מודל עכברוש 6-הידרוקסידופמין של מחלת פרקינסון
Summary
מודל 6-hydroxydopamine (6-OHDA) שימש במשך עשרות שנים כדי לקדם את ההבנה של מחלת פרקינסון. בפרוטוקול זה, אנו מדגימים כיצד לבצע נגעים nigrostriatal חד צדדיים בחולדה על ידי הזרקת 6-OHDA בחבילת המוח הקדמי המדיאלי, להעריך ליקויים מוטוריים, ולחזות נגעים באמצעות מבחן הצעדה.
Abstract
תסמינים מוטוריים של מחלת פרקינסון (PD)-ברדיקינזיה, אקנזיה, ורעד במנוחה- הם ההשלכות של ניוון עצבי דופאמין בסובסטנציה ניגרה pars compacta (SNc) וגירעון striatal דופאמין. מודלים של בעלי חיים שימשו באופן נרחב כדי לדמות פתולוגיה אנושית במעבדה. מכרסמים הם הדגמים בעלי החיים הנפוצים ביותר עבור PD בשל קלות הטיפול והתחזוקה שלהם. יתר על כן, האנטומיה והמנגנונים המולקולריים, התאיים והפרמקולוגיים של PD דומים במכרסמים ובבני אדם. עירוי של neurotoxin, 6-hydroxydopamine (6-OHDA), לתוך צרור המוח הקדמי המדיאלי (MFB) של חולדות משחזר את ההרס החמור של נוירונים דופאמין ומדמה תסמיני PD. פרוטוקול זה מדגים כיצד לבצע את microinjection חד צדדי של 6-OHDA ב- MFB במודל חולדה של PD ומראה את הליקויים המוטוריים הנגרמים על ידי 6-OHDA ונגעים דופאמין חזוי באמצעות מבחן הצעד. 6-OHDA גורם לפגיעה משמעותית במספר השלבים המבוצעים עם חזית הנגד.
Introduction
המאפיינים הנוירופתולוגיים העיקריים של PD הם ניוון עצבי פרוגרסיבי כרוני של נוירונים דופאמין בסובסטנציה ניגרה pars compacta (SNc) ואת נוכחותם של גופים לוי המכילים חלבון α-סינוקלאין1. כמו נוירונים דופאמין SNc להקרין האקסונים שלהם לתוך הסטריאטום דרך המסלול nigrostriatal, ניוון עצבי של נוירונים ב SNc גורם גירעון דופאמין בסטריאטום2. היעדר דופמין בסטריאטום גורם לחוסר איזון בפעילותם של מסלולי הבקרה המוטורית הישירים והעקיפים, האחראים על הסימפטומים המוטוריים העיקריים של PD: אקנזיה (תנועה איטית), ברדיקינזיה (קושי בהתחלת תנועות), נוקשות שרירים ורעד במנוחה 3,4,5.
כמו המנגנונים המולקולריים והפיזיולוגיים המעורבים בהתפרצות של PD עדיין לא מובנים במלואם, טיפולים עיקריים זמינים כיום מבקשים להקל על הסימפטומים המוטוריים באמצעות פרמקותרפיות, גירוי מוחי עמוק6,7, טיפולים גנטיים8, השתלת תאים9. לכן, מחקר פרה קליני הוא בסיסי כדי להבהיר את המנגנונים המעורבים בהופעת PD ולגלות מתודולוגיות חדשות לאבחון מוקדם וטיפולים חדשים כדי למנוע או לעצור את ניוון של נוירונים מושפעים PD10.
