Summary

उच्च आवृत्ति ट्रांसक्रैनियल डुप्लेक्स अल्ट्रासाउंड के साथ सुबाराक्नॉइड हेमरेज के मुरीन मॉडल में सेरेब्रल वासोस्पास्म का विश्लेषण

Published: June 03, 2021
doi:

Summary

इस पांडुलिपि का उद्देश्य एक सोनोग्राफी आधारित विधि पेश करना है जो चूहों में मस्तिष्क धमनियों में रक्त प्रवाह के वीवो इमेजिंग में अनुमति देता है। हम सबराक्नेव नकसीर (एसएएच) के मुरीन मॉडल में वासोस्पास्म से जुड़े रक्त प्रवाह वेग में परिवर्तन निर्धारित करने के लिए अपने आवेदन को प्रदर्शित करते हैं।

Abstract

सेरेब्रल वासोस्पास्म जो सबराचनॉइड हेमरेज, एक प्रकार का रक्तस्राव स्ट्रोक के बाद हफ्तों में होता है, देरी सेरेब्रल इस्केमिया में योगदान देता है। साह के मुरीन मॉडल का उपयोग करके प्रायोगिक अध्ययनों में एक समस्या यह है कि चूहों में सेरेब्रल वासोस्म की वीवो निगरानी के तरीकों की कमी है। यहां, हम चूहों पर ट्रांसक्रैनियल डुप्लेक्स सोनोग्राफी परीक्षाएं करने के लिए उच्च आवृत्ति अल्ट्रासाउंड के आवेदन को प्रदर्शित करते हैं। विधि का उपयोग करके, आंतरिक कैरोटिड धमनियों (आईसीए) की पहचान की जा सकती है। इंट्राक्रैनियल आईसीएएस में रक्त प्रवाह वेग को एसएए के शामिल होने के बाद काफी तेजी से किया गया, जबकि एक्सट्राक्रैनियल आईसीएएएस में रक्त प्रवाह वेग कम रहे, जो सेरेब्रल वासोस्पास्म का संकेत है। अंत में, यहां प्रदर्शित विधि एक मुरीन एसए साह मॉडल में सेरेब्रल वासोस्पास्म की वीवो निगरानी में कार्यात्मक, noninvasive की अनुमति देती है।

Introduction

सहज सबराचनॉय नकसीर (साह) रक्तस्रावी स्ट्रोक का एक रूप है जो ज्यादातर इंट्राक्रैनियल एन्यूरिज्म1के टूटने के कारण होता है। न्यूरोलॉजिकल परिणाम मुख्य रूप से दो कारकों से प्रभावित होता है: प्रारंभिक मस्तिष्क चोट (ईबीआई), जो रक्तस्राव और संबद्ध क्षणिक वैश्विक मस्तिष्क इस्केमिया के प्रभाव के कारण होती है, और देरी सेरेब्रल इस्केमिया (डीसीआई), जो रक्तस्राव2, 3के बाद सप्ताह केदौरानहोती है। डीसीआई को 30% तक एसएएफरोगियोंके प्रभावित होने की सूचना मिली थी । डीसीआई के रोगविज्ञान में एंजियोग्राफिक सेरेब्रल वासोस्पास्म, माइक्रोवासोस्म और माइक्रोथ्रोम्बोसिस, कॉर्टिकल फैलने वाले डिप्रेशन और सूजन4से शुरू होने वाले प्रभावों के कारण एक परेशान माइक्रोसर्कुलेशन शामिल है। दुर्भाग्य से, सटीक रोग अस्पष्ट रहता है और कोई उपचार उपलब्ध नहीं है जो प्रभावी रूप से डीसीआई3को रोकता है। इसलिए, डीसीआई कई नैदानिक और प्रयोगात्मक अध्ययनों में जांच की जाती है।

आजकल, साह पर अधिकांश प्रयोगात्मक अध्ययन छोटे पशु मॉडल का उपयोग करते हैं, विशेष रूप से चूहों में5,6,7,8,9,10, 11,12,13 ऐसे अध्ययनों में, सेरेब्रल वास्टोस्पास्म की अक्सर अंतिम बिंदु के रूप में जांच की जाती है। वासोस्पास्म पूर्व वीवो की डिग्री निर्धारित करना आम बात है। इसका कारण यह है कि सेरेब्रल वासोस्पास्म की वीवो परीक्षा में कम संज्ञाहरण समय की आवश्यकता होती है और जानवरों पर केवल थोड़ा संकट थोपने की कमी होती है। हालांकि, वीवो में सेरेब्रल वासोस्पास्म की परीक्षा लाभप्रद होगी। इसका कारण यह है कि यह चूहों में वासोस्पास्म पर वीवो अध्ययन में देशांतर की अनुमति देगा (यानी, साह के प्रेरण के बाद के दिनों के दौरान विभिन्न समय बिंदुओं पर सेरेब्रल वासोस्पास्म की इमेजिंग)। इससे विभिन्न समय बिंदुओं पर प्राप्त आंकड़ों की तुलनीयता बढ़ेगी । इसके अलावा, एक देशांतर अध्ययन डिजाइन का उपयोग पशु संख्या को कम करने के लिए एक रणनीति है ।

