सेक्स हार्मोन उत्पादन को कम करने के लिए मुराइन ऑर्किक्टॉमी और ओवरीक्टॉमी
Summary
यह पांडुलिपि जीवित कृंतक ऑर्किक्टॉमी और अंडाशय को जल्दी से करने के लिए एक सुसंगत तरीके का वर्णन करती है।
Abstract
सेक्स हार्मोन सिग्नलिंग कई अंग प्रणालियों के साथ-साथ न्यूरोडीजेनेरेटिव बीमारी सहित विभिन्न बीमारियों की प्रगति में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। मुराइन मॉडल सिस्टम में सेक्स हार्मोन के स्तर में हेरफेर अंगों / ऊतकों पर और रोग की प्रगति के भीतर उनके प्रभाव के अध्ययन की अनुमति देता है। ऑर्किक्टॉमी – वृषण का सर्जिकल निष्कासन – और अंडाशय – अंडाशय का सर्जिकल निष्कासन – अंतर्जात सेक्स हार्मोन को कम करने के लिए एक विधि प्रदान करता है ताकि दवा या अन्य वितरण विधियों के माध्यम से सटीक हार्मोन का स्तर प्रदान किया जा सके। यहां, हम सेक्स हार्मोन की कमी के लिए मुराइन मॉडल सिस्टम में ऑर्किक्टॉमी और ओवरीक्टॉमी दोनों के लिए तेजी से और न्यूनतम इनवेसिव तरीके प्रदान करते हैं। यह प्रोटोकॉल अंडकोश थैली के माध्यम से वृषण की शल्य चिकित्सा तैयारी और छांटने का विवरण देता है, और दाएं और बाएं पार्श्व डोरसम में दो चीरों के माध्यम से अंडाशय का छांटना है।
Introduction
वृषण और अंडाशय सेक्स हार्मोन उत्पादन के लिए जिम्मेदार प्राथमिक अंग हैं। टेस्टोस्टेरोन और एस्ट्रोजन के उत्पादन के लिए अग्रणी हार्मोनल संचार का कैस्केड एक अच्छी तरह से विशेषता वाली प्रक्रिया है जो हाइपोथैलेमस में गोनाडोट्रोपिन-रिलीजिंग हार्मोन (जीएनआरएच) 1 की रिहाई के साथ शुरू होती है। जीएनआरएच की रिहाई पिट्यूटरी ग्रंथि से ल्यूटिनाइजिंग हार्मोन (एलएच) और कूप-उत्तेजक हार्मोन (एफएसएच) की रिहाई का कारण बनती है। जैसे ही ये हार्मोन रक्तप्रवाह में प्रवेश करते हैं, वे फिर शरीर के अन्य ऊतकों को प्रभावित करते हैं। एलएच का प्राथमिक लक्ष्य वृषण (पुरुषों में) और अंडाशय (महिलाओं में) 2 है। एलएच के जवाब में, वृषण टेस्टोस्टेरोन3 का उत्पादन और रिलीज करते हैं। इसी तरह, अंडाशय एस्ट्रोजन4 का उत्पादन करते हैं। जबकि इन हार्मोनों के इच्छित प्रभाव निषेचन के लिए कोशिकाओं और शरीर को तैयार करने और एक कार्यशील प्रजनन प्रणाली सुनिश्चित करने के लिए हैं, कई अन्य शारीरिक प्रणालियां प्रभावित हो सकती हैं।
सेक्स हार्मोन को कई शारीरिक कार्यों से जोड़ा गया है। उदाहरण के लिए, एस्ट्रोजन ओस्टियोक्लास्ट द्वारा हड्डी के पुनरुत्थान को रोककर हड्डी होमियोस्टैसिस को बनाए रखने में मदद करता है। इस कारण से, अंडाशय युक्त माउस मॉडल का उपयोग ऑस्टियोपोरोसिस 5,6,7 जैसे हड्डी रोगों के शरीर विज्ञान का अध्ययन करने के लिए किया जा सकता है। टेस्टोस्टेरोन और एस्ट्रोजन भी कई कार्डियोवैस्कुलर और न्यूरोडीजेनेरेटिव बीमारियों के लिए अनुसंधान लक्ष्य हैं। हाल ही में, उच्च वसा वाले आहार के साथ युग्मित ऊंचा टेस्टोस्टेरोन उत्पादन संवहनी ऑक्सीडेटिव तनाव8 से जुड़ा हुआ है। मस्तिष्क में, अंडाशय के बाद एलएच में परिवर्तन नेस्थानिक स्मृति में परिवर्तन का कारण बना है। अंडाशय के बाद एस्ट्रोजेन की कमी हिप्पोकैम्पस में कोशिका मृत्यु का अध्ययन करने के लिए एक मॉडल प्रणाली भी बन गई है, क्योंकि यह एपोप्टोसिस को प्रेरित कर सकती है, जिसके परिणामस्वरूप स्मृति की कमी10 हो सकती है। टेस्टोस्टेरोन ने किडनी प्रत्यारोपण के बाद माउस मॉडल और मनुष्यों दोनों में गुर्दे के विकास में भी भूमिका निभाईहै।
