चूहों में टिबियल न्यूरोमा ट्रांसपोज़ेशन मॉडल में सर्जरी और व्यवहार परीक्षण
Summary
यह प्रोटोकॉल टिबियल न्यूरोमा ट्रांसपोज़ेशन मॉडल का वर्णन करता है, जो टिबियल तंत्रिका के घाव को उपचर्म प्रीटिबियल या पार्श्व स्थिति की ओर समीपस्थ तंत्रिका छोर के बाद के संक्रमण के साथ शामिल करता है। वॉन फ्रे मोनोफिलामेंट्स का उपयोग करके न्यूरोमा दर्द और प्लांटर हाइपरलेजेसिया का व्यवहार परीक्षण निर्धारित किया जाता है।
Abstract
टिबियल न्यूरोमा ट्रांसपोज़ेशन (टीएनटी) एक चूहा मॉडल है जिसमें न्यूरोमा साइट (टिबियल तंत्रिका) पर एलोडोनिया का स्वतंत्र रूप से मूल्यांकन किया जा सकता है। यह टीएनटी मॉडल न्यूरोमा दर्द के लिए उपचारों का परीक्षण करने के लिए उपयुक्त है, जैसे कि कुछ सर्जिकल उपचारों की संभावित श्रेष्ठता जो पहले से ही क्लिनिक में उपयोग की जाती हैं, या नई दवाओं का मूल्यांकन करने और एक ही जानवर में दोनों दर्द के तौर-तरीकों पर उनके प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए। इस मॉडल में, टिबियल तंत्रिका में एक डिस्टल घाव (न्यूरोटमेसिस) बनाया जाता है, और समीपस्थ तंत्रिका छोर को 15 ग्राम वॉन फ्रे मोनोफिलामेंट के साथ न्यूरोमा साइट के आकलन को सक्षम करने के लिए चमड़े के नीचे और प्रीटिबियल रूप से बदल दिया जाता है और तय किया जाता है। सुरल तंत्रिका पर एलोडोनिया का आकलन करने के लिए, वॉन फ्रे मोनोफिलामेंट्स का उपयोग पिछले पंजे के प्लांटर पार्श्व क्षेत्र पर अप-डाउन विधि के माध्यम से किया जा सकता है। टिबियल तंत्रिका को काटने के बाद, सर्जरी के बाद 1 सप्ताह के भीतर न्यूरोमा साइट पर यांत्रिक अतिसंवेदनशीलता विकसित होती है और सर्जरी के बाद कम से कम 12 सप्ताह तक बनी रहती है। विपरीत अंग की तुलना में सर्जरी के बाद 3 सप्ताह के भीतर सुरल इनरवेट प्लांटर सतह पर एलोडोनिया विकसित होता है। 12 सप्ताह में, एक न्यूरोमा कटे हुए टिबियल तंत्रिका के समीपस्थ छोर पर बनता है, जो फैलाव और अक्षतंतु के घूमने से संकेत मिलता है। टीएनटी मॉडल सर्जरी के लिए, कई महत्वपूर्ण (सूक्ष्म) सर्जिकल चरणों का पालन करने की आवश्यकता होती है, और टर्मिनल संज्ञाहरण के तहत कुछ सर्जरी अभ्यास की सलाह दी जाती है। अन्य न्यूरोपैथिक दर्द मॉडल की तुलना में, जैसे कि बख्शे गए तंत्रिका चोट मॉडल, न्यूरोमा साइट पर एलोडोनिया को टीएनटी मॉडल में सुरल तंत्रिका अतिसंवेदनशीलता से स्वतंत्र रूप से परीक्षण किया जा सकता है। हालांकि, न्यूरोमा साइट का परीक्षण केवल चूहों में किया जा सकता है, चूहों में नहीं। इस प्रोटोकॉल में प्रदान की गई युक्तियां और निर्देश दर्द पर काम करने वाले अनुसंधान समूहों को अपनी सुविधा में टीएनटी मॉडल को सफलतापूर्वक लागू करने में मदद कर सकते हैं।
Introduction
