כאן, אנו מציגים פרוטוקול הערכה של לב מושתל הטרוטופית לאחר שימור נורמותרמי ex situ במודל חולדה.
השתלת לב היא הטיפול היעיל ביותר לאי ספיקת לב סופנית. למרות השיפורים בגישות ובהתערבויות הטיפוליות, מספר חולי אי ספיקת הלב הממתינים להשתלה עדיין גדל. טכניקת השימור הנורמותרמית ex situ נקבעה כשיטה דומה לטכניקת האחסון הקר הסטטית הקונבנציונלית. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא כי לבבות התורם ניתן לשמר עד 12 שעות במצב פיזיולוגי. יתר על כן, טכניקה זו מאפשרת החייאה של לבבות התורם לאחר מוות במחזור הדם ומיישמת התערבויות פרמקולוגיות נדרשות לשיפור תפקוד התורם לאחר ההשתלה. מודלים רבים של בעלי חיים הוקמו כדי לשפר טכניקות שימור נורמותרמיות ex situ ולמנוע סיבוכים הקשורים לשימור. למרות שמודלים של בעלי חיים גדולים קלים לטיפול בהשוואה למודלים של בעלי חיים קטנים, זה יקר ומאתגר. אנו מציגים מודל חולדה של שימור לב נורמותרמי אקס סיטו מתורם ואחריו השתלת בטן הטרוטופית. מודל זה זול יחסית וניתן להשגה על ידי נסיין יחיד.
השתלת לב נותרה הטיפול המעשי היחיד לאי ספיקת לב עקשנית 1,2,3,4. למרות עלייה מתמדת במספר החולים הזקוקים להשתלת לב, לא נצפתה עלייה פרופורציונלית בזמינות האיברים התורמים5. כדי להתמודד עם בעיה זו, פותחו גישות חדשניות לשימור לבבות התורמים במטרה לשפר את האתגרים ולהגדיל את זמינותם של תורמים 6,7,8,9.
זילוח לב Normothermic ex situ (NESHP) באמצעות מכונות מערכת טיפול איברים (OCS) התגלה כהתערבות קלינית 1,3. טכניקה זו נחשבה חלופה מתאימה לשיטת אחסון קר סטטי קונבנציונלית (SCS) 2,9. NESHP מפחית ביעילות את משך האיסכמיה הקרה, מפחית את הביקוש המטבולי, ומאפשר אספקה תזונתית אופטימלית וחמצון במהלך הובלת איברים תורמים10,11. למרות הפוטנציאל הברור של שיטה זו לשפר את שימור האיברים התורמים, היישום הקליני שלה וחקירה נוספת הוגבלו על ידי עלויות גבוהות. לכן, מודלים פרה-קליניים של NESHP בבעלי חיים חיוניים לזיהוי אתגרים טכניים מרכזיים הקשורים לטכניקה זו12,13. חזירים וחולדות הם המודלים המועדפים על בעלי חיים למחקרים פרה-קליניים בשל סבילות איסכמית9. למרות שהמודל החזירי אידיאלי למחקר בסיסי ותרגומי, הוא מוגבל על ידי עלותו הגבוהה והעבודה האינטנסיבית הנדרשת לטיפול ותחזוקה. לעומת זאת, דגמי חולדות זולים יותר וקלים יותר לטיפול14.
במחקר זה, אנו מציגים מודל חולדה פשוט של NESHP, ואחריו השתלת לב הטרוטופית, כדי להעריך את ההשפעה של טכניקת השימור על מצב השתל לאחר ההשתלה. מודל זה הוא פשוט, חסכוני, וניתן לביצוע על ידי נסיין יחיד. איור 1 מציג את הסכמות של ההליך.
ההתמקדות שלנו בביסוס מודל זה הייתה לשכפל השתלות לב אנושיות נורמותרמיות. מודלים ללא פליטה הם הטכניקה המועדפת בדרך כלל לשימור הלב התורם בסביבה ex-situ 16. בעוד שמודלים של פליטה מציעים יתרונות רבים בהערכת תפקוד הלב במהלך זילוח אקס סיטו 17, הם אינם מתאימים למודל?…
The authors have nothing to disclose.
עבודה זו נתמכה על ידי מענק B2021-0991 ממכון המחקר הביו-רפואי של בית החולים האוניברסיטאי הלאומי צ’ונאם ו-NRF-2020R1F1A1073921 מקרן המחקר הלאומית של קוריאה
AES active evacuation system | Smiths medical | PC-6769-51A | Utilize CO2 and excess isoflurane |
Anesthesia machine | Smiths medical | PC-8801-01A | Mixes isoflurane and oxyegn and delivers to animal |
B20 patient monitor | GE medical systems | B20 | to observe mean aortic pressure and temperature |
Homeothermic Monitoring System | Harvard apparatus | 55-7020 | To monitor and maintain animal's temperature |
Micro-1 Rat oxygenator | Dongguan Kewei medical instruments | Micro-MO | For gas exchange in the langendorff circuit |
Micropuncture introducer Set | COOK medical | G48007 | for delivering cardioplegic solution to the arch through the abdominal aorta |
Microscope | Amscope | MU1403 | For zooming surgical field (Recipient) |
Surgical loupe | SurgiTel | L2S09 | For zooming surgical field (Donor) |
Syringe pump | AMP all | SP-8800 | To deliver cardioplegic solution |
Transonic flow sensor | Transonic | ME3PXL-M5 | Perfusion circuit flow sensor |
Transonic tubing flow module | Transonic | TS410 | flow acquiring system |
Watson – Marlow pumps | Harvard apparatus | 010.6131.DAO | Peristaltic pump used for recirculate perfusate |
WBC-1510A | JEIO TECH | E03056D | Heating bath |
Sprague-Dawley rats | Samtako Bio Korea Co., Ltd., Osan City Korea | ||
Medications | |||
BioHAnce Gel Eye Drops | SENTRIX Animal care | wet ointments for eye | |
Cefazolin | JW pharmaceutical | For prophilaxis | |
Custodiol | DR, FRANZ KOHLER CHEMIE GMBH | For heart harvesting | |
Diclofenac | Myungmoon Pharm. Co. Ltd | For pain control | |
Heparin | JW pharmaceutical | Anticoagulant | |
Insulin | JW pharmaceutical | hormon therapy | |
Saline | JW pharmaceutical | For hydration therapy |