组织直肠炎辅助解冻分娩或利索三头肌正在开发中,用于治疗深静脉血栓形成。这里介绍了体外程序,以评估这种联合疗法的疗效。讨论了血块模型、图像引导和治疗效果评估的关键协议。
深静脉血栓(DVT)是一个全球性的健康问题。实现关键障碍物血管再扫描的主要方法是导管定向血栓分析 (CDT)。为了减轻腐蚀性副作用和与 CDT 相关的较长的治疗时间,正在开发辅助剂和替代方法。其中一种方法是组织切入,一种聚焦的超声波疗法,通过气泡云核使组织消融。临床前研究表明,组织直觉和血栓解剂在血栓降解方面具有很强的协同作用。本报告概述了一种台式方法,以评估组织直觉辅助血栓分析疗法(或利索三脚架疗法)的疗效。
用新鲜的人类静脉血制成的血块被引入一个流动通道,其尺寸和声学机械特性模仿了虹膜的静脉。该通道注入血浆和解质重组组织型质粒活化剂。气泡云在血块中产生,其聚焦超声源用于治疗股骨静脉血块。电动定位器用于沿血块长度转换源对焦。在每个振变位置,被动地记录气泡云的声学辐射,并进行光束成型以生成被动空腔图像。衡量治疗效果的指标包括血块质量损失(整体治疗功效),以及香水中D-dimer(纤维解精)和血红蛋白(溶血)的浓度。这种体外设计存在局限性,包括缺乏评估体内副作用或血块解流速动态变化的手段。总体而言,该设置提供了一种有效的方法来评估基于组织创伤的治疗 DVT 策略的有效性。
血栓形成是一种本来健康的血管中凝块形成的情况,会阻碍血液循环1,2。静脉血栓栓塞每年的医疗费用为70-100亿美元,美国有37.5万至42.5万例。肺栓塞是肺动脉的阻塞,是静脉血栓栓塞最严重的后果。肺阻塞的主要来源是深静脉血栓,主要来自虹膜静脉部分4,5,6。深静脉血栓(DVT)除了肺阻塞外,还有固有的后遗症,长期并发症可导致疼痛、肿胀、腿部溃疡和截肢7、8、9。对于关键阻塞,导管定向血栓分析(CDT)是船舶再扫描10的前线方法。CDT的结果取决于许多因素,包括血栓年龄,位置,大小,组成,病因和患者风险类别11。此外,CDT与血管损伤、感染、出血并发症和长时间的治疗有关。下一代设备旨在结合机械血栓切除术与血栓切除术(即药理机械血栓切除术)12,13。与CDT相比,使用这些设备可降低解质剂量,减少出血并发症,缩短治疗时间12、13、14。 这些设备仍然保留出血的副作用和慢性血栓15的不完全去除的问题。因此,需要一种辅助策略,可以完全去除血栓,降低出血并发症。
一种潜在的方法是组织直觉辅助血栓分析治疗,称为淋病。组织缺陷是一种非侵入性治疗方式,使用聚焦超声波在组织16中核化气泡云。气泡活性不是通过外源性核产生的,而是通过应用具有足够张力的超声波脉冲来激活组织内在的细胞核,包括血块17、18。气泡云的机械振荡给血块带来应变,使结构分解成细胞碎片19。组织收缩气泡活性提供体内和体外20,21,22的缩回和未收回的血块的有效降解。先前的研究表明,组织直肠和解质重组组织型质粒活化剂(rt-PA)的结合比单体解质或组织直觉显著提高治疗疗效。据推测,与组织精神气泡活性相关的两种主要机制是提高治疗疗效的原因:1) 由于溶解分娩增强而增加纤维化,2) 血栓内红血球溶解。血块质量的大部分由红血球24组成,因此,跟踪红细胞降解是样本消融的良好替代。其他形成的血块元素也可能在组织精神泡沫活动下瓦解,但本协议中未考虑。
在这里,概述了用利索切成像治疗DVT的台式方法。该协议描述了组织精神来源的关键操作参数、治疗疗效评估和图像引导。该协议包括设计一个流动通道,模仿虹膜静脉部分和制造人类整个血块。实验过程概述了组织条纹源和成像阵列的定位,以实现沿放置在流道中的血块进行组织直视暴露。定义了相关的振振参数,以实现血块中断和最小化目标外的气泡活动。使用超声波成像来指导和评估气泡活动,如图所示。量化治疗疗效的指标,如血块质量损失,D-dimer(纤维解析),和血红蛋白(溶血)概述23,24,25,26,27。总的来说,这项研究为执行和评估淋病治疗DVT的疗效提供了有效的手段。
拟议的协议提出了一个模型来量化淋病的治疗效果。虽然已经讨论了关键细节,但要使本议定书取得成功,需要考虑某些关键方面。rt-PA的酶活性有阿雷纽斯温度依赖性30。温度也是水和组织中声音速度的一个促成因素,温度的变化可能导致焦点区几何形状的轻微变化。因此,水温应在37°C下小心调节。协议中使用的 rt-PA 剂量 (2.68 μg/mL) 与临床上用于其他药理机械血栓切除术?…
The authors have nothing to disclose.