एक हार्मोन-वंचित मुराइन मॉडल का निर्माण विभिन्न बीमारियों या ऊतकों पर सेक्स हार्मोन और उनके हार्मोन कैस्केड के अध्ययन की अनुमति देता है। यह वृषण (ऑर्किक्टोमी) या अंडाशय (अंडाशय) के शल्य चिकित्सा हटाने से पूरा किया जा सकता है। यह प्रक्रिया किसी भी तनाव के चूहों में की जा सकती है जब वे वीनिंग उम्र (इक्कीस दिन) या किसी भी वयस्क उम्र के रूप में युवा होते हैं। अंडाशय मादा चूहों में किया जाता है, जबकि ऑर्किक्टॉमी पुरुष चूहों में किया जाता है। इन अंगों को हटाकर, एस्ट्रोजन और टेस्टोस्टेरोन के स्तर, और उनके कई डेरिवेटिव, जैसे प्रोजेस्टेरोन,12,13 को बहुत कम किया जा सकता है। चूहों में ऑर्किक्टोमी या अंडाशय करने की प्रक्रिया उचित तकनीक के साथ तेजी से और न्यूनतम आक्रामक हो सकती है। एक सुरक्षित और कुशल तरीके से इन अंगों का तेजी से छांटना सही तरीके से प्रदर्शन करने पर 100% जीवित रहने की दर के साथ माउस संख्या को न्यूनतम रखते हुए त्वरित शल्य चिकित्सा प्रसंस्करण की अनुमति दे सकता है। यहां, हम वृषण और अंडाशय के तेजी से छांटने के लिए एक प्रोटोकॉल का विस्तार करते हैं और शोधकर्ताओं को इस सर्जरी को जल्दी और सुरक्षित रूप से करने में सक्षम बनाने के लिए उचित पोस्ट-सर्जिकल निगरानी का प्रदर्शन करते हैं। हम इस प्रक्रिया को करते समय सर्जन को शारीरिक स्थलों के साथ प्रदान करने के लिए सेक्स अंगों और आसपास के ऊतकों के दृश्य उदाहरण भी शामिल करते हैं।
Protocol
Representative Results
Discussion
वृषण और अंडाशय के सर्जिकल निष्कासन नियंत्रित हार्मोन अभाव के तहत मुराइन फिजियोलॉजी का अध्ययन करने की अनुमति देता है। यह तकनीक विज्ञान के कई क्षेत्रों के लिए महत्वपूर्ण है, जिसमें न्यूरोडीजेनेरेशन, ख…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम सर्जिकल प्रशिक्षण और प्रोटोकॉल समीक्षा में उनकी मदद के लिए टेक्सास साउथवेस्टर्न मेडिकल सेंटर पशु संसाधन केंद्र विश्वविद्यालय को धन्यवाद देते हैं। हम उनकी अमूल्य सहायता के लिए वर्ट लैब सहायता टीम को धन्यवाद देते हैं। इस काम को राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान (एनआईएच P30EY030413) से धन द्वारा समर्थित किया गया है। Biorender.com उपयोग कार्टून स्केमैटिक्स के निर्माण के लिए किया गया था।
Materials
| 1mL Syringe | BD | 309659 | |
| 30G 1/2" Needle | BD | 305106 | |
| AutoClip System | Fine Science Tools | 12020-00 | |
| Betadine Solution | Fisher Scientific | NC0158124 | |
| Cotton-Tipped Applicators | Fisher Scientific | 10-000-692 | |
| Double -ended Micro Spatula | Fine Science Tools | 10091-12 | |
| Galilean Loupes | Fine Science Tools | 28050-30 | Optional, can provide better clarity during procedure |
| Gauze Sponges, 4"x4" | Fisher Scientific | 13-761-52 | |
| Graefe Forceps | Fine Science Tools | 11150-10 | |
| High Temp Cautery Kit | Fine Science Tools | 18010-00 | Using the fine tip attachment |
| Needle Holders | Fine Science Tools | 12001-13 | |
| PGA Absorbable Suture:4-0 / NFS-2 Reverse Cutting 19MM / 30 IN | Covetrus | 29242 | 4-0 or 5-0 Absorbable sutures are best |
| Rodent Warming pad | Kent Scientific | RT-0515 | |
| Sterile Alcohol Prep Pads | Fisher Scientific | 22-363-750 | |
| Straight Locking Micro Needle Holders | Fine Science Tools | 12060-01 | |
| Surgical Scissors | Fine Science Tools | 140-60-09 | |
| Vannas Spring Scissors – 2.5mm Cutting Edge | Fine Science Tools | 15000-08 | |
| Veet Sensitive Hair Remover Gel Cream | Amazon | N/A | |
| Wahl Professional Animal Compact Trimmer and Grooming Kit, Blue | Amazon | #9861-900 |
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