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방법 논문

돼지 췌장 이식을 위한 수술 요령과 요령

2.6K 조회수

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DOI:

10.3791/64203

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2022년 7월 20일

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이 논문에서

요약

비디오 기사는 돼지 3일 생존 모델에서 췌장 절제술 및 췌장 동종 이식 기술을 요약하고 방법에 대한 단계별 설명과 불안정하고 섬세한 돼지 내장 해부학을 다루기 위한 수술 요령 및 요령에 중점을 둡니다.

초록

제1형 당뇨병 및 대사 증후군에서 췌장 이식의 유망한 결과에도 불구하고 이 최첨단 기술에 대한 가장 큰 우려는 이식에 적합한 것으로 간주되는 장기의 부족입니다. 높은 혈관 내 저항, 섬세한 실질내 모세혈관 골격 및 장간막 혈관 주위의 복잡한 소엽 해부학은 이 기관을 간 및 신장과 같은 기관에 비해 손상에 더 취약하고 사소한 외상에 덜 관대하게 만듭니다. 꼼꼼한 외과적 해부와 신중한 조직 취급은 췌장 이식의 전체 운동의 초석을 형성합니다. 인체 해부학과 비교할 때 돼지 췌장의 해부학적 구조와 주변 장간막 혈관 및 장기 사이의 형태학적 유사성으로 인해 돼지 모델에서 기술을 시연하면 이를 인간 환경에 가장 정확하게 외삽하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기사는 돼지 3일 생존 모델에서 이 매우 민감한 장기의 이식 성공률을 높이기 위해 따라야 하는 필수 수술 팁과 요령을 간략하게 설명하는 것을 목표로 합니다.

서론

지난 수십 년 동안 수술 전후 관리 전략과 수술 기법이 크게 발전하여 췌장 이식이 말기 신장 질환(일반적으로 신장 이식과 함께)이 있는 당뇨병 치료를 위한 가장 유망한 전략 중 하나로 발전했습니다.1 . 그러나 이식편 췌장염, 허혈 재관류 손상 및 혈관 혈전증과 같은 합병증은 성공적인 결과를 보장하기 위해 극복해야 할 가장 큰 과제로 남아 있으며, 더 손상된 확장 기준 이식편에서 더욱 그렇습니다2. 또한, 췌장 이식편은 조달 과정에서 가장 일반적으로 폐기되는 이식편이며 모든 장기에 대해 이용률이 가장 낮습니다(9%). 따라서 기계 관류는 간, 신장 및 폐 이식에서 달성된 것과 유사한 이식편 이용률을 높이는 것을 목표로 췌장 이식편에 최적의 항상성 환경을 제공하는 것을 목표로 합니다4. 돼지 췌장 해부학은 소엽 구조(3개의 엽으로 구성), 장간막-문맥 축 주변의 확장, 장간막 혈관 변이(40%-50%), 십이지장5의 C 루프를 따라 있는 섬세한 혈관 채널 측면에서 복잡합니다. 이러한 해부학적 특성은 췌장-십이지장 이식편 회수와 수용자 췌장 절제술 모두에서 의원성 췌장 당뇨병 상태, ....

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프로토콜

이 프로토콜은 토론토 종합 연구 기관의 동물 관리위원회로부터 윤리적 승인을 받았습니다. 동물들은 캐나다 온타리오 주 국립 보건원 (NIH)의 국립 의학 연구 협회 (National Society of Medical Research) 및 실험실 동물 관리 가이드 (Guide for the care of laboratory animals)에 따라 인도적 보살핌을 받았습니다. 이 연구에서는 체중이 40-50kg인 15주령의 혈연 관계가 없는 요크셔 수컷 돼지를 사용했습니다.

참고: 연구의 전체 프로토콜은 다음과 같은 주요 단계로 나뉩니다: (i) 장기 회수 및 백테이블 준비; (ii) 수혜자 전체 췌장 절제술 및 (iii) 이식 이식. 기증자와 수혜자의 전체 수술은 1 일 안에 완료됩니다.

