여기에서는 만성 저산소증 마우스 모델에서 경미한 마취 및 침술 치료를 구현하고 치료 후 인지 변화를 평가하기 위한 행동 테스트를 수행하기 위한 프로토콜을 설명합니다.
이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.
방법 논문
만성 저산소증 유발 인지 기능 장애의 마우스 모델에서 침술 치료
* These authors contributed equally
이 논문에서
요약
초록
중추 신경 질환의 치료는 지속적으로 의료 분야에 중대한 도전을 제기해 왔습니다. 침술은 중국 전통 의학에 뿌리를 둔 비약리학적 치료법으로, 미세한 바늘을 신체의 정확한 지점에 삽입하는 것을 수반하며 다양한 질환을 관리하는 데 일반적으로 사용됩니다. 최근 침술은 불안 및 호흡기 질환을 포함한 다양한 신경 질환에 대한 유망한 치료 개입으로 부상했습니다. 그러나 만성 저산소증으로 인한 인지 기능 장애를 치료하는 침술의 잠재력은 아직 연구되지 않았습니다. 이 논문은 만성 저산소증으로 인한 인지 장애의 마우스 모델을 확립하고, 경미한 마취를 시행하고, 침술 치료를 수행하고, 야외 테스트 및 물 미로를 사용하여 행동 변화 및 기억 능력을 평가하기 위한 포괄적인 프로토콜을 제시합니다. 단계별 프로토콜은 인지 개선을 위해 경혈과 바늘을 정확하게 찾고 배치하는 방법에 대한 자세한 지침을 제공합니다. 이 프로토콜을 사용함으로써 연구자들은 인지 기능 장애에 대한 침술의 치료 가능성을 철저히 평가하기 위한 체계적인 연구를 수행할 수 있습니다.
서론
전 세계 인구는 현재 심각한 노화 문제에 직면해 있으며, 이로 인해 인지 장애의 유병률이 급격히 증가하고 있습니다. 전 세계적으로 인지 장애의 발생률은 1,000인년당 약 53.97명입니다1. 혈관 기능 장애 또는 순환기/호흡기 장애로 인한 만성 뇌 저산소증은 노화 관련 치매의 주요 위험 요인 중 하나이다2. 이전 연구에서는 대뇌 저산소증이 BACE1 발현을 수정하여 아밀로이드 β 침착을 증가시킬 수 있음을 입증했습니다3. 또한 저산소증은 신경교세포 조절 장애 및 신경염증과 관련이 있습니다 4,5. 이 문제의 규모가 커지고 있음에도 불구하고 만성 저산소증으로 인한 인지 기능 저하를 예방하기 위한 효과적인 서양 의학은 현재 부족합니다. 비약리학적 한의학, 특히 침술은 인지 장애를 치료하기 위해 수천 년 동안 사용되어 왔으며 신경퇴행성 질환을 완화하는 데 유망한 결과를 보여주었습니다 6,7. Baihui, Shenting 및 Zusanli 경혈은 인지 기능 장애....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
프로토콜
동물 실험은 허베이 이링 의학 연구소 동물 연구 및 윤리 위원회(승인 번호: N2022148)의 승인을 받아 수행되었습니다. 18-22g 무게의 수컷 C57BL/6J 마우스( 재료 표 참조)를 허베이 이링 의학 연구소의 신약 평가 센터에 수용했습니다. 그들은 정상적인 음식과 깨끗한 물을 제공받았고 매일 12시간 동안 인공 조명에 노출되었습니다. 실내는 20-26 °C의 온도 범위와 40%-70%의 상대 습도를 유지했습니다.
1. 만성 저산소증 마우스 모델 구축(그림 1)
- 실험을 시작하기 전에 정상 대기압의 동물 케이지와 지속적인 저산소 환경의 케이지를 준비하십시오. 자동 가스 제어 전달 시스템을 활용하여 순수한 산소와 질소의 혼합물로 챔버를 세척함으로써 지속적인 저산소 환경을 구축합니다.