מודלים של בעלי חיים שימשו באופן נרחב כדי לדמות פתולוגיה אנושית במעבדה, ותורמים לקידום הרפואה והמדע11,12,13,14. עם זאת, חשוב להדגיש כי הבחירה הנכונה של המודל החייתי היא בסיסית להצלחת המחקר. לכן, המודל החייתי חייב להיות מאומת בשלושה היבטים עיקריים: i) תוקף הפנים, שבו המודל החייתי חייב להיות בעל המאפיינים של הפתולוגיה האנושית; ii) תוקף קונסטרוקטיבי, שבו למודל החי חייב להיות בסיס תיאורטי מוצק; ו-iii) תוקף חזוי, שבו מודלים של בעלי חיים חייבים להגיב לטיפולים באופן דומה לטיפול קליני.
נכון לעכשיו, מספר בעלי חיים משמשים כמודלים בעלי חיים עבור PD. הקבוצות העיקריות כוללות יונקים, כגון מכרסמים, פרימטים, מיניפיגים, כלבים וחתולים, וקבוצות אחרות כגון דרוזופילה ודגי זברה. מכרסמים הם המודל החייתי הקלאסי ביותר עבור PD ואת הנפוץ ביותר בשל קלות הטיפול והתחזוקה שלהם. בנוסף, האנטומיה והמנגנונים המולקולריים, התאיים והפרמקולוגיים של PD דומים במכרסמים ובבני אדם15.
סקירה שפורסמה על ידי Kin ועמיתיו בשנת 2019 ניתחה את המתודולוגיות העיקריות של מודל בעלי חיים ששימשו ל- PD בשנות ה -2000 ומצאה כי המודל החייתי הנפוץ ביותר כלל רעלנים עצביים כגון 6-הידרוקסידופאמין (6-OHDA) ו 1-מתיל-4-פניל-1,2,3,6-טטרהידרופירידין (MPTP). שני neurotoxins לגרום dysregulation מיטוכונדריאלי בתאי עצב דופאמין במסלול nigrostriatal, המוביל למוות תאים16. מודל נפוץ נוסף כרוך במניפולציה גנטית באמצעות מוטציה בגנים ספציפיים המעורבים בהתפרצות של PD, גרימת dysregulation mitochondrial17. מודלים Neurotoxin משמשים בדרך כלל כדי להעריך ולהשוות טיפולית, ואילו מודלים גנטיים משמשים כדי ללמוד את הפיתוח של טיפולים מונעים PD15 אידיופתי.
MPTP neurotoxin התגלה כגורם לפרקינסון באמצע שנות השמונים לאחר ששבעה חולים השתמשו בחומר והפגינו תסמיני PD חמורים. בנוסף לתסמינים, המטופלים הגיבו לטיפול בסדר גמור, מה שגרם לחוקרים לקשר את המולקולה ישירות ל- PD. לאחר שהמקרה פורסם בשנת 1986, מספר חוקרים החלו להשתמש ב- MPTP במחקר PD פרה-קליני18. חוקרים מצאו כי בהיותה מולקולה ליפופילית, MPTP יכול לחצות את מחסום הדם – מוח (BBB) ולהומר ל- MPP +19. חומר רעיל זה מצטבר בתוך נוירונים וגורם נזק מורכב 1 של שרשרת הנשימה המיטוכונדריאלי, המוביל למוות של נוירונים דופאמין20.
מודל הנוירוטוקסין 6-OHDA שימש לראשונה כדי לגרום לניוון של נוירונים מונואמין של המסלול nigrostriatal בשנת 196821. מודל 6-OHDA משמש בדרך כלל כדי לגרום ניוון עצבי במסלול nigrostriatal כפי שהוא דופמין אנלוגי רעיל עבור תאים המכילים קטכולאמין. לאחר 6-OHDA נכנס למוח, זה עשוי להילקח על ידי טרנספורטר דופמין (DAT) נוירונים דופאמין, המוביל ניוון של מסלול nigrostriatal22. מכיוון ש-6-OHDA אינו חודר ל-BBB, יש לתת אותו ישירות באמצעות הזרקה סטריאוטקית תוך-מוחית23. מעכב ספיגה חוזרת של נוראדרנלין משולב לעתים קרובות עם microinjection 6-OHDA כדי לשמר סיבים noradrenergic ולספק ניוון סלקטיבי יותר של נוירונים דופאמין24.