प्रत्येक घाव, साधारण घावों से लेकर पूरे अंग विच्छेदन तक, परिधीय तंत्रिका चोट की अलग-अलग डिग्री के साथ होता है। इस तरह की तंत्रिका चोट के परिणामस्वरूप एक न्यूरोमा का निर्माण हो सकता है, जो अंकुरित तंत्रिका तंतुओं का एक अव्यवस्थित उलझाव है। न्यूरोमा 8% -30% रोगियों में दर्दनाक हो जाता है, जिससे उनके जीवन की गुणवत्ता 1,2,3,4,5 गंभीर रूप से प्रभावित होती है। अंग विच्छेदन के बाद, 6,7,8 के 50% रोगियों में न्यूरोमा दर्द विकसित होता है। रिपोर्ट किए गए लक्षणों में कोमलता, सहज दर्द, एलोडोनिया, हाइपरलेजेसिया औरआंतरिक क्षेत्र में यांत्रिक या थर्मल अतिसंवेदनशीलता शामिल हैं। जब 1 वर्ष के भीतर पर्याप्त रूप से इलाज नहीं किया जाता है, तो न्यूरोमा दर्द एक पुरानी दर्द की स्थिति में आगे बढ़ सकता है, जिसके परिणामस्वरूप उच्च सामाजिक बोझ और संबंधित चिकित्सा लागत10,11,12,13,14 हो सकती है। वर्तमान औषधीय हस्तक्षेपों की खराब प्रभावकारिता के कारण, न्यूरोमा दर्द को अधिमानतः दर्दनाक न्यूरोमा के सर्जिकल हटाने और विभिन्न शल्य चिकित्सा तकनीकों द्वारा इलाज की जाने वाली तंत्रिका द्वारा इलाज किया जाता है, जैसा कि साहित्य15 में वर्णित है। यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि पूर्ण दर्द से राहत दुर्लभ है, दर्द अक्सर समय के साथ खराब हो जाता है, और 40% रोगियों को सर्जरी से लाभ नहीं होता है, यह दर्शाता है कि नए उपचार की आवश्यकता है 1,16।
न्यूरोमा दर्द का एक मानकीकृत चूहा मॉडल न्यूरोमा दर्द को चलाने वाले तंत्र को समझने में सहायता करता है, और नए उपचारों की पहचान करने या क्लिनिक में उपयोग किए जाने वाले मौजूदा लोगों का मूल्यांकन करने में मदद कर सकता है। टिबियल न्यूरोमा ट्रांसपोज़ेशन (टीएनटी) मॉडल को पहली बार 200817 में डोर्सी एट अल द्वारा वर्णित किया गया था और इसका उपयोग विभिन्न शोध समूहों 18,19,20 द्वारा किया गया है। इस पद्धति का समग्र लक्ष्य न्यूरोमा दर्द के लिए विभिन्न उपचार तकनीकों का परीक्षण करने में सक्षम होना है। मॉडल का लाभ, उदाहरण के लिए, बख्शे गए तंत्रिका चोट (एसएनआई) मॉडल21, यह है कि यह न्यूरोमा साइट पर एलोडोनिया का परीक्षण करने की अनुमति देता है। ऐसा इसलिए है क्योंकि मॉडल में टिबियल तंत्रिका के समीपस्थ तंत्रिका अंत को चमड़े के नीचे प्रीटिबियल स्थिति में स्थानांतरित करना शामिल है, जहां इसे वॉन फ्रे मोनोफिलामेंट्स के साथ जांच की जा सकती है। इसके अलावा, एलोडोनिया बरकरार सुरल तंत्रिका द्वारा आंतरिक हिंद पंजे की प्लांटर सतह पर विकसित होता है, जिसे उसी जानवर में न्यूरोमा दर्द से स्वतंत्र रूप से मूल्यांकन किया जा सकता है। यह रोगियों में न्यूरोमा दर्द के लक्षणों के समान है, जहां दर्दनाक न्यूरोमा को हटाने के बाद लगातार न्यूरोपैथिक दर्द कभी-कभी पड़ोसी नसों के कारण होताहै22. इसके अलावा, न्यूरोमा के साथ एक कटी हुई तंत्रिका पर एलोडोनिया बरकरार पड़ोसी तंत्रिका पर एलोडोनिया की तुलना में एक अलग दर्द पद्धति है। इस प्रकार, यह मॉडल न्यूरोमा साइट पर मौजूद एलोडोनिया और हिंद पंजे की प्लांटर सतह में परीक्षण किए गए अधिक व्यापक न्यूरोपैथिक दर्द दोनों पर नए उपचारों के प्रभाव के आकलन की सुविधा प्रदान करता है। चूंकि टीएनटी मॉडल बनाने के लिए की गई सर्जरी चुनौतीपूर्ण हो सकती है, इसलिए यह पेपर अपनी सुविधा में मॉडल को लागू करने वाले शोधकर्ताओं का समर्थन करने के लिए प्रक्रिया पर विस्तार से बताता है।
