Prélèvement de tissu adipeux sous-cutané humain à l’aide d’une technique de mini-liposuccion

Summary

Le manuscrit et la vidéo associée démontrent une technique de biopsie percutanée pour obtenir des échantillons de tissu adipeux sous-cutané dans les zones entourant l’ombilic. Cette méthode est un moyen efficace et à faible risque d’étudier une gamme de paramètres (par exemple, l’expression des gènes ou des protéines, l’activité enzymatique, la teneur en lipides) dans le tissu adipeux.

Abstract

Les études sur le tissu adipeux sont utiles pour comprendre les conditions métaboliques et autres. Le tissu adipeux sous-cutané humain est accessible. Avec une formation appropriée et le strict respect de la technique aseptique, les échantillons adipeux sous-cutanés peuvent être obtenus de manière sûre et efficace dans un cadre non clinique par les chercheurs. Après l’administration d’un anesthésique local latéral à l’ombilic, une aiguille de 14 G fixée à une seringue de 5 ou 10 ml est insérée à travers la peau dans le tissu sous-cutané. Sous aspiration, la seringue est déplacée dans un mouvement alternatif de tranchage pour isoler des fragments de tissu adipeux. Le retrait du piston suffit à garantir que les fragments de tissu adipeux sont aspirés à travers l’aiguille dans la seringue. Une seule biopsie peut recueillir environ 200 mg de tissu. Cette technique de biopsie est très sécuritaire pour les participants et le personnel de recherche. Après la biopsie, les participants peuvent reprendre la plupart des activités quotidiennes, bien qu’ils doivent éviter de nager et les activités trop intenses pendant 48 heures pour éviter des saignements excessifs. Les participants peuvent subir en toute sécurité 2 biopsies en une seule journée, ce qui signifie que la technique peut être appliquée dans les études d’intervention aiguë avant-après.

Introduction

Le tissu adipeux peut fournir des informations utiles sur la fonction métabolique des humains. Le tissu adipeux sous-cutané humain est facilement accessible. Une technique d’extraction sous-cutanée du tissu adipeux a été décrite pour la première fois au milieu des années 80¹; Depuis lors, le protocole initial a été amélioré pour augmenter le rendement et améliorer la tolérance des participants à l’étude. Le tissu adipeux sous-cutané peut être obtenu à partir de nombreux sites, le plus souvent à partir du fessier¹ et de la région abdominale². Les échantillons de ces derniers peuvent être plus souhaitables car ils fournissent des informations plus précieuses dans les contextes liés aux maladies métaboliques³.

La biopsie sous-cutanée du tissu adipeux à l’aide de la méthode de mini-liposuccion peut être réalisée de manière sûre et efficace dans un cadre non clinique. Après une formation appropriée dispensée par un médecin certifié par le conseil d’administration et en utilisant une technique aseptique stricte, les chercheurs peuvent effectuer régulièrement ces biopsies avec un risque minimal pour les participants et les investigateurs. L’équipe de biopsie doit être composée d’au moins 2 personnes : la personne qui effectuera la biopsie et un assistant.

La personne responsable de la biopsie est chargée de confirmer l’identité du participant, de vérifier que le participant peut subir la procédure en toute sécurité (voir les étapes du protocole 2.1-2.4 ci-dessous), de s’assurer que le participant est à l’aise tout au long de la procédure, de s’assurer que la technique stérile est maintenue tout au long de la procédure, d’effectuer la procédure et de fournir au participant des procédures de suivi verbales et écrites. Le rôle de l’assistant est de manipuler et de traiter rapidement le tissu adipeux obtenu pour une analyse ultérieure et/ou un stockage. L’assistant aide également en étant les « mains non stériles » et en veillant à ce que le participant soit à l’aise tout au long de la procédure. Le but de cette vidéo et de cet article est de décrire la procédure de biopsie étape par étape pour obtenir en toute sécurité du tissu adipeux sous-cutané de la région abdominale.