לאחר DAT תופס 6-OHDA, זה יצטבר בציטוסול של נוירונים, לייצר מינים חמצן תגובתי (ROS) ומוביל למוות תאים15. שלושה דגמי נגעים שונים של 6-OHDA משמשים לעתים קרובות: i) נגעים SNc25,26; ii) נגעים לסטריאטום27,28; ג. נגעים ל- MFB29,30. נגעים הנגרמים בסטריאטום גורמים לניוון איטי ומדרדר של נוירונים דופאמין ב- SNpc. לעומת זאת, נגעים הנגרמים ב- SNpc ו- MFB גורמים לניוון מהיר ומוחלט של נוירונים, מה שמוביל לתסמינים פרקינסון מתקדמים יותר31.
הזרקה חד-צדדית או דו-צדדית של 6-OHDA יכולה לגרום לניוון עצבי בתאי עצב דופאמין. 6-OHDA לא תמיד לגרום נזק חמור לנוירונים; לפעמים, ההזרקה גורמת לנזק חלקי, אשר משמש גם כדי לדמות את השלבים המוקדמים של PD32. ההזרקה החד-צדדית משמשת בדרך כלל בשל יכולתו של המודל להעריך את הליקויים המוטוריים של החיה ולחזות אובדן תאים באמצעות בדיקות כגון סיבוב המושרה באמפטמין/אפומורפין ומבחן הצעד29. זריקות דו-צדדיות משמשות ביותר להערכת זיכרון מרחבי וזיהוי33.
מבחן הסיבוב המושרה אמפטמין/אפומורפין הוא מבחן התנהגותי נפוץ לחזות אובדן תאים במסלול nigrostriatal. זה מוגדר כתהליך שבו ניהול חוזר ונשנה של אגוניסטים דופמין מוביל התעצמות של התנהגות סיבובית בבעלי חיים 6-OHDA-נגע34. התנהגות סיבובית מורכבת מכמת סיבוב סיבובי איפסילטרלי המושרה באמפטמין או מפניות קונטרלטרליות הנגרמות על ידי אפומורפין במכרסמים בעלי נגע חד-צדדי. התנהגות סיבובית הנגרמת על ידי סמים זכתה לביקורת מכיוון שהסבב אינו תואם לתסמיני PD בבני אדם ויכול להיות מושפע ממשתנים כגון סובלנות, רגישות ו”פרימינג”35.
פרימינג הוא אחד הגורמים הקריטיים ביותר במבחנים התנהגותיים אלה. כמה מקרים דווחו שבהם מנה אחת של בסדר גמור הובילה לכישלון בהתנהגויות סיבוביות36. בנוסף, גורם קריטי נוסף הקשור ליישום המשולב של הבדיקה המושרה אמפטמין ובדיקה הנגרמת על ידי אפומורפין לשימוש מקבילי הוא שהם מודדים נקודות קצה שונות בגלל מנגנוני פעולה שונים, המשקפים את ההשבתה של מנגנוני איתות ומסלולים שונים. יתר על כן, הבדיקה המושרה אמפטמין הוא מדויק יותר למדוד נגעים nigrostriatal מעל 50-60%, ואילו הבדיקה הנגרמת על ידי אפומורפין מדויקת יותר עבור נגעים מעל 80%37.
מבחן הצעדים התגלה כמבחן התנהגותי המצביע על ליקויים הקשורים ניוון נוירון דופאמין והשפעות טיפוליות. זה מאפשר ניתוח של אקנזיה הנגרמת על ידי נגע 6-OHDA בתאי עצב דופאמין ללא הליך הנגרמת על ידי סמים. יתר על כן, הבדיקה הוקמה היטב ובדרך כלל בשימוש מאז 1995, כאשר היא תוארה לראשונה על ידי Olsson et al.35. בשנת 1999, צ’אנג ואח ‘ 38 גם ניתח והשווה את הביצועים של חולדות במבחן הצעד עם רמת ניוון שנגרם על ידי 6-OHDA ומצא כי בעלי חיים שביצעו גרוע יותר במבחן הצעדה היה גם ניוון משמעותי יותר של נוירונים דופאמין.
