الجمع الميداني والتحديد الروتيني المختبري لرهوديولا كرينولاتا
Summary
هنا ، نصف تحديد رهوديولا كرينولاتا من الموائل ، ومورفولوجيا النبات ، والخصائص الطبية ، والسمات المجهرية ، وكروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة.
Abstract
تحديد المواد الطبية هو فرضية وضمان سلامة المخدرات. لا بد أن يفضل غالبية الباحثين العلميين عملية تحديد الأعشاب البسيطة والسريعة والفعالة وغير المكلفة. رهوديولا كرينولاتا هو دواء تبتي تقليدي يزرع على ارتفاعات عالية ، ويتم توزيعه بشكل رئيسي في مناطق التبت ويونان وسيتشوان في الصين. تمتلك رهوديولا كرينولات أنشطة حيوية متعددة ، مثل الخصائص المضادة للالتهابات والمضادة لنقص الأكسجة ومضادات الأكسدة ، ولديها إمكانات كبيرة للتنمية. مع زيادة الطلب في السوق والانخفاض السريع في محتوى الموارد ، كان عدد كبير من المنتجات المشوشة من رهوديولا crenulata يزعج الناس. لذلك ، يقدم هذا البروتوكول عملية قياسية لتحديد رهوديولا كرينولاتا في الحقل جنبا إلى جنب مع الاختبارات المعملية الروتينية. إن الجمع بين الموائل والميزات المجهرية والكروماتوغرافيا ذات الطبقة الرقيقة سيحدد بلا شك رهوديولا كرينولاتا بسرعة وكفاءة واقتصادية ، مما يساهم في التطوير المستمر للطب التبتي ومراقبة جودة المواد الطبية.
Introduction
يتمتع طب الأعشاب بتاريخ طويل وخبرة تطبيقية غنية في الصين ، وكان أول تسجيل منهجي في Shennong’s herbal classic1. عزز اكتشاف الأرتيميسينين المطبق على الملاريا تطوير الأدوية العشبية إلى مرحلة جديدة1. إن استخدام التكنولوجيا العلمية الحديثة للكشف عن الآلية الدقيقة للأدوية العشبية يزيد من معدل الاستخدام والطلب على الأدوية العشبية ، مما يفتح سوقا دوليا جديدا لها2،3،4. ومع ذلك ، فقد أدى هذا إلى سلسلة من الآثار السلبية. غير المتخصصين لديهم فهم غامض لخصائص الأدوية العشبية ، مما يجعل استخدام الأدوية العشبية يواجه خطرا كبيرا على السلامة5.
رهوديولا كرينولاتا ، أحد نباتات أنواع رهوديولا ، يتوزع بشكل رئيسي في التبت وشمال غرب يونان وغرب سيتشوان في الصين (الشكل 1)6,7. تتكون رهوديولا كرينولاتا من ساليدروسيد ، تيروسول ، حمض الغال ، ومركبات أخرى لعلاج الأمراض المرتبطة بنقص الأكسجين من خلال وظيفة “تنشيط تشي وتعزيز الدورة الدموية ، وتطهير النبض وتهدئة الربو”8،9،10،11. يظهر التحقيق الميداني أنه يمكن العثور على رهوديولا كرينولاتا في مناطق الكاحل الألبية ومنحدرات الأخاديد والشقوق الصخرية على ارتفاع 4000-5600 متر. بيئتها المتنامية باردة ومليئة بأشعة الشمس والإشعاع الشديد ، وتنتمي إلى النظام البيئي لمروج جبال الألب. يمكن توزيع رهوديولا كرينولاتا في مجموعات صفائحية وشبيهة بالنقاط وفقا لتضاريس النمو ، ويمكن إجراء تدفق الجينات من خلال التلقيح المتبادل.
إن إجهاض حبوب اللقاح من جنس رهوديولا ، والتنقيب غير القانوني ، والبيئة البيئية المتدهورة تجعل رهوديولا كرينولاتا من الأنواع المهددة بالانقراض 6,12. نظرا للقيمة الطبية العالية لرهوديولا كرينولاتا ، من المتوقع أن تتدفق المنتجات المقلدة إلى السوق. تقدم هذه المقالة موطن رهوديولا كرينولاتا وبعض طرق تحديد المختبر المريحة. أولا ، لاحظنا بيئة نمو رهوديولا كرينولاتا وخصائصها الطبية. ثانيا ، لوحظ المجهرية للمسحوق الطبي بواسطة المجهر. الخطوة الأخيرة هي النقطة الأساسية. تم فصل المكونات التمثيلية لرهوديولا كرينولاتا وتحديدها وفقا لخصائص الامتزاز أو الذوبان المختلفة لهذه المكونات في مادة معينة. المصادقة القائمة على الحمض النووي أو طرق تحليل الأيض للنباتات الطبية معقدة ومكلفة13. يمكن لهذه الطرق الأساسية والمريحة والاقتصادية التعرف بسرعة على رهوديولا كرينولاتا.
