Summary

A - 2 لأسلوب التصوير فوتون من تدفق الدم في القشرة المخية الحديثة من خلال نافذة القحف

Published: February 25, 2008
doi:

Summary

ويمكن دراسة ديناميات القشرية تدفق الدم في الجسم الحي بواسطة الأصباغ الفلورية التصوير ديكستران تحقن في الوريد مع ذيل القوارض 2 – الفوتون المجهري. هذا الفيديو يوضح كيفية ديناميات صورة تدفق الدم في اللحاء الجديد من الفئران من خلال زجاج النافذة المغطاة إعداد الجمجمة.

Abstract

القدرة على صورة الأوعية الدموية الدماغية (من السفن الكبيرة إلى الشعيرات الدموية) ، وديناميات سجل تدفق الدم في الدماغ سليمة من القوارض الحية هي تقنية قوية. تستخدم في الجسم الحي 2 – الفوتون المجهري من خلال نافذة الجمجمة فمن الممكن أن الأصباغ الفلورية صورة حقن في الوريد. هذا يسمح احد لصورة الأوعية الدموية القشرية ، وكذلك للحصول على قياسات تدفق الدم. وقد تم تطوير هذه التقنية أصلا من قبل ديفيد كلاينفيلد وينفريد Denk. ويمكن استخدام أسلوب لدراسة ديناميكية تدفق الدم أثناء أو بعد نقص التروية الدماغية ، والاضطرابات العصبية ، وأورام الدماغ ، أو في علم وظائف الأعضاء الدماغ العادي. على سبيل المثال ، تم استخدامها لدراسة كيفية السكتة الدماغية أسباب التحولات في اتجاه تدفق الدم والتغيرات في سرعة الدم الحمراء خلية أو التمويه في وحول احتشاء. نحن هنا لشرح كيفية استخدام 2 الفوتون المجهري لصورة ديناميكية تدفق الدم في اللحاء الجديد من الفئران الحية باستخدام الأصباغ الفلورية حقنها في الوريد الذيل.

Protocol

حقن الوريد ذيل الأصباغ الفلورية dextrans من أجل صورة الأوعية الدموية الدماغية ، لا بد من حقن الحيوانات عن طريق الوريد مع صبغة الفلورسنت. نستخدم ديكستران – مترافق الأصباغ لأن شاردة ديكستران يمنع الصبغة من عبور حاجز الدم في …

Discussion

ويمكن دراسة ديناميات القشرية تدفق الدم في الجسم الحي بواسطة الأصباغ الفلورية التصوير ديكستران حقنها في الوريد ذيل القوارض مع اثنين من الفوتون المجهري. وأظهر هذا الفيديو وسيلة لكيفية صورة ديناميكية تدفق الدم في اللحاء الجديد من الفئران من خلال زجاج النافذة المغطاة إعداد الجمج?…

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Fluorescein isothio-cyanate-dextran Reagent Sigma FD500S mol wt 500,000
Rhodamine B isothio-cyanate-dextran Reagent Simga R9379 mol wt ~70,000

References

  1. Kleinfeld, D., Mitra, P. P., Helmchen, F., Denk, W. Fluctuations and stimulus-induced changes in blood flow observed in individual capillaries in layers 2 through 4 of rat neocortex. Proc Nat Acad Sci. 95, 15741-15746 (1998).
  2. Pologruto, T. A., Sabatini, B. L., Svoboda, K. ScanImage: flexible software for operating laser scanning microscopes. Biomed. Eng. Online. 17, 2-13 (2003).
  3. Zhang, S., Murphy, T. H. Imaging the impact of cortical microcirculation on synaptic structure and sensory-evoked hemodynamic responses in vivo. 5, (2007).
  4. Nishimura, N., Schaffer, C. B., Friedman, B., Lyden, P. D., Kleinfeld, D. Penetrating arterioles are a bottleneck in the perfusion of neocortex. Proc Nat Acad Sci. 104, 365-370 (2007).
check_url/kr/678?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Mostany, R., Portera-Cailliau, C. A Method for 2-Photon Imaging of Blood Flow in the Neocortex through a Cranial Window. J. Vis. Exp. (12), e678, doi:10.3791/678 (2008).

View Video