Protocol
Representative Results
Discussion
प्रोटोकॉल में महत्वपूर्ण कदम
टीएनटी मॉडल में टिबियल तंत्रिका को काटना और इसे पार्श्व और चमड़े के नीचे एक प्रीटिबियल स्थान पर स्थानांतरित करना शामिल है ताकि न्यूरोमा की संवेदनशीलता परीक्षण क?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम माइक्रोसर्जरी के दौरान सहायता के लिए सबाइन वर्सटीग और कॉमन एनिमल लेबोरेटरी (जेमेन्सचैपेलिज्क डायरेन लेबोरेट्रीयम) से अंजा वैन डेर सर और ट्रूडी ओस्टरवेल्ड-रोमिन को माइक्रोस्कोप और सर्जिकल रूम तैयार करने और जानवरों की देखभाल करने में उनकी मदद के लिए धन्यवाद देना चाहते हैं।
इस शोध को एक्सोजेन द्वारा वित्त पोषित किया गया था।
Materials
| Aesthesio | Linton Instrumentation | 514007 until 514015 | 0.6 g until 15 g monofilaments |
| Carprofen | Local Veterinary Pharmacy | n/a | The local veterinary pharmacy makes caprofen dilution |
| Cotton swabs | Nobamed | 974255 | |
| Electrocautery | Fine Science Tools | 18010-00 | |
| Ethanol 70% | Interchema BV | 400406 | |
| Ethilon 4.0 | Johnson & Johnson | 1854G | IMPORTANT: the color should be blue or black |
| Ethilon 8.0 | Johnson & Johnson | BV130-5 | |
| Isoflo, isoflurane Zoetis | Dechra Veterinary Products | B506 | |
| Mesh bottom cages | StoeltingCo | 57816 and 57824 | |
| Micro forceps | Fine Science Tools | 11251-35 | |
| Micro needle holder | Fine Science Tools | 12076-12 | |
| Micro scissors | Fine Science Tools | 15019-10 | |
| Micro tweezers | Fine Science Tools | 11254-20 | |
| NaCl 0.9% | Trademed | H7 1000-FRE | |
| Needle holder | Fine Science Tools | 12004-16 | |
| Ophthalmic ointment | Local Veterinary Pharmacy | n/a | The local veterinary pharmacy makes the ophthalmic ointment |
| Scalpel | Fine Science Tools | 10003-12 | |
| Scissors | Fine Science Tools | 14001-12 | |
| Stereo surgical microscope | Leica | A60 F | |
| Sterile sheet with hole | Evercare OneMed | 1555-01 | |
| Surgical blade nr.15 | Fine Science Tools | 10015-00 | |
| Tweezers | Fine Science Tools | 11617-12 |
References
- Stokvis, A., vander Avoort, D. J., van Neck, J. W., Hovius, S. E., Coert, J. H. Surgical management of neuroma pain: a prospective follow-up study. Pain. 151 (3), 862-869 (2010).
- Domeshek, L. F., et al. Surgical treatment of neuromas improves patient-reported pain, depression, and quality of life. Plastic and Reconstructive Surgery. 139 (2), 407-418 (2017).
- Lame, I. E., Peters, M. L., Vlaeyen, J. W., Kleef, M., Patijn, J. Quality of life in chronic pain is more associated with beliefs about pain, than with pain intensity. European Journal of Pain. 9 (1), 15-24 (2005).
