הפרוטוקול מסכם את שיטות העבודה המומלצות למזעור העומס הביולוגי המיקרוביאלי בסביבת חדר נקי וכולל אסטרטגיות כגון ניטור סביבתי, ניטור תהליכים ובדיקת סטריליות מוצרים. הוא רלוונטי למתקני ייצור ובדיקה הנדרשים לעמוד בתקני פרקטיקה של רקמות טובות ובתקני שיטות ייצור טובות הנוכחיים.
תוכנית הוליסטית מתוקפת היטב המשלבת אמצעי ניקוי, ניטור סביבתי וניטור כוח אדם חזקים היא קריטית למזעור הנטל הביולוגי המיקרוביאלי בחדרי הייצור של הטיפול התאי ובמעבדות הבדיקה המתאימות, כדי להבטיח שהמתקנים פועלים במצב של שליטה. הבטחת בטיחות המוצר באמצעות אמצעי בקרת איכות, כגון בדיקות סטריליות, היא דרישה רגולטורית הן עבור מניפולציה מינימלית (סעיף 361) והן עבור יותר ממניפולציה מינימלית (סעיף 351) עבור תאים אנושיים, רקמות ומוצרים מבוססי תאים ורקמות (HCT/Ps). בסרטון זה, אנו מספקים מדריך מדורג כיצד לפתח ולשלב את שיטות העבודה האספטיות הטובות ביותר לפעולה בסביבת חדר נקי, כולל חלוק, ניקוי, בימוי חומרים, ניטור סביבתי, ניטור תהליכים ובדיקת סטריליות מוצרים באמצעות חיסון ישיר, המסופק על ידי הפרמקופיאה של ארצות הברית (USP) ושיטת בדיקת הסטריליות האלטרנטיבית של המכונים הלאומיים לבריאות (NIH). פרוטוקול זה מיועד לשמש כמדריך עזר למפעלים הצפויים לעמוד בשיטות הקיימות של רקמות טובות (cGTP) ובשיטות הייצור הטובות הנוכחיות (cGMP).
יישום תוכנית ניטור מיקרוביאלית חזקה באמצעות ניטור סביבתי (EM), ניטור תהליכים ובדיקות סטריליות של מוצרים הוא דרישה רגולטורית עבור שיטות קיימות של רקמות טובות (cGTP) ושיטות ייצור נאותות נוכחיות (cGMP) במעבדות לטיפול תאי1. בנוסף, מנהל המזון והתרופות האמריקני (FDA) מצפה כי המעבדה המבצעת את בדיקות בקרת האיכות (QC) של המוצר צריכה גם להעסיק מתקנים ובקרות דומים לאלה המשמשים לפעולות מילוי אספטי2.
פרוטוקול זה כולל ארבעה חלקים עיקריים: 1) פרקטיקות אספטיות, כולל הלבשת כוח אדם, ניקוי ובימוי חומרים; 2) EM, כולל תרביות אוויר ופני שטח בנות קיימא וניטור אוויר חלקיקים שאינו בר קיימא; 3) ניטור תהליכים, כולל צלחות שיקוע ודגימת קצות אצבעות בכפפות; ו-4) בדיקת סטריליות של מוצרים באמצעות הפרמקופיאה של ארצות הברית (USP) שיטה3 או שיטת בדיקת סטריליות חלופית של NIH4. כאשר משתמשים בהם יחד, אמצעים אלה יכולים להיות שיטה יעילה להבטיח כי מתקן נשאר במצב של שליטה.
הטכניקות המתוארות כאן אינן חדשניות; עם זאת, הסטנדרטים הנוכחיים של רגולטורים וארגונים מקצועיים חסרים פירוט, מה שהוביל להיעדר ניטור מיקרוביאלי או יישום של פרקטיקות לא סטנדרטיות, במיוחד במרכזים אקדמיים שבהם ייצור באתר ובדיקות סטריליות מוצרים מתעוררים בקצב מהיר 1,5,6 . פרוטוקול זה יכול לשמש כמדריך ליצירת תוכנית ניטור ובקרה מיקרוביאלית העומדת בדרישות רגולטוריות כאשר נעשה בה שימוש בשילוב עם אימות משתמש קצה והערכות סיכונים.
