Diz Osteoartritli Sıçanlarda Enflamasyonu ve Kıkırdak Kaybını Azaltmak için Tuina Manipülasyonu
Summary
Alçı ile immobilize edilmiş diz osteoartriti olan sıçanlarda yapılan Tuina manipülasyonu için bir protokol sunuyoruz. Ön sonuçlara dayanarak, yöntemin etkinliğinin iltihaplanma ve kıkırdak kaybının azaltılmasına dayandığını öne sürdü.
Abstract
Klinik çalışmalar, Tuina manipülasyonunun diz osteoartritinin (KOA) tedavisinde etkili olduğunu gösterirken, mekanizmasını keşfetmek için daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır. Bu nedenle, diz osteoartritinin hayvan modellerinin manipülasyonu kritiktir. Bu protokol, KOA sıçanlarında Tuina manipülasyonu için standart bir süreç ve KOA için Tuina mekanizmasının ön araştırmasını sağlar. Pres ve yoğurma manipülasyon yöntemi (vücut yüzeyinin belirli bir bölgesinin preslenmesi ve yoğrulması anlamına gelen bir tür Tuina manipülasyonu), sıçanların diz eklemi etrafındaki 5 akupunktur noktasına uygulanır. Manipülasyonun kuvveti ve sıklığı parmak basıncı kayıtları ile standardize edildi ve manipülasyon sırasında sıçanın konumu protokolde ayrıntılı olarak açıklandı. Manipülasyonun etkisi ağrı davranış testleri ve sinovyal ve kıkırdaktaki mikroskobik bulgularla ölçülebilir. KOA sıçanları ağrı davranışında önemli bir iyileşme gösterdi. Tuina grubunda sinovyal doku inflamatuar infiltrasyonu azaldı ve tümör nekroz faktörü (TNF)-α ekspresyonu anlamlı olarak daha düşüktü. Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, kondrosit apoptozu Tuina grubunda daha azdı. Bu çalışma, KOA sıçanlarında Tuina manipülasyonu için standart bir protokol ve Tuina’nın terapötik etkilerinin sinovyal inflamasyonu ve gecikmiş kondrosit apoptozunu azaltmakla ilişkili olabileceğine dair ön kanıt sunmaktadır.
Introduction
Diz osteoartriti (KOA), esas olarak eklem ağrısı ile kendini gösteren dejeneratif bir hastalıktır. Fibrozis, çatlama, ülserasyon ve eklem kıkırdağı kaybı bu hastalığın başlıca nedenleridir1. KOA’nın prevalansı yüksektir ve hastaların günlük yaşamları üzerinde derin bir etkiye neden olarak ciddi vakalarda sakatlığa neden olabilir. 45-84 yaş arası kişilerde KOA prevalansı yaşla birlikte artar ve 85 yaş ve üzeri kişilerde görülme sıklığı %15 olup, kadınlarda baskındır 2,3. Buna ek olarak, KOA hem bireye hem de topluma ciddi bir ekonomik yük getirebilir. Bir anket, kişi başına KOA’daki doğrudan sağlık bakım maliyetlerinin yılda 8.858 $ ± 5.120 $’a ulaştığını gösterdi4. Toplumun yaşlanmasıyla birlikte KOA, dünya çapında bir sağlık sorunu ve önemli bir sosyal sorun haline geldiği gibi, bilimsel araştırmalar için güncel bir konu haline gelmiştir.
