Um Método Simples Modificado para Indução de Infarto do Miocárdio em Camundongos
Summary
Sob anestesia adequada, o coração de camundongo foi exteriorizado através do espaço intercostal, e o infarto do miocárdio foi induzido com sucesso pela ligadura da artéria descendente anterior (DA) usando materiais prontamente disponíveis na maioria dos laboratórios.
Abstract
O infarto do miocárdio (IAM) representa uma das principais causas de morte. Os modelos de IM são amplamente utilizados para investigar os patomecanismos do remodelamento pós-IM e avaliação de novas terapêuticas. Diferentes métodos (por exemplo, tratamento com isoproterenol, criolesão, ligadura da artéria coronária, etc.) têm sido usados para induzir o infarto agudo do miocárdio. No entanto, os métodos tradicionais de ligadura coronária em camundongos são tecnicamente desafiadores. O presente estudo descreve um processo simples e eficiente para indução de IM em camundongos com materiais prontamente disponíveis. A pele do tórax de camundongos foi aberta sob anestesia estável. O coração foi imediatamente exteriorizado através do espaço intercostal após separação romba do peitoral maior e peitoral menor. O ramo descendente anterior (DA) esquerdo foi ligado com sutura 6-0 a 3 mm de sua origem. Após a ligadura da DAD, a coloração com cloreto de 2,3,5-trifeniltetrazólio (TTC) indicou indução bem-sucedida de IM e mudanças temporais do tamanho da cicatriz pós-IM. Enquanto isso, os resultados da análise de sobrevida mostraram mortalidade evidente dentro de 7 dias após o IAM, principalmente devido à ruptura cardíaca. Além disso, a avaliação ecocardiográfica pós-IM demonstrou indução bem-sucedida de disfunção contrátil e remodelamento ventricular. Uma vez dominado, um modelo MI pode ser estabelecido em camundongos dentro de 2-3 min com materiais prontamente disponíveis.
Introduction
O infarto do miocárdio (IAM) representa uma das principais causas de morte e incapacidade no mundo1,2,3,4,5. Apesar da reperfusão oportuna, atualmente há uma falta de terapias eficazes para tratar o remodelamento cardíaco pós-IM. Correspondentemente, esforços consideráveis têm sido feitos para a exploração mecanicista e terapêutica para a IM 6,7,8. Vale ressaltar que o estabelecimento de modelos de MI é um pré-requisito para atender a esses fins.
Vários métodos (por exemplo, tratamento com isoproterenol, criolesão, ligadura da artéria coronária, etc.) têm sido propostos para induzir modelos de IM em pequenos animais. O tratamento com isoproterenol é um método simples para indução de IM, mas não pode induzir infarto da área-alvo9. A criolesão leva à necrose miocárdica através da geração de cristais de gelo e ruptura da membrana celular, em vez de isquemia direta10. Por outro lado, a ligadura da artéria coronária permite o controle preciso do local de oclusão e da extensão da área de infarto e recapitula fielmente a resposta de remodelamento após o infarto11,12. A ligadura da artéria coronária é tipicamente realizada após intubação, ventilação mecânica e toracotomia, o que é tecnicamente desafiador13,14. Vários protocolos modificados para ligadura arterial coronariana (por exemplo, ventilação livre) foram relatados e potencializaram a indução de IM, mas faltam demonstrações visuais detalhadas15,16,17. Essas questões representam uma barreira financeira e técnica significativa para grupos que desejam se envolver em pesquisas usando modelos de MI. Este relato apresenta uma abordagem para indução de IM em camundongos. O método atual é fácil, rápido e utiliza ferramentas e equipamentos cirúrgicos encontrados prontamente na maioria dos laboratórios.
Protocol
Representative Results
Discussion
O presente relato demonstrou um protocolo fácil para indução de IM em camundongos com materiais prontamente disponíveis, que foi modificado a partir de um método relatado por Gao16. Modelos murinos de IM são indispensáveis para exploração mecanística e triagem de fármacos para disfunção e remodelamento pós-IAM12. Dentre as técnicas existentes para indução de IM, a ligadura da artéria coronária representa a mais praticada. A ligadura da artéria coronária…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho foi apoiado por subsídios da Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (81930007, 81625002, 81800307, 81470389, 81500221, 81770238), do Programa de Líderes Acadêmicos Excepcionais de Xangai (18XD1402400), da Comissão de Ciência e Tecnologia do Município de Xangai (201409005200), do Programa de Talentos de Xangai Pujiang (2020PJD030) e da Fundação de Ciência Pós-Doutoral da China (2020M671161, BX20190216).
Materials
| 2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride | SIGMA | T8877-25G | TTC staining |
| 4-0 silk suture | YUANKANG | 4-0 | Surgical instrument |
| Autoclave | HIRAYAMA | HVE-50 | Sterilization for the solid |
| Buprenorphine | Qinghai Pharmaceutical FACTORY Co., Ltd. | H10940181 | reduce post-operative pain |
| Centrifugation tube | Biological Hope | 1850-K | 15ML |
| Depilatory cream | ZIKER BIOTECHNOLOGY | ZK-L2701 | Depilation agent for laboratory animals |
| Forcep | RWD | F12028 | Surgical instrument |
| Gas filter | ZHAOXIN | SA-493 | Operator protection |
| Isoflurane | RWD | 20071302 | Used for anesthesia |
| Light source | Beijing PDV | LG-150B | Operating lamp |
| Micro-mosquito hemostat | FST | 13011-12 | Surgical instrument |
| Needle | BINXIONG | 42180104 | Surgical instrument |
| Needle and the 6-0 silk suture | JIAHE | SC086 | Surgical instrument |
| Needle holder | ShangHaiJZ | J32030 | Surgical instrument |
| Needle holder | ShangHaiJZ | J32010 | Surgical instrument |
| Povidone-iodine swabs | SingleLady | GB26368-2010 | Skin disinfection |
| Scissors | CNSTRONG | JYJ1030 | Surgical instrument |
| Sterile eye cream | Shenyang Xingqi Pharmaceutical Co., Ltd. | H10940177 | prevent corneal dryness |
| Ultra-high resolution ultrasound imaging system for small animals | VisualSonics | Vevo 2100 | Echocardiographic analysis |
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