Method Article

기니피그에서 고립된 우심방의 수축기 기능 관찰

DOI:

10.3791/65483

⸱

May 5th, 2023

 ,  ,  ,  ,  , 
1School of Pharmacy, Ningxia Medical University, 2Department of Cardiology, General Hospital of Ningxia Medical University, 3School of Basic Medical Sciences, Ningxia Medical University, 4College of Nursing, Ningxia Medical University, 5Key Laboratory of Ningxia Ethnomedicine Modernization, Ministry of Education Ningxia Medical University, 6Ningxia Regional Key Laboratory of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine for Prevention and Treatment of Regional High Incidence Disease

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

본 프로토콜은 기니피그에서 분리된 우심방을 사용하여 심근 수축을 향상시키는 약물을 스크리닝하는 효율적인 방법을 설명합니다.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

일반적인 만성 심부전(CHF)은 심실 충전 및/또는 배출 기능의 손상이 특징이며, 이는 만족할 수 없는 심박출량과 발병률 증가로 이어집니다. 심장 수축기 기능의 저하가 만성심부전 발병의 핵심 요인입니다. 수축기 기능은 단순히 좌심실에 산소가 공급된 혈액을 채운 다음 심장 박동 중에 혈액을 몸 전체로 펌핑하는 것입니다. 심장이 약하고 심장 박동이 있을 때 좌심실이 적절하게 수축할 수 없다는 것은 수축기 기능이 좋지 않음을 나타냅니다. 환자의 심장 수축기 기능을 강화하기 위해 많은 전통 허브가 제안되었습니다. 그러나 심근 수축성을 향상시키는 화합물을 스크리닝하기 위한 안정적이고 효율적인 실험 방법은 민족 의학 연구 과정에서 여전히 부족합니다. 여기에서는 디곡신을 예로 들면, 기니피그에서 분리된 우심방을 사용하여 심근 수축성을 향상시키는 화합물을 스크리닝하기 위한 체계적이고 표준화된 프로토콜이 제공됩니다. 그 결과 디곡신이 우심방의 수축성을 현저하게 향상시킬 수 있음을 보여주었습니다. 이 체계적이고 표준화된 프로토콜은 만성 만성심부전 치료에서 민족 의약품의 활성 성분을 스크리닝하기 위한 방법론적 참고 자료 역할을 하기 위한 것입니다.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

심부전은 심근경색, 심근병증, 혈역학적 과부하, 염증 및 기타 심근 손상의 원인으로 인해 발생하며, 이는 심근의 해부학적 구조와 활동을 변형시키고 궁극적으로 심실 펌핑 또는 충전의 실패로 이어집니다. 심계항진, 피로감, 체액 저류가 주요 주요 임상 증상이다1. 만성 심부전은 시간이 지남에 따라 유지, 악화 또는 보상 상실을 보일 수 있는 만성 심부전 질환이며,2세에 따라 발병률과 유병률이 증가합니다. 심장 수축기 기능의 저하가 CHF3 발병의 핵심 요인입니다. 현재 이 질병에 대한 의학적 치료법은 주로 안지오텐신 전환 효소 억제제, β-아드레날린 수용체(신경 호르몬계, 즉 교감신경계와 레닌-안지오텐신-알도스테론 체계의 과도한 활성화를 억제함) 또는 이뇨제(울혈을 감소시킴)와 같은 항고혈압제의 사용과 관련이 있습니다.4. 그러나 심박출량과 예비력 감소로 인한 심부전의 임상적 징후는 이러한 의학적 치료의 영향을 조사하는 연구에서 다루어지지 않는 경우가 많다5.

양성 수축성 약....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

실험 프로토콜은 닝샤 의과대학의 실험동물 사용 및 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 요구 사항에 따라 수행되었습니다. 본 연구에는 체중이 300-450g인 수컷 Dunkin-Hartley 기니피그가 사용되었습니다. 수축성에 대한 디곡신의 효과는 기니피그로부터 고립된 우심방에서 관찰되었습니다(그림 2).

1. 기니피그의 고립된 우심방을 위한 산소화 준비

  1. 생체 신호 수집 및 처리 시스템, JH-2 근력 변환기, 매그너스 욕조, L자형 환기 고리, 두꺼운 가위, 페트리 접시, 파라핀 등을 포함한 실험 도구를 준비합니다( 재료 표 참조).
  2. 2중증류수 1,000mL에 NaCl 7.02g(120.0mM), NaHCO3 2.10g(25.0mM), KCl(4.0mM) 0.30g, MgSO4 0.07g(0.6mM),NaH2PO40.07g(0.6mM), CaCl2(2.5mM) 0.28g, 포도당(11.0mM) 1.98g을 첨가하여 Krebs-Henseleit 용액(K-H ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