Kanıta dayalı çalışmalar, Tuina manipülasyonunun KOA5 tedavisinde etkinliğini göstermiştir. Tuina manipülasyonu, mekanizması anti-enflamatuar etkilerle ilişkili olan KOA hastalarında ağrıyı hafifletebilir ve işlev bozukluğunu iyileştirebilir 6,7. Bilim adamları, Tuina manipülasyonunun inflamatuar faktörler interlökin (IL)-β ve 5-hidroksitriptamin ekspresyonunu etkili bir şekilde inhibe ettiğini ve bir tavşan KOA model8’de eklem kıkırdağının dejenerasyonunu yavaşlattığını buldular. Tuina’nın lezyon bölgesinde kan dolaşımını ve metabolizmasını destekleyebileceğini, bunun da IL-1, IL-6 ve tümör nekroz faktörü (TNF)-α gibi enflamatuar faktörlerin temizlenmesine yardımcı olduğunu ve böylece KOA9’un klinik semptomlarını hafiflettiğini öne sürdü. Ek olarak, eklemin Tuina manipülasyonu yoluyla pasif hareketi, sinovyal sıvının eklem kıkırdağına nüfuz etmesini ve difüzyonunu teşvik edebilir ve doku besin metabolizmasınıiyileştirir 10. Diğer çalışmalar, Tuina manipülasyonunun KOA hastalarında biyomekanik indeksleri etkili bir şekilde iyileştirebileceğini göstermiştir11. Yumuşak dokulara uygulanan manipülasyonlar, uzuvlar üzerindeki stres dağılımını iyileştirebilir ve denge fonksiyonunu geliştirebilir12,13. Aynı zamanda, bazı eklem ayarlama manipülasyonları ile, anormal yürüyüşleri düzeltmek için alt ekstremitelerin hizalanması daayarlanabilir 14,15.
Tuina manipülasyonunun KOA tedavisinde etki mekanizması araştırılmaya devam etmektedir ve bu nedenle deneysel bir çalışma gereklidir. Tuina’nın deney hayvanlarında uygulanmasının anahtarı, modelleme, hayvan fiksasyonu ve müdahale yöntemlerinin standardizasyonudur16. Modelleme yöntemi, deney hayvanının hastalığın özelliklerini sergileyip sergileyemeyeceğini belirler. Bu arada, uygun fiksasyon yöntemleri Tuina manipülasyonunun müdahalesini kolaylaştırabilir ve Tuina’nın etkisini daha iyi yansıtabilir. Müdahale yöntemlerinin standardizasyonu Tuina manipülasyonunun en zor kısmıdır. 2010 yılında, Çin akupunktur standartlarının temel sistemi, deney hayvanları için akupunktur noktası standartlarından bahsederek, hayvan deneylerinde akupunktur ve Tuina operasyonlarına olanak sağlamıştır17. Bununla birlikte, Tuina manipülasyonunu standartlaştırmada hala zorluklar var. Tuina manipülasyonunun birden fazla türü vardır18. Spesifik manipülasyonun seçimi esas olarak tedavi edilecek hastalığa ve sanatçının tercih ettiği terapötik teorilere bağlıdır. Tuina’nın KOA için yaptığı çalışmada, nokta basma manipülasyonuna (başparmak veya dirsek ile belirli akupunktur noktalarına basma), Yizhichan itme manipülasyonuna (başparmağı kıpırdatarak itme manipülasyonu) ve pres ve yoğurma manipülasyonuna (vücut yüzeyinin belirli bölgesinin parmak veya avuç içi ile bastırılması ve yoğrulması anlamına gelir) daha fazla dikkat edilmiştir.19. Pres ve yoğurma manipülasyonu, deri altı dokusunu hareket ettirmek için presleme ve yoğurmayı birleştiren en yaygın kullanılan Tuina manipülasyonlarından biridir20. Akupunktur noktalarına uygulanan pres ve yoğurma manipülasyonu kan dolaşımını hızlandırabilir ve ağrıyı hafifletebilir ve Tuina’nın KOA19 üzerindeki terapötik etkisini temsil eder.
Bu protokolde, KOA sıçanları üzerinde pres ve yoğurma manipülasyonunun çalışması, gelecekteki araştırmalar için bir referans sağlamak amacıyla, seçilen akupunktur noktaları, manipülasyonun yoğunluğu ve sıklığı ve sıçanın vücut pozisyonu dahil olmak üzere ayrıntılı olarak açıklanacaktır.
