Um sistema de imagem de alta definição ajustável para estudos comportamentais de adultos drosophila
Summary
Este protocolo descreve como fazer uma simples câmara de observação de comportamento drosophila adulto, e como tirar fotografias/vídeos de alta definição da morfologia ou comportamento de diferentes tipos de moscas de frutas na câmara de observação através de métodos relativamente simples e acessíveis.
Abstract
Drosophila melanogaster é um modelo muito poderoso em pesquisa biológica, mas um modelo ruim para fotografia ou videografia. Este artigo descreve um método simples, mas eficaz, para observar e documentar o comportamento ou morfologia das moscas. Moscas foram colocadas em uma câmara de observação translúcida c.a. Ø15 x 5mm (sem comida dentro) ou Ø15 x 12 mm (com um pedaço de alimento de 8 mm de altura dentro). Depois de cobrir com um filtro de vídeo ultravioleta (UV)/claro com transmissão de luz alta, a câmara foi colocada sob um microscópio estéreo de zoom de 5-50x, e mini luzes de vídeo de diodo emissor de luz (LED) foram colocadas em ambos os lados do microscópio para iluminar a câmara para obter luz uniforme, macia, brilhante e quase livre de sombras. Em seguida, uma câmera digital compacta com zoom óptico de 3-5x, que pode gravar vídeo de alta definição ou de maior resolução de 1080 P (a uma taxa de quadros de ≥30 fps), foi conectada à ocular do microscópio através de um suporte, e fotografias ou vídeos foram tirados pela ocular. Ajustando o botão de zoom do microscópio estéreo de zoom, foi muito fácil rastrear as moscas e tirar imagens panorâmicas ou detalhadas de close-up conforme necessário, enquanto a câmera gravava tudo sob o microscópio. Como as moscas podem ficar em qualquer posição na câmara, elas podem ser observadas e registradas de todas as direções. As fotografias ou vídeos feitos são de boa qualidade de imagem. Este método pode ser usado tanto para pesquisa científica quanto para ensino.
Introduction
Drosophila melanogaster é um modelo de destaque em pesquisa biológica; no entanto, é um modelo ruim para fotografia ou videografia, pois é muito pequeno para uma câmera ou uma filmadora e muito grande para um microscópio composto1. Apesar de excelentes pesquisas descritas na literatura, a maioria dos estudos apenas forneceu imagens borradas e não claras, em vez de fotografias claras e nítidas com detalhes claros que ilustram o comportamento da mosca sendo descrito. Além disso, embora os comportamentos de mosca tenham sido extensivamente estudados (por exemplo, namoro e luta), a maioria desses artigos tem usado ilustrações para explicar suas pesquisas aos leitores.
Este artigo descreve uma abordagem simples e econômica. Usando este método, não só os diversos comportamentos de Drosophila podem ser observados, mas também todos os detalhes que podem ser observados sob um microscópio de zoom estéreo podem ser gravados de forma clara e acentuada. Claro, este método também pode ser usado para registrar a morfologia das moscas, pois quando elas entram em um estado de sono ou semissono, o modelo estacionário permite que o usuário tire uma fotografia ou uma pilha de fotografias com diferentes planos focais para obter uma ampla profundidade de foto de campo. Esses métodos podem ser realizados sem tecnologia complicada e equipamentos caros ou até mesmo excelentes habilidades manuais.
O componente de vídeo deste artigo mostra vídeos de vários comportamentos típicos de moscas. O objetivo de mostrar esses vídeos é duplo: um deles é deixar o público saber o que pode ser capturado e apresentar a qualidade da imagem obtida usando este método; o outro é deixar que novos alunos que se interessam por Drosophila, mas até agora não tiveram a oportunidade de realmente observar o comportamento das moscas entender o comportamento das moscas (como namoro, luta) através desses vídeos claros em vez de ilustrações ou imagens borradas.
Vídeo suplementar: Fruit Fly Behavior: Por favor, clique aqui para baixar este arquivo.
Protocol
Representative Results
Discussion
A luz está no centro da fotografia e da videografia e é o fator decisivo para a obtenção de imagens de alta qualidade16. Aqui, duas luzes de vídeo LED com brilho ajustável e temperatura de cor foram usadas como iluminadores, e um material translúcido foi selecionado para fazer o FBOC. Os painéis de luz LED em ambos os lados forneceram brilho suficiente, e o material translúcido suavizou e espalhou luz, eventualmente produzindo luz uniforme, macia e brilhante para iluminar as moscas no FBO…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Agradecemos ao Professor Li Xiangdong e ao fotógrafo Sr. Cheng Jing por discussões e sugestões úteis. Este trabalho foi apoiado pelo Projeto Exploratório (20200101) do Centro experimental de demonstração de ensino de Ciências da Vida da Universidade Agrícola da China.
Materials
| compact camera, Nikon P310 | Nikon | 3-5x optical zoom, cam record 1080 P HD video | |
| ethylamine foam | 60 mm x 60 mm x 15 mm | ||
| Food Blue No 1 | CAS 3844-45-9 | ||
| mini LED lights and transformer | GODOX | LED-P120 | have 5000-5600 K color temperature |
| small container (e.g. bottle cap) | about Ø 15 mm x 20 mm | ||
| UV / Clear filter | high-quality UV/Clear filter with high transmittance, 30-40 mm | ||
| zoom stereo microscope | 5-50x zoom |
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