ישנם מספר תחומים קריטיים בפרוטוקול זה, כולל תחזוקה של טכניקה אספטית וזרימת אוויר חד-כיוונית בתוך חדרים נקיים ו- BSC. שיטות עבודה מומלצות כוללות תנועה איטית ומכוונת כדי למזער מערבולות. מניפולציות אספטיות צריכות להתבצע מצד המוצר, לא מלמעלה. מומלץ לבצע עיבוד מערכת סגורה ושימוש בחומרי גלם מעוק?…
The authors have nothing to disclose.
עבודה זו נתמכה על ידי תוכנית המחקר Intramural של המכונים הלאומיים לבריאות המרכז הקליני. התוכן הוא באחריותם הבלעדית של המחברים ואינו מייצג את הדעות הרשמיות של המכונים הלאומיים לבריאות.
20-25°C Incubator | Lab preference | ||
30-35°C Incubator | Lab preference | ||
Alcohol-based hand sanitizer | Lab preference | ||
BacT/ALERT Dual-T instrument | BioMerieux Industry | ||
Beard cover | Lab preference | ||
Biosafety cabinet (BSC) | Lab preference | ||
Cleanroom shoes | Lab preference | ||
Fluidthioglycollate medium (FTM) | Hardy Diagnostics | U84 | USP |
Handheld cleaning mop | Contec | 2665LF | |
Hypodermic needle | Lab preference | ||
iFA+ BacT/ALERT bottle | Biomerieux | 412990 | |
iFN+ BacT/ALERT bottle | Biomerieux | 412991 | |
Isokinetic head | Lab preference | ||
Laser particle counter | TSI Incorporated | 9500-01 | |
LpH III | Steris | 1S16CX | |
Mirror | Lab preference | ||
Non-sterile bouffant | Lab preference | ||
Non-sterile gloves | Lab preference | ||
Non-sterile shoe covers | Lab preference | ||
Non-sterile sleeve covers | Lab preference | ||
Parafilm | Lab preference | ||
Peridox RTU | Contec | CR85335IR | |
Plastic bag | Lab preference | ||
Sabouraud Dextrose Agar with Lecithinase and Tween (SABLT) | Hardy Diagnostics | P595 | USP, irradiated |
Sabouraurd Dextrose Agar (SAB) | Hardy Diagnostics | W565 | USP, irradiated |
Safety glasses | Lab preference | ||
Scrubs (top and bottom) | Lab preference | ||
Spor-Klenx RTU | Steris | 6525M2 | |
Sterile 70% isopropyl alcohol (IPA) | Decon CiDehol | 8316 | |
Sterile alcohol wipe | Lab preference | ||
Sterile boot covers | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
Sterile coveralls | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
Sterile face mask | Lab preference | ||
Sterile gloves | Lab preference | ||
Sterile hood | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
Sterile low-lint wipes | Texwipe | TX3210 | |
Sterile mop cleaning pads | Contec | MEQT0002SZ | |
Sterile sleeve covers | Kimberly Clark | 36077 | |
Sterile spreading rod | Fisher Scientific | 14665231 | |
Sterile syringe | Lab preference | ||
Tacky mats | Lab preference | ||
Tryptic Soy Agar (TSA) | Hardy Diagnostics | W570R | USP, irradiated |
Tryptic Soy Agar with Lecithinase and Tween (TSALT) | Hardy Diagnostics | P520R | USP, irradiated |
Tryptic Soy Broth (TSB) | Hardy Diagnostics | U46 | USP |
Tubing | Lab preference | ||
Vesphene III | Steris | 1S15CX | |
Viable air sampler | Hardy Diagnostics | BAS22K | |
Vortex | Lab preference |