Protocol
Representative Results
Discussion
Bu çalışma, KOA sıçanlarında Tuina manipülasyonu için bir protokol sağlar. Ağrı davranış testleri ve histomorfolojik bulgular sayesinde, KOA sıçanlarına uygulanan böyle bir dizi Tuina manipülasyonunun, KOA’nın hayvan modellerinde Tuina manipülasyonunun bir referansı olabilecek sinovyal inflamasyonu ve kıkırdak apoptozunu azaltabileceğini öne sürdü.
Protokol sırasında birkaç kritik prosedür vardır. İlk olarak, KOA modelini indüklemek için uygun bir yöntem se?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu çalışma, Şanghay Kritik Klinik Uzmanlıklar İnşaat Projesi (Hibe Numarası: Shslczdzk04001) tarafından desteklenmiştir; Şanghay Bilim ve Teknoloji Komisyonu’nun Yelken programı (Hibe Numarası: 22YF1444300); Şanghay Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi bütçesi dahilindeki projeler (Hibe Numarası: 2021LK091).
Materials
| absolute ethanol | Supelco | PHR1070 | For making specimen |
| ALMEMO admeasuring apparatus | ahlborn | 2450-1 | For Mechanical Withdrawal Threshold test |
| Anti-Digoxin antibody | Sigma-Aldrich | SAB4200669 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Anti-IL-1 beta | abcam | ab283818 | For HE stain IHC or TUNEL |
| DAB Substrate kit | Solarbio | DA1010 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Denture base materials | Shanghai New Century | 20000356 | For model making |
| eosin | bioswamp | PAB180016 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Finger pressure recordings | Suzhou Changxian Optoelectronic Technology | CX1003w | For Tuina manipulation |
| formic acid solution | Sigma-Aldrich | 695076 | For decalcification |
| H2O2 | Sigma-Aldrich | 386790-M | For HE stain IHC or TUNEL |
| hematoxylin | bioswamp | PAB180015 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Isoflurane | Shanghai Yuyan Scientific Instrument Company | S10010533 | For gas anesthesia |
| neutral resins | bioswamp | PAB180017 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Paraformaldehyde Fix Solution | Sigma-Aldrich | 100496 | For histology |
| PBS | Sigma-Aldrich | P3813 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Plantar Test Apparatus | IITC Life Science | / | For Paw Withdrawal Latency test |
| plaster of Paris bandage | WANDE | 20150023 | For model making |
| Proteinase K | Sigma-Aldrich | 124568 | For HE stain IHC or TUNEL |
| TNF Alpha Monoclonal antibody | Proteintech | 60291-1-Ig | For HE stain IHC or TUNEL |
| TUNEL | Servicebio | GDP1042 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Wax | Sigma-Aldrich | 327204 | For making specimen |
| xylene | Shanghai Sinopharm Group | 100092 | For making specimen |
References
- Joint Surgery Group of Chinese Orthopaedic Association, Chinese Association of Orthopaedic Surgeons, National Clinical Research Center for Geriatric Diseases, Chinese Journal of Orthopaedics. Chinese Osteoarthritis Treatment Guidelines (2021 Edition). Chinese Journal of Orthopaedics. 41 (18), 24 (2021).
- David, S., et al. Epidemiology of knee osteoarthritis in general practice: a registry-based study. BMJ Open. 10 (1), 031734 (2020).
- Callahan, L. F., Cleveland, R. J., Allen, K. D., Golightly, Y. Racial/Ethnic, Socioeconomic, and Geographic Disparities in the Epidemiology of Knee and Hip Osteoarthritis. Rheumatic Disease Clinics of North America. 47 (1), 1-20 (2021).
- Wang, K., Dong, X., Lin, J. H. Investigation of Medical Costs of Disease In Patients With Osteoarthritis of the Knee Joint. National Medical Journal of China. 97 (1), 4 (2017).
