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방법 논문

현장 및 실험실 조건에서 인수공통선충을 진단하기 위한 간단한 분변 부유 방법

5.7K 조회수

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DOI:

10.3791/66110

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2023년 12월 15일

 ,  ,  ,  , 

이 논문에서

요약

이 연구는 2017년부터 2021년까지 멕시코의 개에서 채취한 분변 샘플에서 검출된 Toxocara canis 와 Ancylostoma spp.를 현장 조건에서 식별하기 위해 부유선광법을 사용하는 방법을 설명합니다.

초록

Toxocara canis 및 Ancylostoma caninum과 같은 인수공통감염병 가능성이 있는 개 기생충의 진단은 멕시코의 시골 및 교외 지역의 실험실에 대한 접근이 제한되어 있기 때문에 일반적으로 어렵습니다. 이 연구는 2017년부터 2021년까지 멕시코의 개에서 채취한 분변 샘플에서 T. canis와 Ancylostoma spp.를 현장 조건에서 검출하는 것을 목표로 했습니다. 표본 크기 계산 결과 전국에 534마리의 개가 등록되는 것을 목표로 삼았습니다.

샘플은 배변 후 직장 또는 땅에서 직접 수집되었습니다. 샘플은 4°C에서 개별적으로 단단히 밀봉된 비닐 봉지에 보관했습니다. 염화나트륨의 포화 용액(비중[SpG] 1.20)을 현장 및 실험실 조건 모두에서 제조하였다. 채취 후 3일 이내에 2-4g의 대변을 각 대변 샘플을 식염수에 부유시켜 부유 선광 방법을 사용하여 기생충 검사를 실시했습니다. 대변을 부유 용액과 혼합하고 금속 숟가락을 사용하여 분쇄했습니다.

균일한 일관성이 달성되면 대변 샘플을 체를 사용하여 새 플라스틱 컵에 붓고 10-15분 동안 그대로 두었습니다. 혼합물의 상단에서 3방울을 멸균된 접종 루프를 사용하여 수집했습니다. 슬라이드를 현미경에 놓고 훈련된 기생충학자가 기생충을 식별했습니다. 1,055마리의 개에서 채취한 배설물 샘플을 현미경으로 검사했습니다. Ancylostoma spp.의 양성 샘플 수는 T. canis의 경우 833개(78.95% 빈도), 222개(21.04%)였습니다. 이러한 발견은 멕시코의 도시와 농촌 지역에 사는 개에서 실험실과 현장 조건에서 공동 기생충 기술을 사용하여 인수공통전염병을 식별하는 것의 중요성을 보여줍니다.

서론

위장 기생충은 개에게 영향을 미치는 가장 흔한 건강 문제 중 하나입니다1. 추정에 따르면 전 세계적으로 ~7억 마리의 반려견이 있으며, 약 1억 7,500만 마리가 자유롭게 돌아다니는 것으로 분류될 수 있습니다2. 60종 이상의 기생충이 개와 인간 사이에 공유되고 있으며, 이는 개가 이러한 기생충에 감염된 인간의 감염원이 될 수 있음을 시사한다3. 톡소카라 카니스(Toxocara canis)와 안시로스토마 카니눔(Ancylostoma caninum)은 개와 우연히 인간 숙주를 감염시키는 두 가지 기생 종입니다. 현재 멕시코에서 이 기생충이 생존하고 번식할 수 있는 위치에 대한 여러 연구가 있습니다. 개에서 톡소카라의 유병률은 미국, 멕시코, 중미 및 카리브해 전역에서 0%에서 87% 이상까지 다양합니다4. 톡소카라 카니스(Toxocara canis)와 안시로스토마(Ancylostoma spp.) 및 개의 다른 기생 종은 이전에 멕시코에서 보고된 바 있다

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프로토콜

개의 사용과 관리는 멕시코 국립 자치 대학교의 승인을 받았습니다.

1. 분변 시료 채취

알림: 수의사나 동물 주인의 도움을 받아 개를 다루십시오.

