Summary

在大鼠针灸实验中使用大鼠夹克改进悬吊固定

Published: August 18, 2023
doi:

Summary

在这里,我们提出了一种改进的悬浮固定方法,使用大鼠夹克在针灸实验中有效地固定大鼠。此外,还阐明了该固定装置的结构和应用,以及其在电针治疗中的应用说明和评估。

Abstract

在基础实验针灸研究中,大鼠通常被用作实验动物。但是,他们很难保持固定的姿势。在电针治疗过程中,正确固定大鼠是必不可少的。目前使用多种大鼠固定方法,包括麻醉固定、高平台固定、结合固定和自制大鼠外套固定。然而,这些方法都有其局限性,可能会在一定程度上影响实验的效率和可操作性。该协议介绍了一种使用老鼠衣服悬挂和固定大鼠的方法。首先,老鼠穿着与其体型相匹配的老鼠夹克,利用它们对黑暗和挖洞的偏好。然后在大鼠穿上大鼠衣服后进行针刺操作。当悬浮时,老鼠相对静止,因为它们的四肢不能移动。这种固定方法不仅具有经济和用户友好的好处,而且确保了将大鼠稳定可靠地固定在舒适放松的位置。它还有效地减少了时间消耗、实验空间和人力资源。此外,这种方法允许暴露用于大鼠针灸的大多数穴位。本文主要集中介绍该设备的组成,包括专门设计的老鼠夹克、高架固定架及其连接结构。此外,还将提供一个说明性示例,以演示基于大鼠服装的悬吊固定方法在大鼠电针操作中的应用。

Introduction

针灸是一种传统的疗法,其特点是在特定的穴位或其他位置针刺,以预防和治疗疾病。电针将丝状针与电刺激1相结合,通过调整相关参数可以精确控制刺激量,促进灸治疗的标准化2。近年来,对电针机制的研究不断拓展和深化3,4这导致以电针机制为重点的研究逐年增加5。

在电针的基础研究中,大鼠是最常用的动物。在电针治疗期间,接受者必须保持静止,以确保手术顺利进行。与人类受试者的临床试验不同,动物实验中使用的小动物在15-30分钟的电针治疗过程中不能有意识地遵循命令。这给研究人员带来了实现稳定可靠固定的主要挑战。固定不当会导致动物6产生焦虑、抑郁、恐惧等负面情绪,这不仅增加了大鼠受伤的风险和实验人员被咬伤的机会,而且影响了研究结果的稳定性和说服力。

在以往的研究中,研究人员在针灸或电针手术前经常使用麻醉固定7、高平台固定8、结合固定 6,9 或大鼠外套固定10然而,考虑到麻醉对身体11和脑功能12的影响,并考虑到针灸是在临床病例中对清醒的患者进行的,麻醉可能会在一定程度上影响研究结果。因此,与麻醉固定相比,清醒状态下大鼠的舒适固定是更好的选择。

然而,在非麻醉状态下,各种固定方法也有其各自的局限性,包括由于大鼠皮毛覆盖在大鼠身上而限制的穴位暴露10,需要至少两个人进行手术13,不可调节的固定器尺寸14,或大鼠处于强迫位置的应力状态6.为了解决这些技术问题,我们设计了一种大鼠夹克和一个固定架,适用于大鼠身体大部分部位的针灸操作。这可以帮助研究人员有效地对大鼠进行针灸手术。

该协议的基本原理如下:首先,老鼠夹克上的封闭式头盔利用了老鼠对黑暗和挖洞的自然倾向,从而限制了它们的活动范围。其次,靠近大鼠四肢关节的捆绑绳提供了物理压缩约束,对它们的运动施加了一定的限制。然而,即使穿着夹克,老鼠仍然能够跳跃和水平移动。最后,由于老鼠在悬挂时没有固定的受力点就无法接触地面,因此我们在老鼠夹克上增加了一个悬挂固定装置,进一步限制了它们的运动并确保针头固定。固定装置的组成如图 1所示。

Figure 1
图 1:大鼠夹克和悬架固定示意图。(A) 大鼠夹克在平面视图下的一般外观。 (B) 大鼠夹克的三维视图。 (C) 特别定制的老鼠夹克,在头部和后腰部的穴位附近有一个切口。 (D) 多只大鼠同时悬挂在高架上的图示。1:织物整体视图;2:前肢出口;3:后肢出口;4:系绳;5:缝合后形成的空腔;6:露出头部穴位的切口;7:用于暴露背部和腰部穴位的切口。8:缝合位置。 请点击这里查看此图的较大版本.

Protocol

本研究中对大鼠进行的所有程序均遵守中华人民共和国正式采用的《国家实验动物福利和伦理审查指南》(2018)和国家科学院出版社的《实验动物护理和使用指南》15。该协议由三个主要步骤组成。首先,老鼠夹克是根据不同体重的大鼠的个体体型量身定制和合身的。接下来,按照标准程序进行针灸操作。最后,将大鼠悬浮在夹克中,而针头保持在原位,以适应同一组内大鼠同?…

Representative Results

本实验共选取12只大鼠进行电针治疗,观察其固定法下的反应( 如表2所示)。在12只大鼠中,只有1只大鼠在15 min电针停留期间表现出剧烈的挣扎。由于其剧烈的运动,针头中途脱落,占大鼠总数的8.33%。这一结果表明,所使用的固定方法通常表现出显着的稳定性和可靠性。尽管一只大鼠表现出挣扎,但该组中的大多数大鼠在整个治疗过程中都保持了适当的针头固定。此外,在采用该?…

Discussion

电针已被证明对认知障碍 16,17、心肌损伤18、炎症性疼痛19 等多种疾病有良好的治疗效果。为了了解其作用机制,已经进行了主要使用大鼠的动物实验。在手术过程中固定动物对于获得准确的结果至关重要。虽然许多研究在动物麻醉后进行了电针治疗,但这种做法可能会阻碍大脑功能并影响实验的准确性。此外,长期…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

作者要感谢 Home for Researchers 的 Figdraw 科研绘图平台提供用于创建本文图 2 的材料,授权许可证 ID:URUUO5699e。这项工作得到了国家自然科学基金(81873380,82074566)、湖北省自然科学基金(2022CFCO43)和国家中医药管理局国家名中医药遗产工作室建设项目([2022]5号,[2022]75号)的支持。

Materials

75% alcohol Shandong Lircon medical technology co., ltd 2002-0059 Disinfection
acupuncture needles Beijing Luo ya shan chuan medical equipment co., Ltd. needling
Adult Sprague-Dawley (SD) rats Liaoning Changsheng biotechnology co., Ltd. SCXK 2020-0001 The recipient  subjected to fixation
an elevated fixation rack  Taizhou shiai instruments and equipments for scientific and teaching research  Co., ltd / Fix rats
Hans electronic acupuncture apparatus Beijing Huayun Ante Science and Technology Co. Ltd.  HANS-200A electroacupuncture
Medical cotton ball Jiangsu Misawa Medical Supplies Co., Ltd. 20172142357 Disinfection
Pet electric clipper Fenghua Xikou Lubao Knives & Scissors Electrical Appliance Factory / Shave the hair of rats
Tweezers Qingdao Schultz Biotechnology Co., ltd Pinch cotton balls

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Cite This Article
Liu, Q., Xiong, C., Liu, B., You, M., Du, Y., Liu, J. Improved Suspension Fixation Using Rat Jacket in Rat Acupuncture Experiments. J. Vis. Exp. (198), e65652, doi:10.3791/65652 (2023).

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