यहां हम चूहों में सेरेब्रल धमनियों में रक्त प्रवाह निर्धारित करने के लिए उच्च आवृत्ति ट्रांसक्रैनियल अल्ट्रासाउंड के उपयोग का प्रदर्शन करते हैं। हम बताते हैं कि, नैदानिक अभ्यास14, 15, 16,17,18में ट्रांसक्रैनियल डॉप्लर सोनोग्राफी (टीसीडी) या ट्रांसक्रैनियल रंग-कोडित डुप्लेक्स सोनोग्राफी (टीसीसीडी) के समान, इस विधि का उपयोग मुरीन मॉडल में साह इंडक्शन के बाद धमनी में रक्त प्रवाह वेग को मापने के लिए सेरेब्रल वासोस्पास्म की निगरानी के लिए किया जा सकता है।

Protocol

पशु प्रयोगों को जिम्मेदार पशु देखभाल समिति (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz) द्वारा अनुमोदित किया गया था और जर्मन पशु कल्याण अधिनियम (TierSchG) के अनुसार आयोजित किया गया । जानवरों की देखभाल और उपयोग के लिए सभी लागू अंतरराष्ट?…

Representative Results

6 चूहों में, जिनमें से 3 में साह को एंडोवैस्कुलर फिलामेंट छिद्रण मॉडल का उपयोग करके प्रेरित किया गया था, जबकि 3 ने नकली सर्जरी प्राप्त की, इंट्राक्रैनियल आंतरिक कैरोटिड धमनी (आईसीए) और एक्सट्राक्रैनियल आ?…

Discussion

हमारे ज्ञान का सबसे अच्छा करने के लिए, यह अध्ययन उच्च आवृत्ति ट्रांसक्रैनियल रंग-कोडित डुप्लेक्स अल्ट्रासाउंड के साथ एसएए के एक मुरीन मॉडल में सेरेब्रल वासोस्पास्म की निगरानी के लिए एक प्रोटोकॉल पेश…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

लेखक वीडियो में चित्र तैयार करने के लिए स्टीफन किंडेल का शुक्रिया अदा करना चाहेंगे । पीडब्ल्यू, एमएम और एसएचके को जर्मन संघीय शिक्षा और अनुसंधान मंत्रालय (बीएमबीएफ 01EO1503) द्वारा समर्थित किया गया था। इस काम को जर्मन रिसर्च फाउंडेशन (डीएफजी आईएनटी 371/47-1 FUGG) के एक बड़े इंस्ट्रूमेंटेशन ग्रांट द्वारा समर्थित किया गया था । एमएम को आफ्टर क्रोनर-फ्रेसेनियस-स्टिफतुंग (2020_EKEA.144) से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था।

Materials

Balea hair removal creme Balea; Germany ASIN B0759XM39V hair removal creme
C57BL/6N mice Janvier; Saint-Berthevin Cedex, France n.a. mice
Corneregel Bausch&Lomb; Rochester, NY, USA REF 81552983 eye ointment, lube
cotton swabs Hecht Assistent; Sondenheim vor der Röhn, Germany REF 44302010 cotton swabs
Ecco-XS razor Tondeo; Soligen, Germany DE 28693396 razor
Electrode cream GE; Boston, MA, USA REF 21708318 conductive paste
Heating plate Medax; Kiel, Germany 2005-205-01
Isoflurane Abvie; Wiesbaden, Germany n.a. volatile anesthetic
Leukofix BSN medical; Hamburg, Germany REF 02137-00 tape
Mechanical arm + micromanipulator VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA P/N 11277
Microbac tissues Paul Hartmann AG; Hamburg, Germany REF 981387 antimicrobial tissues
MZ400, 38 MHz linear array transducer VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA REF 51068-30 ultrasound transducer
Sonosid ASID Bonz GmbH; Herrenberg, Germany REF 782010 ultrasonography gel
Ultrasound platform with heating plate and ECG-recording VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA P/N 11179
UniVet-Porta Groppler; Oberperasberg, Germany S/N BKGM0437 isoflurane vaporizer
Vevo3100 VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA REF 51073-45 ultrasonography device
VevoLab software VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA n.a. evaluation software

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Neulen, A., Molitor, M., Kosterhon, M., Pantel, T., Karbach, S. H., Wenzel, P., Gaul, T., Ringel, F., Thal, S. C. Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound. J. Vis. Exp. (172), e62186, doi:10.3791/62186 (2021).

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