Prøveudtagning af humant subkutant fedtvæv ved hjælp af en mini-fedtsugningsteknik

Summary

Manuskriptet og tilhørende video demonstrerer en perkutan biopsiteknik til at opnå prøver af subkutant fedtvæv fra områder omkring navlestrengen. Denne metode er en lavrisiko og effektiv måde at undersøge en række parametre (fx gen- eller proteinekspression, enzymaktivitet, lipidindhold) inden for fedtvæv.

Abstract

Undersøgelser af fedtvæv er nyttige til forståelse af metaboliske og andre tilstande. Humant subkutant fedtvæv er tilgængeligt. Med passende træning og streng overholdelse af aseptisk teknik kan subkutane fedtprøver opnås sikkert og effektivt i en ikke-klinisk indstilling af forskere. Efter administration af lokalbedøvelse lateral til navlestrengen indsættes en 14 G nål fastgjort til en 5 eller 10 ml sprøjte gennem huden i det subkutane væv. Under sugning bevæges sprøjten i en frem- og tilbagegående, skærende bevægelse for at isolere fragmenter af fedtvæv. Tilbagetrækning af stemplet er nok til at sikre, at fedtvævsfragmenter aspireres gennem nålen ind i sprøjten. En enkelt biopsi kan indsamle omkring 200 mg væv. Denne biopsi teknik er meget sikker for både deltagere og forskningspersonale. Efter biopsien kan deltagerne genoptage de fleste hverdagsaktiviteter, selvom de bør undgå svømning og alt for anstrengende aktiviteter i 48 timer for at undgå overdreven blødning. Deltagerne kan sikkert gennemgå 2 biopsier inden for en enkelt dag, hvilket betyder, at teknikken kan anvendes i før-efter akutte interventionsstudier.

Introduction

Fedtvæv kan give nyttige oplysninger om menneskers metaboliske funktion. Humant subkutant fedtvæv er let tilgængeligt. En teknik til subkutan fedtvævsekstraktion blev først beskrevet i midten af 80’erne¹; Siden da er den oprindelige protokol blevet forbedret for at øge udbyttet og forbedre undersøgelsesdeltagernes tolerabilitet. Subkutant fedtvæv kan opnås fra mange steder, oftest fra glutei¹ og abdominalområdet². Prøver fra sidstnævnte kan være mere ønskelige, da de giver mere værdifulde oplysninger i metaboliske sygdomsrelaterede sammenhænge³.

Subkutan fedtvævsbiopsi ved hjælp af mini-fedtsugningsmetoden kan udføres sikkert og effektivt i en ikke-klinisk indstilling. Efter passende træning af en bestyrelsescertificeret læge og ved hjælp af streng aseptisk teknik kan forskere rutinemæssigt udføre disse biopsier med minimal risiko for både deltager og efterforskere. Biopsiteamet skal bestå af mindst 2 personer: den person, der skal udføre biopsien og en assistent.

Den person, der er ansvarlig for biopsien, har til opgave at bekræfte deltagerens identitet, kontrollere, at deltageren sikkert kan gennemgå proceduren (se protokoltrin 2.1-2.4 nedenfor), sikre, at deltageren er komfortabel under hele proceduren, sikre, at steril teknik opretholdes under hele proceduren, udføre proceduren og give deltageren mundtlige og skriftlige efterbehandlingsprocedurer. Assistentens rolle er at håndtere og hurtigt behandle det fedtvæv, der opnås til senere analyse og / eller opbevaring. Assistenten hjælper også ved at være de “ikke-sterile hænder” og sikre, at deltageren er rolig under hele proceduren. Formålet med denne video og papir er at beskrive den trinvise biopsiprocedure for sikkert at opnå subkutant fedtvæv fra abdominalområdet.

