여기에서는 눈물샘 기능 장애의 쥐 모델을 확립하여 수성 결핍성 안구건조증 연구의 기초를 제공합니다.
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방법 논문
스코폴라민에 의해 유도된 눈물샘 기능 장애가 있는 쥐 안구건조증 모델
* These authors contributed equally
이 논문에서
요약
초록
수성 결핍성 안구건조증(ADDE)은 눈물 분비량과 질이 감소할 수 있는 안구건조증의 일종입니다. 비정상적인 눈물 생성이 장기화되면 각막 손상 및 염증을 포함한 안구 표면 환경의 교란을 유발할 수 있습니다. 심한 경우 ADDE는 시력 상실 또는 실명을 유발할 수 있습니다. 현재 안구건조증 치료는 안약이나 물리치료에 국한되어 있어 안구건조증을 근본적으로 치료할 수는 없을 뿐 안안약의 증상을 완화할 수는 없습니다. 안구건조증에서 눈물샘의 기능을 회복시키기 위해, 우리는 스코폴라민에 의해 유도된 쥐의 눈물샘 기능 장애에 대한 동물 모델을 만들었습니다. 눈물샘, 각막, 결막 및 기타 요인에 대한 포괄적인 평가를 통해 ADDE의 병리학적 변화에 대한 완전한 이해를 제공하는 것을 목표로 합니다. 현재의 안구건조증 마우스 모델과 비교했을 때, 이 ADDE 동물 모델에는 눈물샘의 기능적 평가가 포함되어 있어 ADDE의 눈물샘 기능 장애를 연구하기 위한 더 나은 플랫폼을 제공합니다.
서론
2021년까지 약 12%의사람들이 안구건조증을 심각하게 앓고 있으며1 이는 가장 흔한 만성 안과 질환 중 하나입니다. 안구건조증은 수성 결핍성 안구건조증(ADDE)과 증발성 안구건조증(EDE)2의 두 가지 유형으로 나눌 수 있습니다. ADDE는 쇼그렌 증후군(Sjögren's syndrome, SS)과 비SS(non-SS)로 나뉘는데, 대부분의 안구건조증 환자는 임상3에서 비SS 환자이다. 만성 안구건조증 증상은 환자의 시력에 심각한 영향을 미칩니다. 현재 기존의 안구 건조증 치료법은 인공 눈물을 사용하여 안구 표면을 윤활하고 눈꺼풀의 물리 치료를 포함합니다. 그러나 안구건조증은 많은 경우 완전한 치료법이 되지 않을 수 있습니다. 따라서 안구건조증의 발병기전을 연구하는 것은 새로운 치료법과 약물 개발에 매우 중요합니다. 안구건조증의 동물 모델은 추가 연구의 기초를 제공합니다.
안구건조증4의 동물 모델을 만드는 방법에는 호르몬 수치를 변화시켜 눈물 분비 수치를 변화시키는 여러 가지 방법이 있다. 예를 들어, 쥐의 고환을 제거하면 안드로겐....
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프로토콜
이 프로토콜에 따라 수행되는 모든 동물 실험은 IACUC(Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인 하에 수행됩니다.
1. 동물 준비
- 160g ± 20g의 건강한 6주 된 SPF Wistar 암컷 쥐 12마리를 준비합니다.
- 세극등과 검안경을 사용하여 모든 쥐의 눈 상태를 검사하여 전방 분절이나 망막 질환이 없는지 확인합니다.
- 충분한 먹이와 물 공급원으로 1 주일 동안 모든 쥐를 키웁니다.
- 모든 쥐를 정상 스코폴라민 약물 농도 2.5mg/mL, 스코폴라민 약물 농도 5mg/mL, 스코폴라민 약물 농도 7.5mg/mL 그룹으로 무작위로 나누고 각 그룹에 3마리의 동물을 배치했습니다.
2. 용액 준비
- 스코폴라민 브로마이드를 0.9% 염화나트륨 용액에 녹여 7.5mg/mL, 5mg/mL 및 2.5mg/mL 농도의 용액을 만듭니다.
- 쥐의 대조군을 위한 주사로 사용할 스코폴라민 하이드로브로마이드가 없는 0.9% 염화나트륨 용액을 준비합니다.