Protocol
Representative Results
Discussion
هناك أكثر من 90 نوعا من نباتات رهوديولا في العالم ، وأكثر من 60٪ من جميع الأنواع موجودة في الصين ، وهي أنواع شائعة بما في ذلك رهوديولا كرينولاتا ، رهوديولا الوردية ، رهوديولا أخالينينسيس ، ورهوديولا ألجيدا17. رهوديولا كرينولاتا ، المسجلة في الجزء الأول من دست…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81973569 و 82274207 و 82104533) ، ومشروع تعزيز أبحاث Xinglin Scholar التابع لجامعة تشنغدو للطب الصيني التقليدي (XKTD2022013) ، وبرنامج البحث والتطوير الرئيسي في نينغشيا (2023BEG02012).
Materials
| 0.22 μm millipore filter | Millipore | SLGP033RB | |
| Automatic sampling machine | CAMAG | ATS 4 | |
| Chloral hydrate | Fuzhou Brunei Technology Co., Ltd | ST1002 | |
| Chromatographic sample bottles | Zhejiang ALWSCI Technology Co., Ltd | C0000008 | |
| Conical flask | Sichuan Shubo Co., Ltd | 1121 | |
| Cover glass | Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd | 10211818c | |
| Dissecting needle | Shanghai Bingyu Fluid Technology Co., Ltd | BY-5026 | |
| Electronic balance | SHIMADZU | ATX124 | |
| Ethyl acetate | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd | 2022120901 | |
| Formic acid | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd | 2021110801 | |
| Gallic acid | Chengdu Herbpurify Co., Ltd | M-017 | |
| Glycerol | Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd | 10010618 | |
| High speed crusher | Beijing Zhongxingweiye Instrument Co., Ltd | FW-100 | |
| Methanol | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd | 20230108 | |
| Microscope | Chongqing Oprec Nistrument Co., Ltd | B203 | |
| Microscope slide | Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd | 7105P-G | |
| Oven | Shanghai Yuejin Medical Equipment Co., Ltd | DHG-8145 | |
| Pharmacopoeia sieve | Hangzhou Xingrun sieve factory | 572423281330 | |
| Pipette | Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd | 120302008 | |
| Salidroside | Chengdu Herbpurify Co., Ltd | H-040 | |
| Saturate tank | Yancheng Liegu Technology Co., Ltd | 10*20 P-1 | |
| Silica gel plate | Yantai Jiangyou Silica Gel Development Co., Ltd | HSG20211227 | |
| Trichloromethane | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd | 20221013-1 | |
| Tweezer | Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd | 130302027 | |
| Tyrosol | Chengdu Herbpurify Co., Ltd | L-042 | |
| Ultrasound equipment | Ningbo Xinyi Ultrasonic Equipment Co., Ltd | SB-8200DTS | |
| Volumetric pipet | Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd | 120301006 |
References
- Zhang, J., et al. Traditional herbal medicine and nanomedicine: Converging disciplines to improve therapeutic efficacy and human health. Advanced Drug Delivery Reviews. 178, 113964 (2021).
- Yin, R., et al. The positive role and mechanism of herbal medicine in Parkinson’s Disease. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2021, 9923331 (2021).
- Li, F. S., Weng, J. K. Demystifying traditional herbal medicine with modern approach. Nature Plants. 3, 17109 (2017).
- da Fonseca, L. R., et al. Herbal medicinal products from Passiflora for anxiety: An unexploited potential. The Scientific World Journal. 2020, 6598434 (2020).
- Aziato, L., Antwi, H. O. Facilitators and barriers of herbal medicine use in Accra, Ghana: an inductive exploratory study. BMC Complementary and Alternative Medicine. 16, 142 (2016).
- Tao, H., et al. Rhodiola species: A comprehensive review of traditional use, phytochemistry, pharmacology, toxicity, and clinical study. Medicinal Research Reviews. 39 (5), 1779-1850 (2019).