1. 기증자 장기 회수 및 백테이블 준비

참고: 장기 적출 방법은 별도의 프로토콜6에 설명되어 있습니다. 그러나 프로토콜은 수술 기술(기증자 수술과 관련된 수술 팁)과 관련된 몇 가지 추가 요점과 함께 여기에 간단히 설명되어 있습니다.

  1. 간단히 말해서, 기증자 돼지를 마취하고....

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결과

5가지 췌장 이식 생존 모델의 수술 전후 및 수술 후 최대 3일의 생화학적 매개변수가 아래에 요약되어 있습니다(연대순으로 PTX 1에서 5로 번호가 매겨짐). 총 5건의 췌장 이식 중 모두 3일의 생존 기간 동안 잘 지냈으며, 이는 전반적인 건강 상태와 췌장 손상 및 내분비 기능 검사에서 알 수 있습니다. 아래에 묘사된 결과는 이식편의 정적 냉장 보관 후 췌장 동종 이식에 이어 수용자 췌장 절제술의 3일 생존 모델의 경험을 나타냅니다.

췌장 절제술의 평균 수술 시간은 52분(45-64분)이었습니다. 이것은 뇌사 심장 박동 모델이었기 때문에 기증자에게는 수축기 온난 허혈 단계가 없었습니다. 측면 교합 카바 클램프를 적용한 후 이식편의 재관류까지의 평균 수혜자 온난 허혈 시간은 49.5분(40-55분)이었습니다. 5개의 이식편 모두 연구 프로토콜에 따라 5시간(300분)의 저온 허혈 시간을 가졌습니다. 모든 동물은 하루에 두 번 300mg Syp 사이클로스포린 형태로 면역 억제를 받.......

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토론

현재 프로토콜은 돼지 모델에서 췌장 절제술 및 췌장 동종 이식의 기술과 타당성을 입증하기 위해 수행되었습니다. 동물을 이식 후 3일 동안 관찰하여 췌장 절제술 및 동종 이식 기술의 신뢰성을 입증했습니다. 모든 동물을 항생제, 수액, 진통제, 보충 영양 및 면역억제제(즉, 사이클로스포린)의 표준화된 동물 관리 프로토콜을 사용하여 수술 후 3일 동안 모니터링하고 간호했습니다. 그들은 수술 후 3일째(임상적 악화로 인해 요구되는 경우 72시간 또는 그 이전)에 윤리적으로 승인된 인도적 기술에 의해 희생되었습니다. 꼬리, 코퍼스, 머리 및 십이지장에서 생검을 채취하여 조직병리학적 분석을 위해 보냈고, 나머지 절편은 RNA 분리 완충액에 보관하고 나중에 사용하기 위해 급속 냉동(-80°C)했습니다.

췌장 절제술에 의한 돼지 모델에서 의원 성 당뇨병의 유도를 성공적으로 입증하려는 최초의 시도 중 하나는 Chaiba et al. 2011 년 체중 27-33kg의 백인 수컷 돼지 10 마리 코.......

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공개 사항

저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
Belzer UW 냉장 보관 솔루션Bridge to life Ltd(미국 사우스캐롤라이나주 컬럼비아)4055
글루콘산칼슘(10%)Fresenius Kabi Canada Ltd(온타리오주 토론토)C360019
Composelect(채혈 백)Fresenius Kabi Canada Ltd(온타리오주 토론토)PQ31555
헤파린(10000IU/10ml)Fresenius Kabi Canada Ltd(온타리오주 토론토)C504710
수유 링어스Baxter (Mississauga, ON, Canada)JB2324
Percutaneous Sheath Introducer Set with Integral Hemostasis Valve/side Port for use with 7-7.5 Fr Catheters Arrow International LLCSI-09880
중탄산나트륨 (8.4%)Fresenius Kabi Canada Ltd (토론토, 온타리오)C908950
Solu-MedrolPfizer Canada Inc. 52246-14-2
외과 retreival 및 이식 기구 세트

참고문헌

  1. Gruessner, R. W., Gruessner, A. C. The current state of pancreas transplantation. Nature Reviews. Endocrinology. 9 (9), 555-562 (2013).
  2. Redfield, R. R., Rickels, M. R., Naji, A., Odorico, J. S. Pancreas transplantation in the modern era. Gastroenterology Clinics of North Amer....

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