미니 지방 흡입 기술을 사용한 인간 피하 지방 조직 샘플링
Summary
원고 및 관련 비디오는 배꼽 주변 영역에서 피하 지방 조직 샘플을 얻는 경피적 생검 기술을 보여줍니다. 이 방법은 지방 조직 내에서 다양한 매개 변수 (예 : 유전자 또는 단백질 발현, 효소 활성, 지질 함량)를 조사하는 저위험하고 효율적인 방법입니다.
Abstract
지방 조직에 대한 연구는 대사 및 기타 상태를 이해하는 데 유용합니다. 인간의 피하 지방 조직에 접근 할 수 있습니다. 적절한 훈련과 무균 기술에 대한 엄격한 준수를 통해 피하 지방 샘플을 연구자가 비임상 환경에서 안전하고 효율적으로 얻을 수 있습니다. 배꼽에 국소 마취제를 투여 한 후, 5 또는 10 mL 주사기에 부착 된 14G 바늘을 피부를 통해 피하 조직으로 삽입합니다. 흡입 상태에서 주사기는 왕복 운동으로 이동하여 지방 조직 조각을 분리합니다. 플런저를 빼면 지방 조직 조각이 바늘을 통해 주사기로 흡인됩니다. 단일 생검은 약 200mg의 조직을 수집 할 수 있습니다. 이 생검 기술은 참가자와 연구 직원 모두에게 매우 안전합니다. 생검 후 참가자는 과도한 출혈을 피하기 위해 48시간 동안 수영과 지나치게 격렬한 활동을 피해야 하지만 대부분의 일상 활동을 재개할 수 있습니다. 참가자는 하루 안에 2번의 생검을 안전하게 받을 수 있으며, 이는 이 기술을 급성 중재 전후 연구에 적용할 수 있음을 의미합니다.
Introduction
지방 조직은 인간의 대사 기능에 대한 유용한 정보를 제공 할 수 있습니다. 인간의 피하 지방 조직은 쉽게 접근 할 수 있습니다. 피하 지방 조직 추출 기술은 80 년대 중반에 처음 설명되었습니다1; 그 이후로 수율을 높이고 연구 참가자의 내약성을 개선하기 위해 초기 프로토콜이 개선되었습니다. 피하 지방 조직은 수많은 부위로부터 얻을 수 있으며, 가장 일반적으로 둔부1 및 복부2에서 얻을 수 있습니다. 후자의 샘플은 대사 질환 관련 맥락에서 더 가치있는 정보를 제공하기 때문에 더 바람직 할 수 있습니다3.
미니 지방 흡입 방법을 이용한 피하 지방 조직 생검은 비 임상 환경에서 안전하고 효율적으로 수행 할 수 있습니다. 보드 인증 의사의 적절한 교육을 받고 엄격한 무균 기술을 사용하여 연구원은 참가자와 조사자 모두에게 최소한의 위험으로 이러한 생검을 일상적으로 수행 할 수 있습니다. 생검 팀은 생검을 수행 할 사람과 조수, 즉 최소 2 명으로 구성되어야합니다.
생검을 담당하는 사람은 참가자의 신원을 확인하고, 참가자가 안전하게 절차를 수행할 수 있는지 확인하고(아래 프로토콜 단계 2.1-2.4 참조), 참가자가 절차 전반에 걸쳐 편안한지 확인하고, 절차 전반에 걸쳐 멸균 기술이 유지되도록 하고, 절차를 수행하고, 참가자에게 구두 및 서면 사후 관리 절차를 제공합니다. 보조자의 역할은 나중에 분석 및/또는 저장을 위해 얻은 지방 조직을 처리하고 신속하게 처리하는 것입니다. 조수는 또한 “비 멸균 손”이되어 참가자가 절차 전반에 걸쳐 편안하게 지낼 수 있도록함으로써 도움을줍니다. 이 비디오와 논문의 목적은 복부에서 피하 지방 조직을 안전하게 얻기위한 단계별 생검 절차를 설명하는 것입니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
설명 된 프로토콜 및 관련 비디오는 복부 영역에서 피하 지방 조직 샘플을 얻기위한 미니 지방 흡입 기술의 단계별 개요를 제공합니다. 이 연구 그룹은 참가자에게 부작용없이 124 개월 동안 총 19 건의 생검을 수행했습니다. 절차는 안전하고 설명 된 안전 조치를 따르는 경우 참가자 또는 생검 팀에 대한 위험을 최소화합니다. 무균 기술(멸균 장비를 오염시키지 않고 개봉 및 분배, 멸균 장갑을 적?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자는 선언 할 자금이 없습니다.
Materials
| Item: 14 G needle 14 G x 3 1/8" 210 mm x 80 mm |
B Braun | 4665473 | Per biopsy: 1 |
| Item: 21 G needle 21 G x 1 1/2" 0.8 mm x 38 mm |
Terumo | AN*2138R1 | Per biopsy: 2 |
| Item: 26 G needle 26 G x 1/2" microlance needle 0.45 mm x 13 mm |
BD | 303800 | Per biopsy: 2 |
| Item: 5 mL syringe 5 mL luer |
DB plastipak | 302187 | Per biopsy: 2 |
| Item: Adhesive wound dressing Opsite Post-Op Dressing 9.5 x 8.5 |
Smith & Nephew | 6600709 | Per biopsy: 1 |
| Item: Disposable sterile scalpel Disposable Scalpel Sterile Blade no. 10 |
Swann Morton | /0501 | Per biopsy: 1 |
| Item: Icepack BlueDot Reusable Hot/Cold Pack 26.5 cm x 13.0 cm |
NuCare | F711 | Per biopsy: 1 |
| Item: Iodine based antiseptic Videne antiseptic solution |
Ecolab Videne | 3030440 | Per biopsy: q.s |
| Item: Lidocaine 2% w/o epinephrine Lidocaine 2% injection 5 mL |
B Braun | 3558553 | Per biopsy: 5 mL |
| Item: Non-sterile gloves Starguard sensitive powder free nitrile gloves |
Starguard | SG-N-S | Per biopsy: pair |
| Item: Sodium chloride 0.9% Sodium chlride 0.9% w/v intravenous infusion BP |
BBraun | S8004-5384 | Per biopsy: q.s. |
| Item: Stabilization solution* RNAlater Stabilization Solution |
ThermoFisher Scientific | AM7020 | Per biopsy: q.s |
| Item: Sterile forceps Sterile forceps |
Rocialle | RML109-006 | Per biopsy: 1 |
| Item: Sterile gauze swabs Non woven swabs sterile 7.5 x 7.5 cm |
Prestige | 1860 | Per biopsy: 5 |
| Item: Sterile gloves Prestige soft vinyl sterile powder free medical gloves |
Prestige | S: P4301 M:P3302 L:P3301 |
Per biopsy: pair |
| Item: Sterile Microcentrifuge tubes 1.5 mL Sterile Microcentrifuge Tubes |
StarLab | I1415-5510 | Per biopsy: q.s |
| Item: Sterile sheet Paper plain white 90 x 90 cm |
Rocialle | RML 126-216 | Per biopsy: 1 |
| Item: Weighing boat Diamond shape weigh boats |
Heathrow Scientific | HS1427C | Per biopsy: 1 |
| * denotes optional materials |
References
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