- Perlman, A., et al. Efficacy and Safety of Massage for Osteoarthritis of the Knee: a Randomized Clinical Trial. Journal of General Internal Medicine. 34 (3), 379-386 (2019).
- Xing, H., et al. Therapeutic massage for knee osteoarthritis: a systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials. Journal of Acupuncture and Tuina Science. 19 (5), 354-363 (2021).
- Seo, B. R., et al. Skeletal muscle regeneration with robotic actuation-mediated clearance of neutrophils. Science translational medicine. 13 (614), (2021).
- Wu, J. H., Zhang, C., Dong, S. J., Yin, H. Effects of Massage with #34;Relaxing Tendons" Technique on the Interleukin-1B and 5-hydroxytryptamine Levels in the Joint Fluid of a Rabbit Knee Osteoarthritis Model. Chinese General Practice. 21 (6), 688-693 (2018).
- Luo, R. The effects of IL-1B,IL-6,IL-13,IL-26,TNF-a by patellar manipulations on rabbit knee osteoarthritis model. Guangxi University of Traditional Chinese Medicine. , (2017).
- Qiu, F., Li, C., Wu, X., Liu, Y., Zhang, X. Effect of Massage on the Function of Foot-Yangming Meridian-Muscle in Patients with Knee Osteoarthritis. Acta Chinese Medicine. 36 (3), 649-655 (2021).
- Yang, B., Li, S. Research Progress of Massage in Improving Biomechanical Indexes of Knee Osteoarthritis. Acta Chinese Medicine. 37 (12), 2571-2576 (2022).
- Li, C., Qiu, F., Ding, J., Hu, G., Zhang, X. Curative Observation of Retaining of Heated Needle at Trigger Points Combined with Manipulation for Muscles along Meridians in Treating Knee Osteoarthritis. Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine. 37 (11), 2157-2162 (2020).
- Ding, X., Zhang, X., Hou, Y., Zhao, Z., Ye, X. Effect of massage manipulation on joint stiffness of knee osteoarthritis patients based on "spine-pelvis-knee" holistic diagnosis and treatment pattern. Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine. 55 (08), 54-57 (2021).
- Fu, Y., Gong, L., Li, Y. The clinical studies of Rolling combined with Pulling Manipulation on Early and Middle-term. Jilin Journal of Chinese Medicine. 40 (07), 958-962 (2020).
- Jiang, J., Hu, X., Tang, R., Qiu, F., Huang, L. Change of lower limb force line in treating knee osteoarthritis with manipulation. Journal of Changchun University of Chinese Medicine. 34 (01), 129-132 (2018).
- Liang, Y., et al. Some issues on animal experiments standardization of acupuncture and moxibustion. Lishizhen Medicine and Materia Medica Research. 25 (09), 2299-2300 (2014).
- Guo, Y., Liu, Y., Liu, Q., Chen, Z., Zhao, X. Basic System of Chinese Acupuncture Standard. Chinese Acupuncture & Moxibustion. 31 (6), 549-550 (2011).
- YAN, X., Yan, J. Study on the Standardization of Classification of Tuina Manipulation. Acta Chinese Medicine. 32 (5), 875-878 (2017).
- Aikebaier, G., Lu, X., Liu, J., Liu, l., Wang, S. Analysis on Manipulation and Acupoint Selection Laws of Massage for Treatment of Knee Osteoarthritis Based on Data Mining Technology. Chinese Journal of Information on Traditional Chinese Medicine. 29 (5), 23-29 (2022).
- Gong, L., Wuquan, S., Zhang, H., Chen, Z. Research of Yan Juntao’s Academic Experiences of Differential Treatment and Manipulation for Treating of Knee Osteoarthritis. Chinese Journal of Traditional Medical Traumatology & Orthopedics. 24 (7), 16-19 (2016).
- Qian, J., Xing, X., Liang, J. Two Methods to Establish Rat Model of Osteoarthritis of the Knee. Research and Exploration in Laboratory. 33 (11), 23-27 (2014).