- Wang, Y., et al. The dietary supplement Rhodiola crenulata extract alleviates dextran sulfate sodium-induced colitis in mice through anti-inflammation, mediating gut barrier integrity and reshaping the gut microbiome. Food & Function. 12 (7), 3142-3158 (2021).
- Xie, N. Rhodiola crenulate alleviates hypobaric hypoxia-induced brain injury via adjusting NF-κB/NLRP3-mediated inflammation. Phytomedicine. 103, 154240 (2022).
- Wang, X., et al. Salidroside, a phenyl ethanol glycoside from Rhodiola crenulata, orchestrates hypoxic mitochondrial dynamics homeostasis by stimulating Sirt1/p53/Drp1 signaling. Journal of Ethnopharmacology. 293, 115278 (2022).
- Ma, D., et al. Chemical characteristics of Rhodiola Crenulata and its mechanism in acute mountain sickness using UHPLC-Q-TOF-MS/MS combined with network pharmacology analysis. Journal of Ethnopharmacology. 294, 115345 (2022).
- Wang, X., et al. Rhodiola crenulata attenuates apoptosis and mitochondrial energy metabolism disorder in rats with hypobaric hypoxia-induced brain injury by regulating the HIF-1α/microRNA 210/ISCU1/2(COX10) signaling pathway. Journal of Ethnopharmacology. 241, 111801 (2019).
- d’Avigdor, E., Wohlmuth, H., Asfaw, Z., Awas, T. The current status of knowledge of herbal medicine and medicinal plants in Fiche, Ethiopia. Journal of Ethnobiology and Ethnomedicine. 10, 38 (2014).
- Sánchez, M., González-Burgos, E., Divakar, P. K., Gómez-Serranillos, M. P. DNA-based authentication and metabolomics analysis of medicinal plants samples by DNA barcoding and ultra-high-performance liquid chromatography/triple quadrupole mass spectrometry (UHPLC-MS). Plants (Basel, Switzerland). 9 (11), 1601 (2020).
- . Rhodiola renulata (Hook.fil & Thomson) H.Ohba Available from: https://www.gbif.org/species/4200529 (2023)
- . Plant + data center Available from: https://www.iplant.cn/ (2023)
- . Chinese virtual herbarium Available from: https://www.cvh.ac.cn/ (2023)
- Cunningham, A. B. There "ain’t no mountain high enough"?: The drivers, diversity and sustainability of China’s Rhodiola trade. Journal of Ethnopharmacology. 252, 112379 (2020).
- Wang, Q., Ruan, X., Jin, Z. H., Yan, Q. C., Tu, S. Identification of Rhodiola species by using RP-HPLC. Journal of Zhejiang University. Science. B. 6 (6), 477-482 (2005).
- Dong, X., Guo, Y., Xiong, C., Sun, L. Evaluation of two major Rhodiola species and the systemic changing characteristics of metabolites of Rhodiola crenulata in different altitudes by chemical methods combined with UPLC-QqQ-MS-based metabolomics. Molecules. 25 (18), 4062 (2020).
- Zhao, W., et al. HPLC fingerprint differentiation between natural and ex situ populations of Rhodiola sachalinensis from Changbai Mountain, China. PloS One. 9 (11), 112869 (2014).
- Yu, Y. Y. Quality evaluation of Tibetan medicine Rhodiolae crenulatae radix et rhizome based on sensory recognition and near infrared spectrum analysis. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. , (2020).
- Lv, X. M. Simultaneous determination of 5 chemical components in 3 kinds of Rhodiola rosea by HPLC. China Pharmacy. 29 (18), 2515-2519 (2018).
- Dong, T., Sha, Y., Liu, H., Sun, L. Altitudinal variation of metabolites, mineral elements and antioxidant activities of Rhodiola crenulata (Hook.f. & Thomson) H.Ohba. Molecules. 26 (23), 7383 (2021).
- Ma, D., et al. Application of UHPLC fingerprints combined with chemical pattern recognition analysis in the differentiation of six Rhodiola species. Molecules. 26 (22), 6855 (2021).
- Li, X. H., et al. Metabolic discrimination of different Rhodiola species using 1H-NMR and GEP combinational chemometrics. Chemical & Pharmaceutical Bulletin. 67 (2), 81-87 (2019).
- Liu, Y., et al. Identification of Hippophae species (Shaji) through DNA barcodes. Chinese Medicine. 10, 28 (2015).
