يصف هذا البروتوكول خطوات إنشاء نموذج أرنب مع اثنين من تمدد الأوعية الدموية المهضوم بالإيلاستيز مع ديناميكا الدم المختلفة (كوكبة الجذع والتشعب). هذا يسمح باختبار أجهزة الأوعية الدموية الجديدة في تمدد الأوعية الدموية مع مختلف البنية الوعائية وظروف الدورة الدموية داخل واحد.
تلعب النماذج الحيوانية قبل السريرية ذات الخصائص الديناميكية الدموية والمورفولوجية والنسيجية القريبة من تمدد الأوعية الدموية البشري داخل الجمجمة دورا رئيسيا في فهم العمليات الفسيولوجية المرضية وتطوير واختبار استراتيجيات علاجية جديدة. تهدف هذه الدراسة إلى وصف نموذج جديد لتمدد الأوعية الدموية للأرانب يسمح بإنشاء تمدد الأوعية الدموية العجزي المهضوم بالإيلاستيز مع ظروف ديناميكية دموية مختلفة داخل نفس الحيوان.
خضعت خمس إناث من الأرانب البيضاء النيوزيلندية بمتوسط وزن 4.0 (± 0.3) كجم ومتوسط عمر 25 (±5) أسابيع لجذع الجراحة المجهرية وتمدد الأوعية الدموية التشعب. تم إنشاء تمدد الأوعية الدموية (الجذع) عن طريق التعرض للشريان السباتي المشترك الأيمن (CCA) في أصله في الجذع العضدي. تم تطبيق مقطع مؤقت في أصل CCA وآخر ، 2 سم أعلاه. تم علاج هذا الجزء بحقن موضعي من 100 U من elastase لمدة 20 دقيقة. تم إنشاء تمدد الأوعية الدموية الثاني (التشعب) عن طريق خياطة كيس شرياني معالج بالإيلاستيز في مفاغرة من طرف إلى جانب من CCA الأيمن إلى CCA الأيسر. تم التحكم في المباح عن طريق تصوير الأوعية الفلورية مباشرة بعد الخلق.
كان متوسط مدة الجراحة 221 دقيقة. كان إنشاء تمدد الأوعية الدموية في نفس الحيوان ناجحا في جميع الأرانب دون مضاعفات. تم تسجيل براءة اختراع لجميع تمدد الأوعية الدموية مباشرة بعد الجراحة باستثناء تمدد الأوعية الدموية التشعب ، والذي أظهر تفاعلا شديدا للأنسجة بسبب حضانة الإيلاستاز وتجلط الدم الفوري داخل اللمعان. لم يلاحظ أي معدل وفيات أثناء الجراحة والمتابعة لمدة تصل إلى شهر واحد. اقتصرت المراضة على متلازمة دهليزية عابرة (أرنب واحد) ، والتي تعافت تلقائيا في غضون يوم واحد.
ويتضح هنا لأول مرة جدوى إنشاء نموذج أرنب ثنائي تمدد الأوعية الدموية مع خصائص ديناميكية دموية للجذع والتشعب وظروف جدار شديدة التدهور. يسمح هذا النموذج بدراسة المسار الطبيعي واستراتيجيات العلاج المحتملة على أساس بيولوجيا تمدد الأوعية الدموية في ظل ظروف تدفق مختلفة.
تمدد الأوعية الدموية داخل الجمجمة هو حالة خطيرة مع معدل وفيات بعد تمزق يصل إلى 50 ٪ والعجز على المدى الطويل في 10-20 ٪ من المرضى1. شهد العقد الماضي تطورا سريعا في خيارات العلاج داخل الأوعية الدموية ، ولكن في الوقت نفسه ، شهد أيضا معدل متزايد من التكرار مع ما يصل إلى 33٪ من إعادة قناة تمدد الأوعية الدموية بعد لف 2,3. لفهم أفضل للفيزيولوجيا المرضية الكامنة وراء انسداد تمدد الأوعية الدموية وإعادة الاستقناء ، وكذلك لتطوير واختبار أجهزة الأوعية الدموية الجديدة ، هناك حاجة حاليا إلى نماذج موثوقة قبل السريرية التي تحاكي خصائصها الديناميكية الدموية والمورفولوجية والنسيجية تلك الخاصة بتمدد الأوعية الدموية البشري داخل الجمجمة 4,5,6 . اعتبارا من اليوم ، لا يوجد نموذج محدد كمعيار للتجارب قبل السريرية ، وتتوفر مجموعة كبيرة من الأنواع والتقنيات للباحثين 7,8.
ومع ذلك ، فإن الأرنب هو نوع ذو أهمية خاصة بسبب الحجم والتشابه الديناميكي بين شرايين الرقبة والأوعية الدماغية البشرية ، بالإضافة إلى ملامح التخثر وانحلال الجلطات المماثلة. أظهرت العديد من النماذج التي تحتوي على تمدد الأوعية الدموية العجزي المهضوم بالإيلاستيز على الشرايين السباتية الشائعة (CCAs) أوجه تشابه نوعية وكمية مع تمدد الأوعية الدموية البشري داخل الجمجمة من حيث ظروف التدفق والميزات الهندسية وخصائص الجدار9،10،11،12. تهدف هذه الدراسة إلى وصف تقنية لإنشاء نموذج جديد لتمدد الأوعية الدموية للأرانب مع كل من تمدد الأوعية الدموية المهضوم بالجذع والتشعب في نفس الحيوان. والتقنيات الجراحية مستوحاة من تقنيات هوه وآخرون 13 وواندرر وآخرون 14 مع تعديلات طفيفة لتوفير توحيد جيد وقابلية للتكرار وضمان انخفاض معدل الوفيات والاعتلال.
