Humant subkutant fettvävnadsprovtagning med hjälp av en minifettsugningsteknik

Summary

Manuskriptet och tillhörande video visar en perkutan biopsiteknik för att erhålla prover av subkutan fettvävnad från områden som omger naveln. Denna metod är ett lågrisk och effektivt sätt att undersöka en rad parametrar (t.ex. gen- eller proteinuttryck, enzymaktivitet, lipidinnehåll) i fettvävnad.

Abstract

Studier på fettvävnad är användbara för att förstå metaboliska och andra tillstånd. Mänsklig subkutan fettvävnad är tillgänglig. Med lämplig utbildning och strikt efterlevnad av aseptisk teknik kan subkutana fettprover erhållas säkert och effektivt i en icke-klinisk miljö av forskare. Efter administrering av lokalbedövning i sidled till naveln sätts en 14 G nål fäst vid en 5 eller 10 ml spruta in genom huden i subkutan vävnad. Under sugning flyttas sprutan i en fram- och återgående, skivande rörelse för att isolera fragment av fettvävnad. Att dra tillbaka kolven är tillräckligt för att säkerställa att fettvävnadsfragment sugs genom nålen i sprutan. En enda biopsi kan samla cirka 200 mg vävnad. Denna biopsiteknik är mycket säker för både deltagare och forskningspersonal. Efter biopsin kan deltagarna återuppta de flesta vardagliga aktiviteter, även om de bör undvika simning och alltför ansträngande aktiviteter i 48 timmar för att undvika överdriven blödning. Deltagarna kan säkert genomgå 2 biopsier inom en enda dag, vilket innebär att tekniken kan tillämpas i före-efter akuta interventionsstudier.

Introduction

Fettvävnad kan ge användbar information om människors metaboliska funktion. Mänsklig subkutan fettvävnad är lättillgänglig. En teknik för subkutan fettvävnadsextraktion beskrevs först i mitten av 80-talet¹; Sedan dess har det ursprungliga protokollet förbättrats för att öka avkastningen och förbättra studiedeltagarnas tolerabilitet. Subkutan fettvävnad kan erhållas från många ställen, oftast från glutei¹ och bukområdet². Prover från det senare kan vara mer önskvärt eftersom de ger mer värdefull information i metaboliska sjukdomsrelaterade sammanhang³.

Subkutan fettvävnadsbiopsi med hjälp av minifettsugningsmetoden kan utföras säkert och effektivt i en icke-klinisk miljö. Efter lämplig utbildning av en styrelsecertifierad läkare och med strikt aseptisk teknik kan forskare rutinmässigt utföra dessa biopsier med minimal risk för både deltagare och utredare. Biopsiteamet måste bestå av minst 2 personer: den person som ska utföra biopsin och en assistent.

Den person som ansvarar för biopsin har till uppgift att bekräfta deltagarens identitet, kontrollera att deltagaren säkert kan genomgå proceduren (se protokollsteg 2.1-2.4 nedan), se till att deltagaren är bekväm under hela proceduren, säkerställa att steril teknik upprätthålls under hela proceduren, genomföra proceduren och ge deltagaren muntliga och skriftliga efterbehandlingsprocedurer. Assistentens roll är att hantera och snabbt bearbeta fettvävnaden som erhållits för senare analys och / eller lagring. Assistenten hjälper också till genom att vara de “icke-sterila händerna” och se till att deltagaren är lugn under hela proceduren. Syftet med denna video och papper är att beskriva steg-för-steg-biopsiproceduren för att säkert erhålla subkutan fettvävnad från bukområdet.