  1. 들개(그림 1A) 또는 신경질적인 동물의 경우 배변 직후 또는 10분 이내에 땅에서 샘플을 채취합니다.
  2. 수술용 장갑이나 얇은 벽의 폴리에틸렌 백에 물이나 바셀린을 바르십시오. 직장에서 대변 샘플을 수집하려면 수술용 장갑이나 얇은 벽의 폴리에틸렌 백을 착용하십시오.
  3. 각 개에서 최소 2g의 대변을 수집하십시오(그림 1B).
  4. 날짜, 위치(Google 지도를 사용한 GPS(Global Positioning System) 좌표), 각 동물의 식별 번호 할당, 개의 대략적인 나이, 개의 성별, 품종, 실내 또는 실외(야생) 개.
  5. 대변 샘플이 들어 있는 가방을 단단히 매듭으로 닫습니다. 채취 후 3-4시간 이내에 대변 샘플을 분석하지 않으면 백을 냉장(4-8°C)에 보관하십시오.

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결과

이 연구에서는 T. canis 및 Ancylostoma spp.의 식별을 위한 수집 및 공동 기생경 절차에 대해 설명합니다. 개 기생충 알을 검출하기 위해 간단한 분변 부유 선광 방법을 적용하는 이유는 이 기술이 솔루션, 장비 및 재료가 저렴하기 때문에 비용 효율적이기 때문입니다. 따라서 이 방법은 짧은 시간에 여러 샘플을 처리할 수 있으므로 높은 샘플 처리 용량을 가지고 있습니다. 또한, 간단한 분변 부유선광법은 수행하기 쉽고 상대적으로 민감합니다.

표본 크기와 동물의 선택은 주로 동물 주인의 의지와 접근하는 들개의 안전에 의해 결정되는 편의에 의해 이루어졌습니다. 본 연구에서는 2017년부터 4년 동안 멕시코에서 개 Canis lupus familiaris에서 Ancylostoma spp. 및 T. canis의 발생 및 빈도를 평가하기 위해 부유 방법을 사용했습니다. 1,638마리의 개에서 배설물.......

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토론

T. canis 및 Ancylostoma spp.와 같은 선충은 개의 소장에 서식할 수 있으며 인간에게 전염될 가능성이 있습니다. T. canis로 인한 임상 징후는 어린 개에게 심각하며, 성장 부진, 호흡기 문제 또는 소화관 병변으로 나타난다28. 성견의 경우 감염은 일반적으로 경미한 경향이 있습니다. 진단은 대변 샘플에서 특징적인 난자를 식별하는 데 의존합니다. 이 질환은 개에게 구충제를 처방하는 빈번한 원인이다29. 톡소카라의 역학을 이해하려면 이 기생충이 출생 전 태반을 통해 어미로부터 강아지에게 전염될 수 있으며, 새끼를 낳은 직후 은하 감염으로 젖을 먹으면서 전염될 수 있다는 사실을 인식하는 것이 중요합니다. 인간은 감염된 알을 섭취할 때 T. canis에 감염될 수 있으며, 이는 오염된 토양이나 감염된 개의 털과 같은 다양한 수단을 통해 발생할 수 있습.......

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공개 사항

저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.

감사의 글

저자들은 PAPIIT IN218720 보조금을 통해 재정 자원을 제공한 Universidad Nacional Autónoma de México의 Dirección General de Asuntos del Personal Académico와 요청된 연장을 승인한 Dr. Claudia Mendoza에게 감사를 표합니다. 이 작품은 2019년에 세상을 떠난 사랑스러운 니콜에게 바칩니다. 당신은 항상 내 마음 속에 살 것입니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
소매점에서 판매x 1.2 V AA 충전식 배터리에너자이저
분젠 버너ViresaFER-M224
일회용 12-oz 유리 컵Uline MexicoS-22275소매점에서 판매
유리 슬라이드Velab, 멕시코VEP-P20
접종 루프VelaQuin, 멕시코CRM-5010PH 
광학 현미경VelaQuin, 멕시코VE-B2
라이터BicJ25소매점에서 판매
플라스틱 컵 하나 (12 oz)AmazonASIN B08C2CRHSH어떤 주방 플라스틱 재사용 가능한 컵이든 될 수 있습니다
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참고문헌

  1. Duncan, K. T., Koons, N. R., Litherland, M. A., Little, S. E., Nagamori, Y. Prevalence of intestinal parasites in fecal samples and estimation of parasite contamination from dog parks in central Oklahoma. Veterinary Parasitology Regional Studies and Reports. 19, 100362(2020).
  2. Kisiel, L. M., et al.

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재인쇄 및 허가

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