En in vitro-upplösningsbestämning av multiindexkomponenter i tibetansk medicin Rhodiola granulat
Summary
Här testar vi upplösningen av Rhodiola granulat (RG) in vitro, ritar upplösningskurvor av salidrosid, gallinsyra och etylgallat i ultrarent vatten och anpassar kurvorna till olika matematiska modeller. Detta protokoll ger information och vägledning för in vivo bioekvivalens och in vivo-in vitro korrelationsstudier av RG.
Abstract
Sammansättningen av det tibetanska läkemedlet Rhodiola granulat (RG) är komplext, och den övergripande kvaliteten på RG är svår att bestämma. Därför är upprättandet av en metod för att bestämma multikomponentupplösningen in vitro av RG av stor betydelse för kvalitetskontrollen. Denna studie använder den andra paddelmetoden i den fjärde allmänna regeln 0931 från den kinesiska farmakopén (2020-upplagan), kompatibel med apparat 2 i USA: s farmakopé (USP). Upplösningsapparaten var inställd på en rotationshastighet på 100 rpm med ultrarent vatten som upplösningsmedium. En provvolym på 1 ml samlades in vid varje tidpunkt. Vidare bestämdes den kumulativa upplösningen av gallinsyra, salidrosid och etylgallinsyra i RG vid olika tidpunkter med högpresterande vätskekromatografi (HPLC). Slutligen ritades upplösningskurvorna och kurvorna anpassades till GompertzMod, Gompertz, Logistik och Weibull. Resultaten visade att den kumulativa upplösningen av gallinsyra i RG var över 80% vid 1 min, den kumulativa upplösningen av salidroside och etylgallinsyra var över 65% vid 5 min och den kumulativa upplösningen av varje indexkomponent minskade efter 30 min. Kurvanpassningen visade att GompertzMod-ekvationen var den bäst passande modellen för varje indexkomponent i RG. Sammanfattningsvis är upplösningstestmetoden som beskrivs i detta protokoll enkel, exakt och pålitlig. Det kan karakterisera upplösningsbeteendet hos indexkomponenterna i RG in vitro, vilket ger en metodologisk referens för kvalitetskontroll av RG och kvalitetsutvärdering av andra etniska föreningar.
Introduction
I Kina fortsätter förekomsten av hjärt-kärlsjukdomar att öka, och sjukligheten och dödligheten i hjärt-kärlsjukdomar rankas först bland kinesiska invånare1. Angina pectoris av kranskärlssjukdom orsakas av luminal stenos på grund av koronar ateroskleros, vilket leder till relativt otillräcklig koronar blodtillförsel och myokardiell ischemi och hypoxi2. Under de senaste åren har den härdande effekten av traditionell kinesisk medicin vid behandling av kranskärlssjukdom erkänts av många läkare3.
Traditionell kinesisk medicin spelar en viktig roll för att lindra kliniska symtom och förbättra livskvaliteten hos patienter4. Rhodiola granulat (RG) extraheras och raffineras från den tibetanska platån medicinalväxt Rhodiola rosea L. Huvudkomponenterna i RG är salidroside, rhodiosin och flavonoider 5,6. RG har effekten att komplettera Qi7 och aktivera och främja blodcirkulationen för att lindra smärta. Kliniskt används det för att behandla bröstkorgsobstruktioner orsakade av Qi-brist och blodstasis, kranskärlssjukdom, angina pectoris8. Enbart innehållsbestämning återspeglar inte helt läkemedlens inneboende kvalitet, eftersom både sönderfall och upplösning in vitro kan påverka läkemedlets biotillgänglighet och effekt 9,10. Inspektionsmetoderna för upplösning av kinesisk medicin inkluderar rotationskorgmetoden, paddelmetoden och den lilla koppmetoden. Nackdelen med den roterande korgmetoden är att endast den yttre delen av den roterande korgen kommer i kontakt med upplösningsmediet under rotation, vilket inte återspeglar det verkliga upplösningsbeteendet. Paddelmetoden kan övervinna ovanstående brist, vilket gör den mer lämplig än korgmetoden för vissa fasta kinesiska medicinpreparat11. För närvarande finns det ingen rapport om in vitro-upplösningsanalysen av RG. För att kontrollera kvaliteten på RG mer omfattande undersöktes upplösningsbeteendet hos de tre indexkomponenterna (gallinsyra, salidrosid och etylgallat) i RG. Denna studie ger data för kvalitetskontroll av RG och en metodologisk referens för kvalitetsutvärdering av andra etniska föreningar.
Protocol
Representative Results
Discussion
Upplösningstestet är en idealisk in vitro-metod för att simulera sönderfall och upplösning av fasta orala preparat i mag-tarmkanalen 15. Det är ett viktigt index för att utvärdera och kontrollera kvaliteten på fasta orala preparat. Därför spelar upplösningstestet en viktig roll i utvecklingen av fasta orala läkemedelspreparat16. I synnerhet, med utvecklingen av traditionell kinesisk medicin (TCM) kvalitetskontrollteknik, har bestämningen av upplösnin…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Detta arbete finansierades av Kinas nationella nyckelforsknings- och utvecklingsprogram (2017YFC1703904), samarbetsprojektet (Chengdu University of TCM) – företag (Tibet Rhodiola Pharmaceutical Holding Co. LTD) (1052022040101); det regionala innovations- och samarbetsprojektet vid avdelningen för vetenskap och teknik i Sichuanprovinsen (2020YFQ0032); och det viktiga FoU- och omvandlingsprogrammet för vetenskaps- och teknikavdelningen i Qinghai-provinsen (2020-SF-C33).