Protocol

OBS: University of Stirling NHS, invasiv eller klinisk forskningskommitté godkände biopsiproceduren som beskrivs nedan. Alla forskningsstudier som använder detta förfarande måste godkännas av lämplig oberoende etisk kommitté. Biopsitagaren måste ha genomgått formell utbildning i den beskrivna tekniken i enlighet med institutionens krav. Vanligtvis innebär detta att man observerar en demonstration av den beskrivna fettvävnadsbiopsitekniken av en styrelsecertifierad läkare, följt av övervakad praxis. När pr…

Representative Results

Det beskrivna fettvävnadsbiopsiförfarandet är en effektiv och lågriskteknik för forskare att få subkutana fettvävnadsprover från frivilliga försökspersoner. Vi utförde 39 subkutana fettvävnadsbiopsier med det beskrivna förfarandet hos 11 friska, normalviktiga kvinnor (ålder, 27,4 ± 3,3 år; kroppsmassindex (BMI), 22,6 ± 1,5 kg.m2). Alla deltagare deltog i laboratoriet mellan 07:00 och 10:00 efter en 8-12 timmars fasteperiod. Provutbytet med hjälp av detta fettvävnadsbiopsiförfarande var 192,…

Discussion

Det beskrivna protokollet och tillhörande video ger en steg-för-steg-översikt över en mini-fettsugningsteknik för att erhålla subkutana fettvävnadsprover från bukområdet. Denna forskargrupp har utfört totalt 124 biopsier under 19 månader utan några biverkningar hos deltagarna. Förfarandet är säkert och förknippat med minimal risk för deltagarna eller biopsiteamet, förutsatt att de beskrivna säkerhetsåtgärderna följs. Aseptisk teknik (inklusive öppning och utmatning av steril utrustning utan att fö…

Materials

Item: 14 G needle 14 G x 3 1/8" 210 mm x 80 mm	B Braun	4665473	Per biopsy: 1
Item: 21 G needle 21 G x 1 1/2" 0.8 mm x 38 mm	Terumo	AN*2138R1	Per biopsy: 2
Item: 26 G  needle 26 G x 1/2" microlance needle 0.45 mm x 13 mm	BD	303800	Per biopsy: 2
Item: 5 mL syringe 5 mL luer	DB plastipak	302187	Per biopsy: 2
Item: Adhesive wound dressing Opsite Post-Op Dressing 9.5 x 8.5	Smith & Nephew	6600709	Per biopsy: 1
Item: Disposable sterile scalpel Disposable Scalpel Sterile Blade no. 10	Swann Morton	/0501	Per biopsy: 1
Item: Icepack BlueDot Reusable Hot/Cold Pack 26.5 cm x 13.0 cm	NuCare	F711	Per biopsy: 1
Item: Iodine based antiseptic Videne antiseptic solution	Ecolab Videne	3030440	Per biopsy: q.s
Item: Lidocaine 2% w/o epinephrine Lidocaine 2% injection 5 mL	B Braun	3558553	Per biopsy: 5 mL
Item: Non-sterile gloves Starguard sensitive powder free nitrile gloves	Starguard	SG-N-S	Per biopsy: pair
Item: Sodium chloride 0.9% Sodium chlride 0.9% w/v intravenous infusion BP	BBraun	S8004-5384	Per biopsy: q.s.
Item: Stabilization solution* RNAlater Stabilization Solution	ThermoFisher Scientific	AM7020	Per biopsy: q.s
Item: Sterile forceps Sterile forceps	Rocialle	RML109-006	Per biopsy: 1
Item: Sterile gauze swabs Non woven swabs sterile 7.5 x 7.5 cm	Prestige	1860	Per biopsy: 5
Item: Sterile gloves Prestige soft vinyl sterile powder free medical gloves	Prestige	S: P4301 M:P3302 L:P3301	Per biopsy: pair
Item: Sterile Microcentrifuge tubes 1.5 mL Sterile Microcentrifuge Tubes	StarLab	I1415-5510	Per biopsy: q.s
Item: Sterile sheet Paper plain white 90 x 90 cm	Rocialle	RML 126-216	Per biopsy: 1
Item: Weighing boat Diamond shape weigh boats	Heathrow Scientific	HS1427C	Per biopsy: 1
* denotes optional materials