Vi presenterer en protokoll for Tuina-manipulasjon utført på gips-immobilisert-induserte kneartroserotter. Basert på de foreløpige resultatene, antydet det at effekten av metoden stod på reduksjon av betennelse og brusktap.
Kliniske studier tyder på at Tuina manipulasjon er effektiv i behandling av knet artrose (KOA), mens videre studier er nødvendig for å oppdage mekanismen. Derfor er manipulering av dyremodeller av knet artrose kritisk. Denne protokollen gir en standardprosess for Tuina-manipulering på KOA-rotter og en foreløpig utforskning av Tuina-mekanismen for KOA. Press- og eltemanipulasjonsmetoden (en slags Tuina-manipulasjon som refererer til å trykke og elte det spesifikke området av kroppsoverflaten) påføres på 5 akupunkter rundt kneleddet av rotter. Kraften og frekvensen av manipulasjonen ble standardisert ved fingertrykkopptak, og rottens posisjon under manipulering er beskrevet i detalj i protokollen. Effekten av manipulasjon kan måles ved smerteatferdstester og mikroskopiske funn ved synovial og brusk. KOA-rotter viste signifikant forbedring i smerteadferd. Synovialvevsinfiltrasjonen var redusert i Tuinagruppen, og uttrykket av tumornekrosefaktor (TNF)-α var signifikant lavere. Sammenlignet med kontrollgruppen var kondrocyttapoptose mindre i Tuinagruppen. Denne studien gir en standardisert protokoll for Tuina-manipulering på KOA-rotter og foreløpig bevis på at de terapeutiske effektene av Tuina kan være relatert til å redusere synovial betennelse og forsinket kondrocyttapoptose.
Knet artrose (KOA) er en degenerativ sykdom hovedsakelig manifestert i leddsmerter. Fibrose, sprekker, sårdannelse og tap av leddbrusk er hovedårsakene til denne sykdommen1. KOA har høy prevalens og kan resultere i en dyp innvirkning på pasientens daglige liv, forårsaker funksjonshemming i alvorlige tilfeller. Blant personer i alderen 45-84 år øker forekomsten av KOA med alderen, og forekomsten blant personer i alderen 85 år og over er 15%, med en overvekt hos kvinner 2,3. I tillegg kan KOA medføre en alvorlig økonomisk belastning for både individet og samfunnet. En undersøkelse viste at direkte helsekostnader på KOA per innbygger nådde opp til $ 8,858 ± $ 5,120 per år4. Med aldringen av samfunnet har KOA blitt et verdensomspennende helseproblem og et stort sosialt problem, samt et aktuelt problem for vitenskapelig forskning.
Evidensbaserte studier har vist effektiviteten av Tuina-manipulasjon ved behandling av KOA5. Tuina-manipulasjon kan lindre smerte og forbedre dysfunksjon hos KOA-pasienter, hvis mekanisme er relatert til antiinflammatoriske effekter 6,7. Forskere fant at Tuina-manipulasjon effektivt hemmet uttrykket av inflammatoriske faktorer interleukin (IL) -β og 5-hydroksytryptamin og reduserte degenerasjonen av leddbrusk i en kanin KOA modell8. Det antydet at Tuina kunne fremme blodsirkulasjon og metabolisme på lesjonsstedet, noe som bidro til å fjerne inflammatoriske faktorer som IL-1, IL-6 og tumornekrosefaktor (TNF) -α, og dermed lindre de kliniske symptomene på KOA9. I tillegg kan passiv bevegelse av leddet gjennom Tuina-manipulasjon fremme penetrasjon og diffusjon av synovialvæske i leddbrusk og forbedrer vevets næringsstoffskifte10. Andre studier antydet at Tuina-manipulering effektivt kan forbedre de biomekaniske indeksene hos KOA-pasienter11. Manipulasjoner brukt på bløtvev kan forbedre stressfordelingen over lemmer og forbedre balansefunksjonen12,13. Samtidig, med noen leddjusteringsmanipulasjoner, kan justeringen av underekstremitetene også justeres for å korrigere unormale gangarter14,15.
