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우리 중 많은 사람들이 실험에서 생물학적 작용제와 길항제를 사용하며, 특정 조건에서 세포 기능에 미치는 영향을 정량화하는 생물학적 분석에서 가장 자주 사용합니다. 여기에 설명된 방법은 혈소판을 활성화하고 다양한 분석(광 투과 응집법, 현미경, 유세포 분석, Ca2+ 방출 등)에서 활성을 측정할 수 있는 당단백질 VI 작용제인 혈소판 작용제 콜라겐 관련 펩타이드(CRP-XL)에 대한 것이지만, 작용제 표준화 프로토콜은 모든 생물학적 작용제/길항제 및/또는 생물학적 검정에 적용할 수 있습니다. 물리학은 일상 업무 관행에서 표준물질의 사용에 정통하며, 상업 부문에서 바이오치료제를 개발하는 회사들은 참조 표준물질1 사용의 가치를 이해하고 있지만, 많은 생물학 과학자들, 특히 학술 연구 커뮤니티에서 표준물질의 활용도가 낮으며, 표준물질의 사용 부족은 과학적 결과물의 질에 부정적인 영향을 미친다.
CRP-XL은 1995년2 이후 혈소판 분야에서 수십 년 동안 사용되어 온 특정 GPVI 특이적 작용제로, 3,4 이후 커뮤니티에서 GPVI의 역할을 다른 콜라겐 결합 혈소판 단백질의 역할과 구분하는 데 도움이 됩니다. 이 작용제는 다양한 상업적 출처에서 조달하거나 사내에서 생산할 수 있습니다. 펩타이드 단량체는 공급업체로부터 구매한 후 사내에서 가교하거나 공급업체가 추가 비용을 지불하고 가교할 수 있습니다. 배송 시 필요한 순도를 줄임으로써 비용을 추가로 절감할 수 있습니다(예: 70% 대 95%). 또한 CRP-XL을 보관하는 방법에 대한 합의가 이루어지지 않았으며, 일부는 냉동 보관을 선택하고 일부는 사용할 때까지 재료를 동결 건조하여 보관하고 다른 일부는 용액(선호도에 따라 물 또는 완충액)에 보관합니다. 따라서 실험실 스톡의 품질과 구성은 표준화되지 않았거나 조화를 이루지 못했습니다. 이 작용제는 활성 단위가 아닌 정의된 농도(질량/부피)로 사용되기 때문에 한 실험실에서 CRP-XL의 효능(예: 1μg/mL)은 다른 실험실과 동일하지 않습니다. 현장에서 사용되는 다른 혈소판 작용제는 이미 표준화되어 있으므로(예: 트롬빈은 질량/부피가 아닌 활동 단위로 공급 및 사용됨) 질량/부피에서 생물학적 단위로의 이동이 커뮤니티에 너무 어렵지 않아야 합니다. 또한 CRP-XL을 포함한 혈소판 작용제에 대한 환자의 반응은 작용제에 대한 민감도와 반응 능력(반응 정도) 측면에서 다양하므로5 분석에서 일관된 양의 작용제 활성을 사용하는 것이 훨씬 더 중요합니다.
혈소판 작용제를 중량/부피가 아닌 정의된 활성으로 사용하여 조화시킬 수 있다면 한 실험실의 실험을 다른 실험실의 실험과 직접 비교할 수 있고 자신 있게 정확하게 재현할 수 있습니다. 현장에서 CRP-XL 활동을 저장하고 표준화하는 방법에 대한 합의에 도달할 때까지 재료가 사용되는 수개월/년 동안 일관성을 보장하기 위해 재료를 정기적으로 점검하는 것이 중요합니다.
생물학적 표준물질에 대한 활성값 할당은 협력적인 다기관 연구(예: 6,7)를 통해 수행되어야 하며 전문 지식이 필요합니다. 혈소판 작용제에 대한 확립된 생물학적 표준의 필요성은 최근 국제 혈전증 및 지혈 학회(International Society for Thrombosis and Haemostasis, ISTH)가 지원하는 다기관 협력 연구8에 의해 강조되었다. 국제 CRP-XL 표준이 제공될 때까지 연구자들은 시간이 지남에 따라 일관성을 보장하기 위해 현지에서 자체 재료를 표준화할 수 있으며, 상업적 또는 사내에서 조달된 새로운 재료는 이전 준비 및 나머지 커뮤니티의 준비와 유사한 활동을 할 수 있습니다.