- Liu, J., et al. Experimental study of a modified Videman method for replicating knee osteoarthritis on rabbit. Rehabilitation Medicine. 30 (03), 212-219 (2020).
- Moskowitz, R. W. Osteoarthritis cartilage histopathology: grading and staging. Osteoarthritis and Cartilage. 14 (1), 1-2 (2005).
- Shen, M., Li, Z., Shen, J. Preliminary Exploration of Experiment Teaching on Experiment Acupuncture Science. Chinese Medicine Modern Distance Education of China. 7 (02), 130-131 (2009).
- Jeong, J., et al. Anti-osteoarthritic effects of ChondroT in a rat model of collagenase-induced osteoarthritis. BMC complementary and alternative medicine. 18 (1), 131 (2018).
- Hulth, A., Lindberg, L., Telhag, H. Experimental osteoarthritis in rabbits. Preliminary report. Acta orthopaedica Scandinavica. 41 (5), 522-530 (1970).
- Tawonsawatruk, T., Sriwatananukulkit, O., Himakhun, W., Hemstapat, W. Comparison of pain behaviour and osteoarthritis progression between anterior cruciate ligament transection and osteochondral injury in rat models. Bone & Joint Research. 7 (3), 244-251 (2018).
- Zhou, Q., et al. Cartilage matrix changes in contralateral mobile knees in a rabbit model of osteoarthritis induced by immobilization. BMC musculoskeletal disorders. 16, 224 (2015).
- Zeng, J., et al. Establishment and identification of experimental rabbit model of knee osteoarthritis. Chinese Journal of Clinical Research. 29 (5), 679-682 (2016).
- Shang, P., et al. Comparison with two kind osteoarthritis animal models reduced by plaster immobilization in extend excessive position and bend excessive position respectively. Orthopaedic Biomechanics Materials and Clinical Study. (1), 11-14 (2006).
- He, Y., et al. Evaluation of the effect of improved cast immobilization method on rabbit knee osteoarthritis model. Chinese Imaging Journal of Integrated Traditional and Western Medicine. 18 (2), 198-219 (2020).
- Pengfei, S., et al. Possible mechanism underlying analgesic effect of Tuina in rats may involve piezo mechanosensitive channels within dorsal root ganglia axon. Journal of Traditional Chinese Medicine. 38 (6), 834-841 (2018).
- Wang, Y. Mechanisms of Massage Mediating Chondrocyte Apoptosis in Knee Osteoarthritis Through Piezo 1/JAK2 Signaling Pathway. Shandong University of Traditional Chinese Medicine. , (2019).
- Liu, J. Effect of Massage on TLR4/MyD88 Signal Transduction Pathway in Rat Knee Osteoarthritis Model. Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine. , (2019).
- Yu, S., Zhou, J., Pang, X. Advances in induced animal models of knee osteoarthritis. Journal of Guangxi University of Chinese Medicine. 25 (5), 50-55 (2022).
- Tan, Q., et al. Acupuncture combined with moxibustion regulates the expression of circadian clock protein in the synovium of rats with osteoarthritis. Chinese Journal of Tissue Engineering Research. 26 (11), 1714-1719 (2022).
- Zhang, Z., et al. A Review of Massage Therapy for Knee Osteoarthritis. Henan Traditional Chinese Medicine. 39 (1), 146-149 (2019).
- Gong, L., Sun, W., Zhang, H., Chen, Z. Research of Yan Juntao’s Academic Experiences of Differential Treatment and Manipulation for Treating of Knee Osteoarthritis. Chinese Journal of Traditional Medical Traumatology & Orthopedics. 24 (7), 16-19 (2016).
- Chen, C., Zhang, H. Research on the rules of acupoint selection for the treatment of knee osteoarthritis with massage based on data mining. Hainan Medical Journal. 29 (18), 2617-2619 (2018).