Protocol

BEMÆRK: University of Stirling NHS, Invasive eller Clinical Research Committee godkendte biopsiproceduren beskrevet nedenfor. Alle forskningsundersøgelser, der anvender denne procedure, skal godkendes af den relevante uafhængige etiske komité. Biopsitageren skal have gennemført formel uddannelse i den beskrevne teknik i overensstemmelse med deres institutions krav. Dette indebærer typisk at observere en demonstration af den beskrevne fedtvævsbiopsiteknik af en bestyrelsescertificeret læge efterfulgt af overvåget…

Representative Results

Den beskrevne fedtvævsbiopsiprocedure er en effektiv og lavrisikoteknik for forskere til at få subkutane fedtvævsprøver fra frivillige mennesker. Vi udførte 39 subkutane fedtvævsbiopsier ved hjælp af den beskrevne procedure hos 11 sunde, normalvægtige kvinder (alder, 27,4 ± 3,3 år; body mass index (BMI), 22,6 ± 1,5 kg.m2). Alle deltagere deltog i laboratoriet mellem kl. 07.00 og 10.00 efter en fasteperiode på 8-12 timer. Prøveudbyttet ved anvendelse af denne fedtvævsbiopsiprocedure var 192,0 ± 9…

Discussion

Den beskrevne protokol og tilhørende video giver et trin-for-trin overblik over en mini-fedtsugningsteknik til at opnå subkutane fedtvævsprøver fra abdominalområdet. Denne forskningsgruppe har udført i alt 124 biopsier i løbet af 19 måneder uden bivirkninger hos deltagerne. Proceduren er sikker og forbundet med minimal risiko for deltagere eller biopsiholdet, forudsat at de beskrevne sikkerhedsforanstaltninger følges. Aseptisk teknik (herunder åbning og udlevering af sterilt udstyr uden at forurene det, passend…

Materials

Item: 14 G needle 14 G x 3 1/8" 210 mm x 80 mm	B Braun	4665473	Per biopsy: 1
Item: 21 G needle 21 G x 1 1/2" 0.8 mm x 38 mm	Terumo	AN*2138R1	Per biopsy: 2
Item: 26 G  needle 26 G x 1/2" microlance needle 0.45 mm x 13 mm	BD	303800	Per biopsy: 2
Item: 5 mL syringe 5 mL luer	DB plastipak	302187	Per biopsy: 2
Item: Adhesive wound dressing Opsite Post-Op Dressing 9.5 x 8.5	Smith & Nephew	6600709	Per biopsy: 1
Item: Disposable sterile scalpel Disposable Scalpel Sterile Blade no. 10	Swann Morton	/0501	Per biopsy: 1
Item: Icepack BlueDot Reusable Hot/Cold Pack 26.5 cm x 13.0 cm	NuCare	F711	Per biopsy: 1
Item: Iodine based antiseptic Videne antiseptic solution	Ecolab Videne	3030440	Per biopsy: q.s
Item: Lidocaine 2% w/o epinephrine Lidocaine 2% injection 5 mL	B Braun	3558553	Per biopsy: 5 mL
Item: Non-sterile gloves Starguard sensitive powder free nitrile gloves	Starguard	SG-N-S	Per biopsy: pair
Item: Sodium chloride 0.9% Sodium chlride 0.9% w/v intravenous infusion BP	BBraun	S8004-5384	Per biopsy: q.s.
Item: Stabilization solution* RNAlater Stabilization Solution	ThermoFisher Scientific	AM7020	Per biopsy: q.s
Item: Sterile forceps Sterile forceps	Rocialle	RML109-006	Per biopsy: 1
Item: Sterile gauze swabs Non woven swabs sterile 7.5 x 7.5 cm	Prestige	1860	Per biopsy: 5
Item: Sterile gloves Prestige soft vinyl sterile powder free medical gloves	Prestige	S: P4301 M:P3302 L:P3301	Per biopsy: pair
Item: Sterile Microcentrifuge tubes 1.5 mL Sterile Microcentrifuge Tubes	StarLab	I1415-5510	Per biopsy: q.s
Item: Sterile sheet Paper plain white 90 x 90 cm	Rocialle	RML 126-216	Per biopsy: 1
Item: Weighing boat Diamond shape weigh boats	Heathrow Scientific	HS1427C	Per biopsy: 1
* denotes optional materials