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결과
Schirmer I 테스트, SIT I
쥐의 눈물량은 실험 시작 후 0일, 3일, 5일, 7일, 11일, 15일, 19일에 측정되었습니다. 실험 결과, 스코폴라민 투여군(2.5군, 5군, 7.5군)의 눈물분비는 대조군(0군)에 비해 유의하게 감소하였으며, 그 차이는 통계적으로 유의하였다(P < 0.01). 2.5군, 5군, 7.5군에서는 통계적 유의성이 없었다(P > 0.05). 일수(P > 0.05)에 있어서는 서로 다른 그룹 간에 유의한 차이가 관찰되지 않았다(그림 1, 표 1).
각막 플루오레세인 염색
각막 플루오레세인 염색은 실험의 0일, 3일, 5일, 7일, 11일, 15일 및 19일에 수행되었습니다. 그 결과 어떤 그룹에서도 각막 플루오레세인 염색이 없었으며, 이는 다양한 농도의 스코폴라민 약물을 사.......
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토론
수성 결핍성 안구건조증(ADDE)은 전체 안구건조증 인구의 약 1/3을 차지하는 중요한 유형의 안구건조증이며17 ADDE의 주요 원인은 눈물샘 병리학적 손상과 염증이다13. 이러한 유형의 안구건조증의 경우 가장 일반적인 임상 치료 방법은 증상을 완화하기 위한 인공눈물이나 스테로이드 또는 사이클로스포린의 국소 도포입니다18 반면, 눈물샘 손상에 대한 치료 옵션은 거의 없습니다. 따라서 눈물샘 기능 재건술이 안구건조증에 미치는 영향을 탐색하고 눈물샘 기능 장애의 동물 모델을 확립하는 것이 매우 중요합니다. 쥐의 눈물샘 분비를 억제하기 위해 약물을 반복적으로 투여하는 방법을 사용하여 만성 눈물샘 기능 장애 안구건조증 동물 모델을 만들었습니다.
이 안구건조증 모델을 만들기 위해 쥐를 선택했는데, 이는 다른 동물 모델에 비해 더 많은 장점을 가지고 있다
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공개 사항
저자는 이 절차에 사용된 약물 및 재료와 관련된 잠재적인 이해 상충이 없습니다.
감사의 글
이 연구는 광둥성 고위급 임상 핵심 전문 분야(SZGSP014)와 선전 자연과학 재단(JCYJ20210324125805012)의 지원을 받았습니다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 0.9% 염화나트륨 용액 | SJZ No.4 제약 | H13023201 | |
| 4% 파라포름알데히드 | Wuhan Servicebio Technology Co., Ltd | G1113 | |
| 절대 에탄올 | Sinopharm 화학 시약 Co., Ltd. | ||
| 플루오레세인 나트륨 안과 스트립 | 톈진 Yinuoxinkang Medical Device Tech Co., Ltd | YN-YG-I | |
| 헤마톡실린 및 에오신 | 난징 Jiancheng 생명 공학 연구소 | D006 | |
| 중성 발삼 | 베이징 Solarbio 과학 및 ; 테크놀로지 주식회사 | G8590 | |
| 파라핀 | 베이징 Solarbio 과학 및 공급자:Technology Co., Ltd. | YA0012 | |
| 주기적인 산-쉬프 염색 키트 | Beyotime Biotechnology | C0142S | |
| 쉬르머 인열 테스트 스트립 | Tianjin Yinuoxinkang Medical Device Tech Co., Ltd | YN-LZ-I | |
| 스코폴라민 하이드로브로마이드 | Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd | S860151 | |
| 소동물 현미경 | 헤드 생명공학 Co., Ltd. 주식회사 | ZM191 | |
| 크실렌 | 시노팜 화학 시약 Co., Ltd. |
참고문헌
- Papas, E. B. The global prevalence of dry eye disease: A Bayesian view. Ophthalmic Physiol Opt. 41 (6), 1254-1266 (2021).
- Sy, A., et al. Expert opinion in the management of aqueous deficient dry eye disease (DED). BMC Ophthalmol. 15
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재인쇄 및 허가