מבחן הצעדה הוא שיטה מצוינת לחזות נזק nigrostriatal דופאמין חמור בחולדות נגע 6-OHDA. הראיות מצביעות על כך שהגירעונות המוטוריים מופיעים בקדמת הבמה הנגדית של עירוי 6-OHDA במהלך מבחן הצעדה כאשר מידת האובדן הדופאמין ב- SNc היא >90%39. מאמר זה מתאר את הפרוטוקולים, המתודולוגיות והחומרים המשמשים לביצוע ניתוח סטריאוטקסי לעירוי חד-צדדי של 6-OHDA ל- MFB של חולדות וכיצד לחזות את הנגעים הדופאמין הנגרמים על ידי הרעלן באמצעות מבחן הצעדה.
Protocol
Representative Results
Discussion
מאמר זה מתאר פרוטוקול לביצוע ניתוח למיקרו-עירום חד-צדדי של 6-OHDA ב- MFB, המסוגל לגרום לנגעים חזקים בתאי העצב של המסלול הניגרוסטריאטלי וליצור אקנזיה בחיה. כמו כן מתואר הפרוטוקול לביצוע מבחן הצעד, מבחן ישים בקלות ולא פולשני שניתן להשתמש בו כדי להוכיח את הצלחת הנגעים ולהעריך את אקנה קדמי. כפי שהו?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה על ידי קרן המחקר של סאו פאולו (FAPESP, מענק 2017/00003-0). אנו מודים על התיאום לשיפור אנשי ההשכלה הגבוהה (CAPES). אנו מודים לד”ר אנתוני ר. ווסט, ד”ר היינץ שטיינר וד”ר קואי י. טסנג על התמיכה והחונכות.
Materials
| 6-OHDA | Sigma Aldrich | H4381 | https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/h4381?lang=pt®ion=BR&cm_sp=Insite-_-caSrpResults_srpRecs_srpModel _6-ohda-_-srpRecs3-1 |
| 70% Alcohol | |||
| Ascorbic acid | Sigma Aldrich | 795437 | https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/795437?lang=pt®ion=BR&gclid= Cj0KCQjw4cOEBhDMARIsAA3XD RipyOnxOxkKAm3J1PxvIsvw09 _kfaS2jYcD9E5OyuHYr4n89kO 6yicaAot6EALw_wcB |
| Cotton | |||
| Drill or tap | |||
| Gauze | |||
| Hamilton syringe 50 uL | Hamilton | 80539 | https://www.hamiltoncompany.com/laboratory-products/syringes/80539 |
| Imipramine | Alfa Aeser | J63723 | https://www.alfa.com/pt/catalog/J63723/ |
| Infusion pump | Insight | EFF-311 | https://insightltda.com.br/produto/eff-311-bomba-de-infusao-2-seringas/ |
| Ketamine (Dopalen) | Ceva | https://www.ceva.com.br/Produtos/Lista-de-Produtos/DOPALEN | |
| Machine for trichotomy | |||
| Meloxicam (Maxicam 2% Ourofino) | Ourofino | https://terrazoo.com.br/produto/maxicam-injetavel-2-50ml-ouro-fino/ | |
| Metal Disposal | |||
| Paper towels | |||
| Pentabiotic | Zoetis | https://www.zoetis.com.br/pentabiotico-veterinario.aspx | |
| Plastic waste garbage can | |||
| Poly-antibiotic | Pentabiotic (Wealth) | ||
| Povidone-iodine | |||
| Scalpel and blades | |||
| Scissors | |||
| Scraper | |||
| Stereotaxic apparatus | Insight | EFF-331 | https://insightltda.com.br/produto/eff-331-estereotaxico-1-torre/ |
| Sterile saline solution | |||
| Swabs | |||
| Temperature probe | |||
| Timer | |||
| Tweezers | |||
| Xylazine (Anasedan) | Ceva | https://www.ceva.com.br/Produtos/Lista-de-Produtos/ANASEDAN |
References
- Gibb, W. R., Lees, A. J. The relevance of the Lewy body to the pathogenesis of idiopathic Parkinson’s disease. Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 51 (6), 745-752 (1988).