- Koch, H., Haas, F., Hubmer, M., Rappl, T., Scharnagl, E. Treatment of painful neuroma by resection and nerve stump transplantation into a vein. Annals of Plastic Surgery. 51 (1), 45-50 (2003).
- Fisher, G. T., Boswick, J. A. Neuroma formation following digital amputations. Journal of Trauma. 23 (2), 136-142 (1983).
- Bowen, J. B., Ruter, D., Wee, C., West, J., Valerio, I. L. Targeted muscle reinnervation technique in below-knee amputation. Plastic and Reconstructive Surgery. 143 (1), 309-312 (2019).
- Jensen, T. S., Krebs, B., Nielsen, J., Rasmussen, P. Phantom limb, phantom pain and stump pain in amputees during the first 6 months following limb amputation. Pain. 17 (3), 243-256 (1983).
- Woo, S. L., et al. Regenerative peripheral nerve interfaces for the treatment of postamputation neuroma pain: a pilot study. Plastic and Reconstructive Surgery Global Open. 4 (12), 1038 (2016).
- Arnold, D. M. J., et al. Diagnostic criteria for symptomatic neuroma. Annals of Plastic Surgery. 82 (4), 420-427 (2019).
- Liedgens, H., Obradovic, M., De Courcy, J., Holbrook, T., Jakubanis, R. A burden of illness study for neuropathic pain in Europe. Clinicoeconomics and Outcomes Research. 8, 113-126 (2016).
- Langley, P. C., Van Litsenburg, C., Cappelleri, J. C., Carroll, D. The burden associated with neuropathic pain in Western Europe. Journal of Medical Economics. 16 (1), 85-95 (2013).
- Dworkin, R. H., et al. Interpreting the clinical importance of group differences in chronic pain clinical trials: IMMPACT recommendations. Pain. 146 (3), 238-244 (2009).
- Mackinnon, S. E., Dellon, A. L. Results of treatment of recurrent dorsoradial wrist neuromas. Annals of Plastic Surgery. 19 (1), 54-61 (1987).
- Harden, R. N. Chronic neuropathic pain. Mechanisms, diagnosis, and treatment. Neurologist. 11 (2), 111-122 (2005).
- Poppler, L. H., et al. Surgical interventions for the treatment of painful neuroma: a comparative meta-analysis. Pain. 159 (2), 214-223 (2018).
- Eberlin, K. R., Ducic, I. Surgical algorithm for neuroma management: a changing treatment paradigm. Plastic and Reconstructive Surgery Global Open. 6 (10), 1952 (2018).
- Dorsi, M. J., et al. The tibial neuroma transposition (TNT) model of neuroma pain and hyperalgesia. Pain. 134 (3), 320-334 (2008).
- Tork, S., et al. Application of a porcine small intestine submucosa nerve cap for prevention of neuromas and associated pain. Tissue Engineering Part A. 26 (9-10), 503-511 (2020).
- Miyazaki, R., Yamamoto, T. The efficacy of morphine, pregabalin, gabapentin, and duloxetine on mechanical allodynia is different from that on neuroma pain in the rat neuropathic pain model. Anesthesia and Analgesia. 115 (1), 182-188 (2012).
- Tian, J., et al. Swimming training reduces neuroma pain by regulating neurotrophins. Medicine and Science in Sports Exercise. 50 (1), 54-61 (2018).
- Decosterd, I., Woolf, C. J. Spared nerve injury: an animal model of persistent peripheral neuropathic pain. Pain. 87 (2), 149-158 (2000).
- Poublon, A. R., et al. The anatomical relationship of the superficial radial nerve and the lateral antebrachial cutaneous nerve: A possible factor in persistent neuropathic pain. Journal of Plastic, Reconstructive and Aesthetic Surgery. 68 (2), 237-242 (2015).
- Dixon, W. J. Efficient analysis of experimental observations. Annual Review of Pharmacology and Toxicology. 20 (1), 441-462 (1980).
- Austin, P. J., Wu, A., Moalem-Taylor, G. Chronic constriction of the sciatic nerve and pain hypersensitivity testing in rats. Journal of Visualized Experiments. (61), e3393 (2012).