تتضمن التقنية الأكثر شيوعا لإنشاء تمدد الأوعية الدموية إنشاء تمدد الأوعية الدموية في الجذع في أصل CCA الصحيح ، إما من خلال طريقة مفتوحة أو داخل الأوعية الدموية. تم التحقق من صحة النموذج ليكون تمدد الأوعية الدموية غير المتنامي المستقر الذي لا يزال مفتوحا مع مرور الوقت20,21<s…
The authors have nothing to disclose.
يشكر المؤلفون البروفيسور هانز رودولف فيدمر والدكتور لوكا ريموندا والبروفيسور خافيير فاندينو على دعمهم العلمي ومساهمتهم التقنية في هذا العمل. شكر خاص لأولجيكا بيسلاك على مشورتها أثناء الإجراءات وكاي نيتلبيك على مساعدته. علاوة على ذلك ، نشكر دانييلا كاسوني DVM ، دكتوراه وطبيب بيطري. لويزانا غارسيا ، الأستاذة الدكتورة أليساندرا بيرجادانو ، والدكتورة كارلوتا ديتوتو لدعمهم البيطري المتفاني.
4-0 resorbable suture | Ethicon Inc., USA | VCP292ZH | |
4-0 resorbable suture | Ethicon Inc., USA | VCP304H | |
6-0 non absorbable suture | B. Braun, Germany | C0766070 | |
9-0 non absorbable suture | B. Braun, Germany | G1111140 | |
Adrenaline | Amino AG | 1445419 | any generic |
Amiodarone | Helvepharm AG | 5078567 | any generic |
Anesthesia machine | Dräger | any other | |
Aspirin | Sanofi-Aventis (Suisse) SA | 622693 | any generic |
Atropine | Labatec Pharma SA | 6577083 | any generic |
Bandpass filter blue | Thorlabs | FD1B | any other |
Bandpass filter green | Thorlabs | FGV9 | any other |
Biemer vessel clip (2x) | B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland | FD560R | any other |
Bipolar forceps | any other | ||
Bispectral index (neonatal) | any other | ||
Blood pressure cuff (neonatal) | any other | ||
Bycilces spotlight | any other | ||
Clamoxyl | GlaxoSmithKline AG | 758808 | any generic |
Dexmedetomidine | Ever Pharma | 136740-1 | any generic |
Elastase | Sigma Aldrich | E7885 | |
Electrocardiogram electrodes | |||
Ephedrine | Amino AG | 1435734 | |
Esmolol | OrPha Swiss GmbH | 3284044 | |
Fentanyl (intravenous use) | Janssen-Cilag AG | 98683 | |
Fentanyl (transdermal) | Mepha Pharma AG | 4008286 | |
Fluoresceine | Curatis AG | 5030376 | |
Fragmin | Pfizer PFE Switzerland GmbH | 1906725 | |
Heating pad or heating forced-air warming system | |||
Isotonic sodium chloride solution (0.9%) | Fresenius KABI | 336769 | |
Ketamine | Pfizer PFE Switzerland GmbH | 342261 | |
lid retractor | Approach | ||
Lidocaine | Streuli Pharma AG | 747466 | |
Longuettes | |||
Metacam | Boehringer Ingelheim | P7626406 | Medication |
Methadone | Streuli Pharma AG | 1084546 | Sedaton |
Micro-forceps curved | Ulrich Swiss, Switzerland | U52-015-15 | |
Micro-forceps straight 2x | Ulrich Swiss, Switzerland | U52-010-15 | |
Microscissors | Ulrich Swiss , Switzerland | U52-327-15 | |
Midazolam | Accord Healthcare AG | 7752484 | |
Needle 23 G | arteriotomy | ||
Needle holder | |||
O2-Face mask | |||
Operation microscope | Wild Heerbrugg | ||
Papaverin | Bichsel | topical application | |
Povidone iodine | Mundipharma Medical Company | any generic | |
Prilocaine-lidocaine creme | Emla | ||
Propofol | B. Braun Medical AG, Switzerland | General anesthesia | |
Pulse oxymeter | |||
Rectal temperature probe (neonatal) | |||
Ringer Lactate | Bioren Sintetica SA | Infusion | |
Ropivacain | Aspen Pharma Schweiz GmbH | 1882249 | Local anesthesia |
Scalpell | Swann-Morton | 210 | |
Small animal shaver | |||
Soft tissue forceps | |||
Soft tissue spreader | |||
Stainless steel sponge bowls | |||
Sterile micro swabs | |||
Stethoscope | |||
Surgery drape | |||
Surgical scissors | |||
Syringes 1 mL, 2 mL, and 5 mL | |||
Tris-Buffer | Sigma Aldrich | 93302 | Elastase solution |
Vascular clip applicator | B. Braun, Germany | FT495T | |
Vein and arterial catheter 22 G | |||
vessel loop | Approach | ||
video camera or smartphone | |||
Vitarubin | Streuli Pharma AG | 6847559 | |
Yasargil titan standard clip (2x) | B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland | FT242T |