- Albin, R. L., Young, A. B., Penney, J. B. The functional anatomy of basal ganglia disorders. Trends in Neurosciences. 12 (10), 366-375 (1989).
- Dexter, D. T., Jenner, P. Parkinson disease: from pathology to molecular disease mechanisms. Free Radical Biology & Medicine. 62, 132-144 (2013).
- Obeso, J. A., et al. Functional organization of the basal ganglia: therapeutic implications for Parkinson’s disease. Movement Disorders. 23, 548-559 (2008).
- Tysnes, O. -. B., Storstein, A. Epidemiology of Parkinson’s disease. Journal of Neural Transmission. 124 (8), 901-905 (2017).
- Karachi, C., et al. Clinical and anatomical predictors for freezing of gait and falls after subthalamic deep brain stimulation in Parkinson’s disease patients. Parkinsonism & Related Disorders. 62, 91-97 (2019).
- Sudhakar, V., Richardson, R. M. Gene therapy for Parkinson’s disease. Progress in Neurological Surgery. 33, 253-264 (2018).
- Baizabal-Carvallo, J. F., et al. Combined pallidal and subthalamic nucleus deep brain stimulation in secondary dystonia-parkinsonism. Parkinsonism & Related Disorders. 19 (5), 566-568 (2013).
- Morizane, A. Cell therapy for Parkinson’s disease with induced pluripotent stem cells. Clinical Neurology. 59 (3), 119-124 (2019).
- Jankovic, J., Tan, E. K. Parkinson’s disease: etiopathogenesis and treatment. Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 91 (8), 795-808 (2020).
- Cenci, M. A., Whishaw, I. Q., Schallert, T. Animal models of neurological deficits: how relevant is the rat. Nature Reviws. Neuroscience. 3 (7), 574-579 (2002).
- Tronci, E., Francardo, V. Animal models of l-DOPA-induced dyskinesia: the 6-OHDA-lesioned rat and mouse. Journal of Neural Transmission. 125 (8), 1137-1144 (2018).
- Lane, E., Dunnett, S. Animal models of Parkinson’s disease and L-dopa induced dyskinesia: How close are we to the clinic. Psychopharmacology. 199 (3), 303-312 (2008).
- Meredith, G. E., Sonsalla, P. K., Chesselet, M. -. F. Animal models of Parkinson’s disease progression. Acta Neuropathologica. 115 (4), 385-398 (2008).
- Kin, K., Yasuhara, T., Kameda, M., Date, I. Animal models for Parkinson’s disease research: trends in the 2000s. International Journal of Molecular Sciences. 20 (21), 5402 (2019).
- Schober, A. Classic toxin-induced animal models of Parkinson’s disease: 6-OHDA and MPTP. Cell and Tissue Research. 318 (1), 215-224 (2004).
- Smith, G. A., Isacson, O., Dunnett, S. B. The search for genetic mouse models of prodromal Parkinson’s disease. Experimental Neurology. 237 (2), 267-273 (2012).
- Langston, J. W., Ballard, P., Tetrud, J. W., Irwin, I. Chronic Parkinsonism in humans due to a product of meperidine-analog synthesis. Science. 219 (4587), 979-980 (1983).