Materials
| Chromatographic column | ZORBAX Eclipse | XDB-C18 | 4.6 mm x 250 mm, 5 µm |
| Drug dissolution tester | Shanghai Huanghai Pharmaceutical Inspection Instrument Co., Ltd. | RCZ-6B3 | |
| Electronic analytical balance | Shanghai Liangping Instruments Co., Ltd. | FA1004 | |
| Ethyl gallate (HPLC, ≥98%) | Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd. | DSTDM006301 | |
| Function drawing software | OriginLab Corporation, Northampton, MA, USA | 2022 | |
| Gallic acid (HPLC, ≥98%) | Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd. | DSTDM000802 | |
| High performance liquid chromatography | Agilent Technologies Singapore (International) Pte. Ltd. | Agilent 1260 Infinity  |
|
| HPLC grade methanol | Thermo Fisher Scientific (China) Co., Ltd. | 216565 | |
| Injector | Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instrument Co., Ltd. | 0.7 (22 G) | |
| Millipore filter | Tianjin Jinteng Experimental Equipment Co., Ltd | φ13 0.22 Nylon66 | |
| Rhodiola granules | Tibet Nodikang Pharmaceutical Co., Ltd. | 210501 | |
| Salidroside (HPLC, ≥98%) | Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd. | DST200425-037 | |
| Ultra pure water systemic | Merck Millipore Ltd. | Milli-Q | |
| Ultrasonic cleansing machine | Ningbo Xinyi Ultrasonic Equipment Co., Ltd | SB-8200 DTS |
References
- Smith, S. C., Zheng, Z. J. The impending cardiovascular pandemic in China. Circulation Cardiovascular Quality and Outcomes. 3 (3), 226-227 (2010).
- Wang, D., Wang, P., Zhang, R., Xi, X. Efficacy and safety of Xuefu Zhuyu decoction combined with Western medicine for angina pectoris in coronary heart disease: A protocol for systematic review and meta-analysis. 의학. 99 (50), 23195 (2020).
- Yang, X., et al. The role of traditional Chinese medicine in the regulation of stress in treating coronary heart disease. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2019, 3231424 (2019).
- Yang, J., Tian, S., Zhao, J., Zhang, W. Exploring the mechanism of TCM formulae in the treatment of different types of coronary heart disease by network pharmacology and machining learning. Pharmacological Research. 159, 105034 (2020).
- Pu, W. L., et al. Anti-inflammatory effects of Rhodiola rosea L.: A review. Biomedicine & Pharmacotherapy. 121, 109552 (2020).
- Tao, H., et al. Rhodiola species: A comprehensive review of traditional use, phytochemistry, pharmacology, toxicity, and clinical study. Medicinal Research Reviews. 39 (5), 1779-1850 (2019).
- Li, M., et al. Exploring the biochemical basis of the meridian tropism theory for the qi-invigorating traditional Chinese medicine herb Panax ginseng. Journal of Evidence-Based Integrative Medicine. 26, 2515690 (2021).
- Pang, Y., Liang, J. Q. Effect of Nordicam on hemodynamics in rats with myocardial ischemia-reperfusion injury. Journal of Chinese Medicinal Materials. 36 (2), 276-279 (2013).
- Nickerson, B., Kong, A., Gerst, P., Kao, S. Correlation of dissolution and disintegration results for an immediate-release tablet. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 150, 333-340 (2018).
- Kambayashi, A., Yomota, C. Exploring clinically relevant dissolution specifications for oral solid dosage forms of weak acid drugs using an in silico modeling and simulation approach. European Journal of Pharmaceutical Sciences. 159, 105728 (2021).
- Meng, S., Jiang, T. Y., Bu, C. J., Liu, J. Q. Research progress on the dissolution of traditional Chinese medicine preparations. Chinese Journal of Clinical Rational Drug Use. 8 (32), 180-181 (2015).
- Chinese Pharmacopoeia Committee. . Pharmacopoeia of the People’s Republic of China. 4, (2020).
- Lin, J. Z. . Evaluation on Pre-Preparation of Rhodiola Extract. , (2013).
- Zhou, Y. B., et al. Calculation of drug solubility Weibull distribution parameters by Origin software. Herald of Medicine. 30 (06), 721-723 (2011).
- Hu, C. Q., Pan, R. X. Progress in evaluation/prediction of bioequivalence of solid oral preparations by dissolution test. Chinese Journal of New Drugs. 23 (01), 44-51 (2014).
- Zhang, H., Yu, L. X. Dissolution testing for solid oral drug products: Theoretical considerations. American Pharmaceutical Review. 7 (5), 26-30 (2004).
- Ren, J. L., et al. Analytical strategies for the discovery and validation of quality-markers of traditional Chinese medicine. Phytomedicine. 67, 153165 (2020).
- Li, H., et al. Establishment of modified biopharmaceutics classification system absorption model for oral Traditional Chinese Medicine (Sanye Tablet). Journal of Ethnopharmacology. 244, 112148 (2019).
- Song, X. Y., Li, Y. D., Shi, Y. P., Jin, L., Chen, J. Quality control of traditional Chinese medicines: a review. Chinese Journal of Natural Medicines. 11 (6), 596-607 (2013).
- Wu, X., et al. Quality markers based on biological activity: A new strategy for the quality control of traditional Chinese medicine. Phytomedicine. 44, 103-108 (2018).
- Wei, N. -. N., Wang, X., Su, M. Progress of dissolution test methodologies. Chinese Journal of New Drugs. 22 (10), 1119-1124 (2013).
- Chi, Z., Azhar, I., Khan, H., Yang, L., Feng, Y. Automatic dissolution testing with high-temporal resolution for both immediate-release and fixed-combination drug tablets. Scientific Reports. 9 (1), 17114 (2019).
- Haidar, S. H., et al. Bioequivalence approaches for highly variable drugs and drug products. Pharmaceutical Research. 25 (1), 237-241 (2008).