알림: 이 시스템은 전자기 밸브 스위치를 제어하도록 프로그래밍되어 시간과 농도 측면에서 가스의 정확한 전달을 보장합니다. - 생쥐를 무작위로 대조군(Con), 모델군(CH), 전기침술군(EA + CH)의 세 그룹으로 나눕니다. 대조군과 모델/전기 침술 마우스를 두 개의 케이지에 ....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
결과
야외 실험에서 쥐의 운동 궤적 특성화
궤적 지도는 정상 그룹의 쥐가 낯선 환경에서 탐험하려는 깊은 성향을 나타낸다는 것을 보여줍니다. 그들의 활동 궤적은 주로 구석에 집중되어 있으며 전체 열린 필드(왼쪽 패널)를 덮고 있습니다. 대조적으로, 장기간 저산소증 모델 그룹의 마우스는 새로운 환경을 탐험하려는 욕구가 현저히 감소했습니다. 그들은 주로 열린 들판의 중앙(중간 패널)을 향한 탐색 행동을 보이지 않고 구석에 머뭅니다. 침술 치료 후, 저산소증 유발 쥐의 탐색 활동이 개선되고, 열린 들판의 중앙을 향해 모험을 하는 행동이 복원되었습니다(오른쪽 패널)(그림 5A).
생쥐의 공간 학습과 기억의 특성화
정상 그룹에서 마우스는 목표 사분면에서 상대적으로 더 많은 시간을 보냈고 궤적 맵(왼쪽 패널)에 표시된 것처럼 플랫폼을 더 자주 교차했습니다. 마우스의 장기 저.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
토론
침술은 2,000여 년 전 중국에서 시작된 비약물적 의료 행위로, 경혈로 알려진 신체의 특정 부위에 가는 바늘을 삽입하는 것입니다. 이 지점들은 신체의 생명 에너지 또는 "기(氣)"가 흐르는 통로 또는 경락으로 연결되어 있다고 믿어진다24. 침술은 이러한 점들을 자극함으로써 신체의 균형과 조화를 회복하는 것을 목표로 한다. 만성 통증, 불안/우울증, 소화 문제, 생리통 및 호흡기 질환을 포함한 다양한 상태를 효과적으로 치료하는 것으로 나타났습니다 25,26,27,28,29. 최근 몇 년 동안 침술은 인지 기능 장애를 포함한 신경 질환에 대한 효과적인 치료 개입으로 부상했습니다. 여러 연구에서 신경 .......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
공개 사항
저자는 공개할 것이 없습니다.
감사의 글
이 작업은 허베이 S&T 프로그램(NO.E2020100001 및 NO.22372502D), 스자좡 고위급 S&T 혁신 및 기업가 정신 인재 프로젝트(07202203위)의 지원을 받았습니다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 10% 파라포름알데히드 용액 | Bioroyee (Beijing) Biotechnology Co., Ltd | RL3234 | |
| ANY-maze | Science | SA201 | 비디오 추적 시스템 |
| C75BL/6J 마우스 | BEIJING HFK BIOSCIENCE CO.,LTD | No.110322220103041767 | 성별: 남성, 무게: 18– 22 g |
| 전기침술 장치 | 만리장성 | KWD-808 I | |
| 화토 침술 바늘 | 쑤저우 의료 기구 공장 | 2655519 | |
| Isoflurane | RWD Life Science Co., Ltd | R510-22 | |
| NanoZoomer 디지털 병리학 | Hamamatsu Photonics K. K | C9600-01 | |
| 소동물 마취기 | RWD | YL-LE-A106 |
참고문헌
- Pais, R., Ruano, L., Carvalho, O. P., Barros, H. Global cognitive impairment prevalence and incidence in community dwelling older adults- A systemic review. Geriatrics. 5 (4), Basel, Switzerland. 84(2020).
- Tian, Z., Ji, X., Liu, J.
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재인쇄 및 허가