- Langston, J. W., Irwin, I., Langston, E. B., Forno, L. S. 1-Methyl-4-phenylpyridinium ion (MPP+): identification of a metabolite of MPTP, a toxin selective to the substantia nigra. Neuroscience Letters. 48 (1), 87-92 (1984).
- Ramsay, R. R., Salach, J. I., Singer, T. P. Uptake of the neurotoxin 1-methyl-4-phenylpyridine (MPP+) by mitochondria and its relation to the inhibition of the mitochondrial oxidation of NAD+-linked substrates by MPP+. Biochemical and Biophysical Research Communications. 134 (2), 743-748 (1986).
- Ungerstedt, U. 6-Hydroxy-dopamine induced degeneration of central monoamine neurons. European Journal of Pharmacology. 5 (1), 107-110 (1968).
- Blandini, F., Armentero, M. -. T. Animal models of Parkinson’s disease. FEBS Journal. 279 (7), 1156-1166 (2012).
- McDowell, K., Chesselet, M. -. F. Animal models of the non-motor features of Parkinson’s disease. Neurobiology of Disease. 46 (3), 597-606 (2012).
- Luthman, J., Fredriksson, A., Sundström, E., Jonsson, G., Archer, T. Selective lesion of central dopamine or noradrenaline neuron systems in the neonatal rat: motor behavior and monoamine alterations at adult stage. Behavioural Brain Research. 33 (3), 267-277 (1989).
- Casarrubea, M., et al. Effects of Substantia Nigra pars compacta lesion on the behavioral sequencing in the 6-OHDA model of Parkinson’s disease. Behavioural Brain Research. 362, 28-35 (2019).
- Wang, R., Shao, M. L-DOPA-elicited abnormal involuntary movements in the rats damaged severely in substantia nigra by 6-hydroxydopamine. Annals of Palliative Medicine. 9 (3), 947-956 (2020).
- Hernandez-Baltazar, D., Mendoza-Garrido, M. E., Martinez-Fong, D. Activation of GSK-3β and caspase-3 occurs in Nigral dopamine neurons during the development of apoptosis activated by a striatal injection of 6-hydroxydopamine. PLoS One. 8 (8), 70951 (2013).
- Bagga, V., Dunnett, S. B., Fricker, R. A. The 6-OHDA mouse model of Parkinson’s disease – Terminal striatal lesions provide a superior measure of neuronal loss and replacement than median forebrain bundle lesions. Behavioural Brain Research. 288, 107-117 (2015).
- Iancu, R., Mohapel, P., Brundin, P., Paul, G. Behavioral characterization of a unilateral 6-OHDA-lesion model of Parkinson’s disease in mice. Behavioural Brain Research. 162 (1), 1-10 (2005).
- Boix, J., Padel, T., Paul, G. A partial lesion model of Parkinson’s disease in mice – Characterization of a 6-OHDA-induced medial forebrain bundle lesion. Behavioural Brain Research. 284, 196-206 (2015).
- Blesa, J., Phani, S., Jackson-Lewis, V., Przedborski, S. Classic and new animal models of Parkinson’s disease. Journal of Biomedicine & Biotechnology. 2012, 845618 (2012).
- Breit, S., et al. Effects of 6-hydroxydopamine-induced severe or partial lesion of the nigrostriatal pathway on the neuronal activity of pallido-subthalamic network in the rat. Experimental Neurology. 205 (1), 36-47 (2007).
- More, S. V., Kumar, H., Cho, D. -. Y., Yun, Y. -. S., Choi, D. -. K. Toxin-induced experimental models of learning and memory impairment. International Journal of Molecular Sciences. 17 (9), 1447 (2016).
- Schwarting, R. K. W., Huston, J. P. The unilateral 6-hydroxydopamine lesion model in behavioral brain research. Analysis of functional deficits, recovery and treatments. Progress in Neurobiology. 50 (2-3), 275-331 (1996).
