PRO | |
| high-speed skull drill | Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd | 78046 | |
| laser-speckle blood-flow imaging system | Wuhan SIM Opto-technology Co. | SIM BFI-HR PRO | |
| needle holder | Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd | F31022-12 | |
| needle thread | Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd | F33303-08 | |
| scissors | Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd | S13029-14 | |
| silica gel | Heraeus Kulzer | 302785 | |
| small animal anesthesia machine | Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd | R540 | |
| small-animal MRI | Bruker Medical GmbH | Biospec 94/30 USR | |
| tweezers | Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd | F11029-11 | |
| vascular forceps | Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd | F22003-09 |
References
- Bousser, M. G., Ferro, J. M. Cerebral venous thrombosis: an update. Lancet Neurology. 6 (2), 162-170 (2007).
- Guenther, G., Arauz, A. Cerebral venous thrombosis: A diagnostic and treatment update. Neurologia. 26 (8), 488-498 (2011).
- Stam, J. Thrombosis of the cerebral veins and sinuses. New England Journal of Medicine. 352 (17), 1791-1798 (2005).
- Einhäupl, K., et al. EFNS guideline on the treatment of cerebral venous and sinus thrombosis in adult patients. European Journal of Neurology. 17 (10), 1229-1235 (2010).
- Coutinho, J. M., Zuurbier, S. M., Stam, J. Declining mortality in cerebral venous thrombosis: a systematic review. Stroke. 45 (5), 1338-1341 (2014).
- Gotoh, M., Ohmoto, T., Kuyama, H. Experimental study of venous circulatory disturbance by dural sinus occlusion. Acta Neurochir (Wien). 124 (2-4), 120-126 (1993).
- Miyamoto, K., Heimann, A., Kempski, O. Microcirculatory alterations in a mongolian gerbil sinus-vein thrombosis model. Journal of Clinical Neuroscience. 8 (4), (2001).
- Ungersböck, K., Heimann, A., Kempski, a. O. Cerebral Blood Flow Alterations in a Rat Model of Cerebral Sinus Thrombosis. Stroke. 24 (4), (1993).
- Röttger, C., et al. A new model of reversible sinus sagittalis superior thrombosis in the rat: magnetic resonance imaging changes. Neurosurgery. 57 (3), 573-580 (2005).
- Chen, C., et al. Photothrombosis combined with thrombin injection establishes a rat model of cerebral venous sinus thrombosis. 신경과학. 306, 39-49 (2015).
- Yang, H., Meng, Z., Zhang, C., Zhang, P., Wang, Q. Establishing a new rat model of central venous sinus thrombosis and analyzing its pathophysiological and apoptotic changes. Journal of Neuroscience Methods. 203 (1), 130-135 (2012).
- Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats. Stroke. 20 (1), 84-91 (1989).
- Fluri, F., Schuhmann, M. K., Kleinschnitz, C. Animal models of ischemic stroke and their application in clinical research. Drug Design, Development and Therapy. 9, 3445-3454 (2015).
- Wang, E., et al. Mapping tissue pH in an experimental model of acute stroke – Determination of graded regional tissue pH changes with non-invasive quantitative amide proton transfer MRI. Neuroimage. 191, (2019).
- Liu, C., et al. Identification of Vigilin as a Potential Ischemia Biomarker by Brain Slice-Based Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment. Analytical Chemistry. 91 (10), 6675-6681 (2019).