심근 수축성의 감소는 심박출량의 불충분한 결과를 유발하여 만성심부전증을 유발합니다(그림 1). 이 프로토콜을 통해 기니피그에서 분리된 우심방의 수축기 기능에 대한 다양한 약물의 효과를 기록한 다음 심근 수축성을 향상시키는 인종 약물의 화합물을 신속하게 스크리닝할 수 있었습니다. 우심방, JH-2 근력 변환기, 생체 신호 수집 및 처리 시스템을 단계별로 연결한 후 매개변수를 적절하게 설정하고 수축기 곡선을 관찰했습니다(그림 2). 곡선의 진폭은 우심방 수축의 강도를 나타냅니다. 실험은 4마리의 동물을 대상으로 수행되었으며 데이터는 기술 통계와 빈도 분포를 통해 분석되었습니다. 그림 4에서 볼 수 있듯이 정상적인 조건에서 뚜렷한 곡선이 나타났으며, 0.2mL의 저칼슘 K-H 용액을 투여한 후 곡선이 더 이상 변하지 않을 때까지 점차 감소하여 우심방의 수축성이 약해졌음을 나타.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

심장의 정상적인 리듬 활동은 고립된 우심방의 활동과 마찬가지로 적절한 물리적, 화학적 환경을 필요로 합니다. 고립된 우심방은 신체의 신경 분포와 전신 체액성 요인의 직접적인 영향으로부터 격리되어 있으며, 이는 우심방이 노출되는 약물을 변경할 때 우심방의 활동 변화를 관찰할 수 있음을 의미합니다. 흥분성 세포에서 생체 전기 활동의 근본적인 원인은 세포막의 이온 투과성의 변화와 세포막을 따라 이온이 확산되는 것입니다19. 따라서 심근세포의 막 외부에서의 이온 농도 변화는 심근세포의 생체 전기 활동과 생리학적 특성에 큰 영향을 미칩니다. 이온 중 K+, Na+, Ca2+ 가 가장 중요합니다. 혈중 K+ 함량이 과도하게 높으면(7.9mmol/L 이상) 심근의 흥분성, 자동성, 전도성 및 수축성이 감소하며, 이는 수축성 손상, 서맥 및 전도 차단에 반영됩니다.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

저자는 공개할 내용이 없습니다.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 연구는 닝샤 자연과학재단(보조금 번호 2023AAC03620), 닝샤 고등교육부 과학 연구 프로젝트(NYG2022030), 중국 국가자연과학재단(보조금 번호 82160816 및 82260797)의 지원을 받았습니다.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
4-0 외과 봉합사양저우  후다  의료  장치 Co.,  Ltd
5 % 디곡신 (디메틸 설 폭사이드에 용해)TCI 상하이D1828CAS : 20830-75-5; 순도 : >96.0 %
BL-420N 생체 신호 수집 및 처리 시스템Chengdu Tai Meng Software Co., Ltd1700142S
CaCl2< / sub>Shanghai yuanye Bio-Technology Co., LtdS24110CAS : 10043-52-4; 순도 : 96 %
포도당상하이 yuanye 생명 과학 유한 공사S11022CAS : 50-99-7; 순도: 99%
IsofluraneRWD Life Science Co., LtdR510-22-16
JH-2 근육 힘 트랜스듀서항공우주 의료 공학 연구소, 베이징, 중국
KCl 상하이 yuanye 바이오 테크놀러지 Co., LtdS24120CAS : 7447-40-7; 순도 : 99.5 %
Magnus bathShanghai Future Experimental Equipment Co., LtdL046525
MgSO4< / sub>Shanghai yuanye Bio-Technology Co., LtdS24253CAS : 7487-88-9; 순도: 98%
NaCl 상하이 yuanye 바이오 테크놀러지 유한 공사S24119CAS : 7647-14-5; 순도 : 99.5 %
NaH 2 < / sub>PO 4 < / sub >Shanghai yuanye Bio-Technology Co., LtdS24161CAS : 7558-80-7; 순도 : 99 %
NaHCO 3 < / sub>Shanghai yuanye Bio-Technology Co., LtdS24153CAS : 144-55-8; 순도: 99.8%
운영 분지Guangzhou Telekuan Medical Instrument Co., Ltd305 mm x 230 mm
안과 힘주nbsp; 솽루  의료  악기 Co.,  Ltd
안과 운영 가위  쑤저우  솽루  의료  악기 Co.,  Ltd
파라핀라이카 바이오시스템 
페트리 접시Corning430167100 mm x 20 mm
설치류 마취기Shanghai Yuyan Instruments Co., LtdABS 타입 (단일 채널)
스케일Shanghai Yueping Scientific Instrument Co., LtdYP1002
수술 플레이트  정저우  케타이  실험  장비 Co.,  Ltd21 cm x 31 cm
티슈 가위 쑤저우  솽루  의료  악기 Co.,  주식회사SL0023
&39601095

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ziaeian, B., Fonarow, G. C. Epidemiology and aetiology of heart failure. Nature Reviews Cardiology. 13 (6), 368-378 (2016).
  2. Lu, Y. Z., Xia, N., Cheng, X. Regulatory T cells in chronic heart failure. Frontiers in Immunology. 12, 732794(2021).
  3. Teerlink, J. R., et al....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Systolic FunctionRight AtriaGuinea Pig HeartMyocardial ContractilityChronic Heart FailureDigoxin ScreeningCardiac OutputEthnic MedicineVentricular FunctionCompound Screening
Video Coming Soon

Related Articles