这项工作由国家卫生研究院资助,格兰特R01HL13334。作者要感谢凯文·哈沃斯博士协助德拉布金的检测,感谢维克多·博伦博士在设计协议方面给予的支持。作者还感谢亚当·麦克斯韦博士在设计组织调查来源方面的指导。
Absorbing sheets | Precision acoustics | F28-SMALL-M | 300mm x 300 mm x 10 mm |
Borosilicate Pasteur pippettes | Fisher Scientific | 1367820A | 14.6 cm length, 2 mL capacity |
Centrifuge tubes | Eppendorf | 22364111 | 1.5 mL capacity |
Drabkin's assay | Sigma Aldrich | D5941-6VL | |
Draw syringe | Cole-Parmer | EW-07945-43 | 60 mL capacity |
Filter bags | McMaster-Carr | 5162K111 | Remove particle size upto 1 microns |
Flow channel tubing | McMaster-Carr | 5154K25 | Polyethylene-lined EVA plastic tubing (Outer diameter: 3/8", Inner diameter: 1/4" |
Heating elements | Won Brothers | HT 300 Titanium | Titanium rods placed at the bottom of tank |
Imaging array | Verasonics | L11-5v | 128 element with sensitivity from -55 to -49 dB |
Low gelling agarose | Millipore Sigma | A9414 | |
Model vessel | McMaster-Carr | 5234K98 | 6.6 cm length, 0.6 cm inner diameter, 1 mm thickness |
Nanopure water | Barnstead | Nanopure Diamond | ASTM type I, 18 Mohm-cm resistivity |
Plasma | Vitalant | 4PF000 | Plasma frozen within 24 hours |
Plate reader | Biotek | Synergy Neo HST Plate Reader | For haemoglobin quantification |
Probe cover | Civco | 610-362 | |
Programming platform | MATLAB (the Mathworks, Natick, MA, USA) | ||
Recombinant tissue-type plasminogen activator (rt-PA) | Genentech | Activase | |
Reservoir | Cole-Parmer | EW-07945-43 | 60 mL capacity |
Syringe pump | Cole-Parmer | EW-74900-20 | pump attached to the syringe to draw the flow in the flow channel at a pre-determined fized rate |
Transducer | In-house customized | Eight-element, elliptically-focused transducer (9 cm major axis, 7 cm minor axis and 6 cm focal length), powered by custom designed and built class D amplifier and matching network | |
Ultrasound scaning system | Verasonics | Vantage Research Ultrasound System | |
Water tank | Advanced acrylics | C133 | 14 x 14 x 12, 1/2" |