Virkningsmekanismen for Tuina-manipulasjon ved behandling av KOA gjenstår å bli utforsket, og derfor er det nødvendig med en eksperimentell studie. Nøkkelen til anvendelsen av Tuina i forsøksdyr er standardisering av modellering, dyrefiksering og intervensjonsmetoder16. Modelleringsmetoden bestemmer om forsøksdyret kan utvise sykdommens egenskaper. I mellomtiden kan passende fikseringsmetoder lette inngrepet av Tuina-manipulasjonen og bedre reflektere effekten av Tuina. Standardiseringen av intervensjonsmetoder er den vanskeligste delen av Tuina-manipulasjon. I 2010 nevnte det grunnleggende systemet med kinesiske akupunkturstandarder akupunkturpunktstandardene for forsøksdyr, noe som gir mulighet for akupunktur- og Tuina-operasjoner i dyreforsøk17. Imidlertid er det fortsatt vanskeligheter med å standardisere Tuina-manipulasjon. Det finnes flere typer Tuina-manipulasjon18. Valget av den spesifikke manipulasjonen avhenger hovedsakelig av sykdommen som skal behandles og de terapeutiske teoriene utøveren foretrekker. I studien av Tuina for KOA har mer oppmerksomhet blitt gitt til punkttrykkmanipulasjonen (trykke på de spesifikke akupunktene med tommelen eller albuen), Yizhichan skyve manipulasjon (en skyvemanipulasjon ved å vri på tommelen), og trykk og eltemanipulasjon (som refererer til å trykke og elte det spesifikke området av kroppsoverflaten med finger eller håndflate)19. Presse- og eltemanipulasjon er en av de mest brukte Tuina-manipulasjonene, som kombinerer pressing og æltning for å bevege det subkutane vevet20. Presse- og eltemanipulasjon brukt på akupunkter kan fremme blodsirkulasjonen og lindre smerte og representerer den terapeutiske effekten av Tuina på KOA19.
I denne protokollen vil operasjonen av presse- og eltemanipulasjon på KOA-rotter bli beskrevet i detalj, inkludert utvalgte akupunkter, intensitet og hyppighet av manipulasjonen og rottens kroppsposisjon, for å gi en referanse for fremtidig forskning.
Denne studien gir en protokoll for Tuina-manipulering på KOA-rotter. Gjennom smerteadferdstester og histomorfologiske funn foreslo det at en slik serie Tuina-manipulasjon brukt på KOA-rotter kunne redusere synovial betennelse og bruskaboptose, noe som kunne være en referanse til Tuina-manipulasjon på dyremodeller av KOA.
Det er flere kritiske prosedyrer under protokollen. For det første er det viktig å velge en passende metode for å indusere KOA-modellen. Det finnes ulike metoder for å…
The authors have nothing to disclose.
Dette arbeidet ble støttet av Shanghai Critical Clinical Specialties Construction Project (tilskuddsnummer: Shslczdzk04001); seilingsprogrammet til Shanghai Science and Technology Commission (tilskuddsnummer: 22YF1444300); Prosjekter innenfor budsjettet til Shanghai University of Traditional Chinese Medicine (Grant Number: 2021LK091).
absolute ethanol | Supelco | PHR1070 | For making specimen |
ALMEMO admeasuring apparatus | ahlborn | 2450-1 | For Mechanical Withdrawal Threshold test |
Anti-Digoxin antibody | Sigma-Aldrich | SAB4200669 | For HE stain IHC or TUNEL |
Anti-IL-1 beta | abcam | ab283818 | For HE stain IHC or TUNEL |
DAB Substrate kit | Solarbio | DA1010 | For HE stain IHC or TUNEL |
Denture base materials | Shanghai New Century | 20000356 | For model making |
eosin | bioswamp | PAB180016 | For HE stain IHC or TUNEL |
Finger pressure recordings | Suzhou Changxian Optoelectronic Technology | CX1003w | For Tuina manipulation |
formic acid solution | Sigma-Aldrich | 695076 | For decalcification |
H2O2 | Sigma-Aldrich | 386790-M | For HE stain IHC or TUNEL |
hematoxylin | bioswamp | PAB180015 | For HE stain IHC or TUNEL |
Isoflurane | Shanghai Yuyan Scientific Instrument Company | S10010533 | For gas anesthesia |
neutral resins | bioswamp | PAB180017 | For HE stain IHC or TUNEL |
Paraformaldehyde Fix Solution | Sigma-Aldrich | 100496 | For histology |
PBS | Sigma-Aldrich | P3813 | For HE stain IHC or TUNEL |
Plantar Test Apparatus | IITC Life Science | / | For Paw Withdrawal Latency test |
plaster of Paris bandage | WANDE | 20150023 | For model making |
Proteinase K | Sigma-Aldrich | 124568 | For HE stain IHC or TUNEL |
TNF Alpha Monoclonal antibody | Proteintech | 60291-1-Ig | For HE stain IHC or TUNEL |
TUNEL | Servicebio | GDP1042 | For HE stain IHC or TUNEL |
Wax | Sigma-Aldrich | 327204 | For making specimen |
xylene | Shanghai Sinopharm Group | 100092 | For making specimen |