Protocol

REMARQUE: Le NHS, Invasive, ou Comité de recherche clinique de l’Université de Stirling a approuvé la procédure de biopsie décrite ci-dessous. Toutes les études de recherche utilisant cette procédure doivent être approuvées par le comité d’éthique indépendant approprié. Le biopsie doit avoir suivi une formation officielle sur la technique décrite conformément aux exigences de son établissement. En règle générale, cela implique d’observer une démonstration de la technique de biopsie du tissu adip…

Representative Results

La procédure de biopsie du tissu adipeux décrite est une technique efficace et à faible risque pour les chercheurs afin d’obtenir des échantillons de tissu adipeux sous-cutané de volontaires humains. Nous avons effectué 39 biopsies sous-cutanées du tissu adipeux en utilisant la procédure décrite chez 11 femmes en bonne santé de poids normal (âge, 27,4 ± 3,3 ans ; indice de masse corporelle (IMC), 22,6 ± 1,5 kg.m2). Tous les participants se sont rendus au laboratoire entre 07h00 et 10h00 après u…

Discussion

Le protocole décrit et la vidéo associée fournissent un aperçu étape par étape d’une technique de mini-liposuccion pour obtenir des échantillons de tissu adipeux sous-cutané de la région abdominale. Ce groupe de recherche a effectué un total de 124 biopsies sur une période de 19 mois sans effets indésirables chez les participants. La procédure est sûre et associée à un risque minimal pour les participants ou l’équipe de biopsie, à condition que les mesures de sécurité décrites soient suivies. La …

Materials

Item: 14 G needle 14 G x 3 1/8" 210 mm x 80 mm	B Braun	4665473	Per biopsy: 1
Item: 21 G needle 21 G x 1 1/2" 0.8 mm x 38 mm	Terumo	AN*2138R1	Per biopsy: 2
Item: 26 G  needle 26 G x 1/2" microlance needle 0.45 mm x 13 mm	BD	303800	Per biopsy: 2
Item: 5 mL syringe 5 mL luer	DB plastipak	302187	Per biopsy: 2
Item: Adhesive wound dressing Opsite Post-Op Dressing 9.5 x 8.5	Smith & Nephew	6600709	Per biopsy: 1
Item: Disposable sterile scalpel Disposable Scalpel Sterile Blade no. 10	Swann Morton	/0501	Per biopsy: 1
Item: Icepack BlueDot Reusable Hot/Cold Pack 26.5 cm x 13.0 cm	NuCare	F711	Per biopsy: 1
Item: Iodine based antiseptic Videne antiseptic solution	Ecolab Videne	3030440	Per biopsy: q.s
Item: Lidocaine 2% w/o epinephrine Lidocaine 2% injection 5 mL	B Braun	3558553	Per biopsy: 5 mL
Item: Non-sterile gloves Starguard sensitive powder free nitrile gloves	Starguard	SG-N-S	Per biopsy: pair
Item: Sodium chloride 0.9% Sodium chlride 0.9% w/v intravenous infusion BP	BBraun	S8004-5384	Per biopsy: q.s.
Item: Stabilization solution* RNAlater Stabilization Solution	ThermoFisher Scientific	AM7020	Per biopsy: q.s
Item: Sterile forceps Sterile forceps	Rocialle	RML109-006	Per biopsy: 1
Item: Sterile gauze swabs Non woven swabs sterile 7.5 x 7.5 cm	Prestige	1860	Per biopsy: 5
Item: Sterile gloves Prestige soft vinyl sterile powder free medical gloves	Prestige	S: P4301 M:P3302 L:P3301	Per biopsy: pair
Item: Sterile Microcentrifuge tubes 1.5 mL Sterile Microcentrifuge Tubes	StarLab	I1415-5510	Per biopsy: q.s
Item: Sterile sheet Paper plain white 90 x 90 cm	Rocialle	RML 126-216	Per biopsy: 1
Item: Weighing boat Diamond shape weigh boats	Heathrow Scientific	HS1427C	Per biopsy: 1
* denotes optional materials