- Olsson, M., Nikkhah, G., Bentlage, C., Björklund, A. Forelimb akinesia in the rat Parkinson model: differential effects of dopamine agonists and nigral transplants as assessed by a new stepping test. Journal of Neuroscience. 15 (5), 3863-3875 (1995).
- Lindgren, H. S., Rylander, D., Ohlin, K. E., Lundblad, M., Cenci, M. A. The ‘motor complication syndrome’ in rats with 6-OHDA lesions treated chronically with l-DOPA: Relation to dose and route of administration. Behavioural Brain Research. 177 (1), 150-159 (2007).
- Björklund, A., Dunnett, S. B. The amphetamine induced rotation test: A re-assessment of its use as a tool to monitor motor impairment and functional recovery in rodent models of Parkinson’s disease. Journal of Parkinson’s Disease. 9 (1), 17-29 (2019).
- Chang, J. W., Wachtel, S. R., Young, D., Kang, U. J. Biochemical and anatomical characterization of forepaw adjusting steps in rat models of Parkinson’s disease: studies on medial forebrain bundle and striatal lesions. 신경과학. 88 (2), 617-628 (1999).
- Jayasinghe, V. R., Flores-Barrera, E., West, A. R., Tseng, K. Y. Frequency-dependent corticostriatal disinhibition resulting from chronic dopamine depletion: role of local striatal cGMP and GABA-AR signaling. Cerebral Cortex. 27 (1), 625-634 (2017).
- Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury. Neuropharmacology. 39 (5), 777-787 (2000).
- Paxinos, G., Watson, C. . The rat brain in stereotaxic coordinates. , (2006).
- Padovan-Neto, F. E., et al. Selective regulation of 5-HT1B serotonin receptor expression in the striatum by dopamine depletion and repeated L-DOPA treatment: relationship to L-DOPA-induced dyskinesias. Molecular Neurobiology. 57 (2), 736-751 (2020).
- Prasad, E. M., Hung, S. -. Y. Behavioral tests in neurotoxin-induced aAnimal models of Parkinson’s disease. Antioxidants. 9 (10), 1007 (2020).
- Lundblad, M., Picconi, B., Lindgren, H., Cenci, M. A. A model of L-DOPA-induced dyskinesia in 6-hydroxydopamine lesioned mice: Relation to motor and cellular parameters of nigrostriatal function. Neurobiology of Disease. 16 (1), 110-123 (2004).
- Masini, D., et al. A guide to the generation of a 6-hydroxydopamine mouse model of Parkinson’s disease for the study of non-motor symptoms. Biomedicines. 9 (6), 598 (2021).
- Francardo, V., et al. Impact of the lesion procedure on the profiles of motor impairment and molecular responsiveness to L-DOPA in the 6-hydroxydopamine mouse model of Parkinson’s disease. Neurobiology of Disease. 42 (3), 327-340 (2011).
- Thiele, S. L., Warre, R., Nash, J. E. Development of a unilaterally-lesioned 6-OHDA mouse model of Parkinson’s disease. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (60), e3234 (2012).
- Fish, R., Danneman, P., Brown, M., Karas, A. . Anesthesia and Analgesia in Laboratory Animals. , (2008).
- Buitrago, S., Martin, T. E., Tetens-Woodring, J., Belicha-Villanueva, A., Wilding, G. E. Safety and efficacy of various combinations of injectable anesthetics in BALB/c mice. Journal of the American Association for Laboratory Animal Sciences. 47 (1), 11-17 (2008).
- Struck, M. B., Andrutis, K. A., Ramirez, H. E., Battles, A. H. Effect of a short-term fast on ketamine-xylazine anesthesia in rats. Journal of the American Association for Laboratory Animal Sciences. 50 (3), 344-348 (2011).
- Jiron, J. M., et al. Comparison of isoflurane, ketamine-dexmedetomidine, and ketamine-xylazine for general anesthesia during oral procedures in rice rats (Oryzomys palustris). Journal of the American Association for Laboratory Animal Sciences. 58 (1), 40-49 (2019).
