Для понимания патологических механизмов, лежащих в основе стеноза аортального клапана (АВС), и для оценки эффективности терапевтических вмешательств необходима соответствующая модель на животных. В настоящем протоколе описана новая процедура разработки модели кролика AVS с помощью прямого повреждения баллоном in vivo.
Модели на животных становятся важным инструментом для понимания патологических механизмов, лежащих в основе стеноза аортального клапана (АВС), из-за отсутствия доступа к надежным источникам пораженных аортальных клапанов человека. Среди различных моделей животных модели кроликов AVS являются одними из наиболее часто используемых в исследованиях крупных животных. Тем не менее, традиционные модели AVS кроликов требуют длительного периода приема пищевых добавок и генетических манипуляций для индуцирования значительного стеноза аортального клапана, что ограничивает их использование в экспериментальных исследованиях. Для устранения этих ограничений предложена новая модель кроликов AVS, в которой стеноз индуцируется прямым баллонным повреждением аортального клапана. В настоящем протоколе описана успешная методика индуцирования АВС у новозеландских белых кроликов (NZW) с пошаговыми процедурами подготовки, хирургического вмешательства и послеоперационного ухода. Эта простая и воспроизводимая модель предлагает многообещающий подход к изучению возникновения и прогрессирования АВС и предоставляет ценный инструмент для изучения основных патологических механизмов заболевания.
Все большее признание получает тот факт, что использование соответствующих моделей на животных может способствовать лучшему пониманию патологических механизмов, лежащих в основе стеноза аортального клапана (АВС), из-за отсутствия доступа к надежным источникам пораженных аортальных клапанов человека, связанных с прогрессированием аортального стеноза (АС). Среди различных животных моделей для изучения АВС кролики являются одной из наиболее часто используемых моделей АВС крупных животных, а модель АВС кроликов индуцируется либо с помощью добавок холестерина/витамина D2, либо с помощью генетических манипуляций 1,2,3,4.
Несмотря на то, что кроличьи модели AVS предоставили значительное представление о развитии и прогрессировании AVS, по-прежнему остается сложной задачей последовательное и воспроизводимое индуцирование AVS, как видно из наших предварительных экспериментов.
В дополнение к генетически восприимчивым моделям животных, индуцированных диетой и генетически восприимчивым, была создана новая модель AVS путем прямой механической травмы у мышей 5,6. Модель механической травмы успешно индуцирует аортальный стеноз и представляет собой простую и воспроизводимую модель AVS у мышей дикого типа. Насколько нам известно, ранее не проводилось исследований, изучающих влияние механической травмы на аортальный клапан на кроличьих моделях. Таким образом, в данном исследовании представлена новая процедура индуцирования АВС у самцов новозеландских белых кроликов путем прямого баллонного повреждения аортального клапана, которая может точно имитировать состояние клапанного аортального стеноза. Этот протокол включает в себя пошаговое описание подготовки, хирургической процедуры и послеоперационного ухода, которые полезны для индуцирования воспроизводимых моделей кроликов AVS.
Модели AVS на животных обычно используются для изучения патологических аспектов AVS, включая начало и прогрессирование AVS. Этот протокол представляет новую модель AVS кролика, индуцированную прямым баллонным повреждением аортального клапана. В этом исследовании модель повреждения аортал…
The authors have nothing to disclose.
Эта работа была поддержана грантом Национального исследовательского фонда Кореи (NRF), финансируемым правительством Кореи (MSIT) (No 2020R1A4A3079570), Министерством образования (No 2021R1I1A1A01051425) и Программой стратегического развития промышленных технологий (No 20014873), финансируемой Министерством торговли, промышленности и энергетики Республики Корея.
3-0 Silk suture | AILEE | SK312 | |
4% paraformaldehyde(PFA) | Intron | IBS-BP031-2 | |
Alizarin red Solution | Millpore | TMS-008-C | |
ASAHI SION BLUE | ASAHI | Guide wire | |
Back Table Cover | Yuhan kimberly | 80101-30 | |
Balloon In-deflation Device | Demax Medical | DID30s | |
Bionet Veterinary monitor | BIONET | BM3 VET | |
C-Arm | SIEMENS Healthcare GmbH | Cios alpha | |
Certified Rabbit Diet | Purina | 5322 | 4.7% Hydrogenated Coconut Oil, 0.5% Cholesterol, & 1% Molasse |
Curadle Smart Incubator | Autoelex | CS-CV206 | Intensive Care Unit (ICU) |
Ergocalciferol | Sigma-aldrich | E5750 | Vitamin D2 |
Fechtner conjunctiva forceps titanium | WORLD PRECISSION Instrument | WP1820 | |
Forceps | HEBU | HB203 | |
Gentamicin | Shin Poong | ||
Glycopyrrolate | SamChunDang | ||
Greenflex NS | DAI HAN PHARM | Normal saline 500 mL | |
Hematoxylin solution | Sigma-aldrich | HT1079-1 SET | |
Heparin | JW pharmaceutical | 25,000 U | |
Infusion set for single use | SWOON MEDICAL | ||
Iodine | Green pharmaceutical | ||
Iodixanol | GE Healthcare | Visipaque | Inflation solution (contrast agent) |
IV catheter 22 G | BD | 382423 | |
IV catheter 24 G | BD | 382412 | |
Ketoprofen | SamChunDang | ||
Luer-Lok syringe 10 mL | Becton Dickinson Medical | ||
Luer-Lok syringe 3 mL | Becton Dickinson Medical | ||
Microscope | OLYMPUS | SZ61 | |
Microtome | ThermoFisher Scientific | HM 325 | |
MT stain kit | Sigma-aldrich | HT15-1kt | |
Needel holder | Solco | 009-1304 | |
Needle Holder with Lock and Suture | JEUNGDO BIO & PLANT | H-1222-18 | |
Paraffin | LK LABKOREA | H06-660-107 | |
PBS | Gibco | 10010-023 | |
Potassium chloride 40 | Daihan Pharm | KCl | |
Prelude Ideal Hydrophilic Sheath | MERIT MEDICAL | PID4F11018SS | Sheath 4F |
PTA Balloon Dilatation catheter | Boston Scientific | H749-3903280208-0 | Balloon catheter 8.0 mm |
Rompun | Elanco | Xylaxine | |
sterile Gauze | DAE HAN Medical | 10 cm x 20 cm | |
Surgical Gloves | Ansell | Ansell | |
Surgical Gown | Yuhan kimberly | 90002-02 | |
Surgical Scissors | Nopa, Germany | AC020/16 | |
Surgical Tape | 3M micopore | 1530-1 | |
Syringe 1 mL | Shin Chang Medical | ||
Syringe 10 mL | Shin Chang Medical | ||
Tissue cassette | Scilav korea | Cas3003 | |
Transducer gel | SUNGHEUNG | SH102 | |
Tridol | Yuhan Corp. | Tramadol HCl | |
Ultrasound system | Philps | Affiniti 50 | |
Von Kossa stain kit | Abcam | ab105689 | |
Zoletil 50 | Virbac korea | Tiletamine & zolazepam |