만성 뇌 영상에 대한 Craniotomy 외과 절차
Summary
이 비디오 및 프로토콜은 설치류에 유리 커버 두개골 창을 이식하는 방법을 보여줍니다. 이러한 준비는 생체내 개월 시간 단위 동안 네크로 텍스의 2 광자 이미징에서 만성 사용할 수 있습니다. 그것은 광학 내장 신호 이미징을 포함한 이미징의 다른 유형에도 사용할 수 있습니다.
Abstract
이미징 기술이 연구의 뇌 기능에 점차 중요 해지고 있습니다. 그것이 사는 그대로 두뇌의 연구를 수 있기 때문에 그 중에서도 두 광자 레이저 스캐닝 현미경은 매우 유용한 방법으로 떠오르고있다. 적절한 준비와 함께,이 기술은 몇 분 거리 개월, 만성 같은 피질 영역의 관찰하실 수 있습니다. 이 비디오에서는, 우리는 두 광자 현미경을 사용하여 두뇌의 생체내 이미징에서 만성위한 준비를 보여줍니다. 이 기술은 처음에는 지금 Janelia 팜에서 하워드 휴즈 의학 연구소의 탐정이다 박사 카렐 스보로 개척되었다. 여기에 표시된 것과 같은 준비가 이미지 대뇌 피질의 혈류 역학에, 칼슘에 민감한 염료를 사용하여, 또는 내장 광학 이미징 연구의 연결 활동을 기록하는 neocortical 구조 (예, 돌기 및 axonal 역학)의 영상에 사용될 수 있습니다. 네크로 텍스의 깊은 영상은 최적의 두개골 창 수술 가능합니다. 수술하는 동안 두라 메이터을 손상하지에 극단주의를 사용하여 함께, 감염을 피하기 위해 가능한 한 가장 멸균 조건 하에서 운영, 성공적이고 지속적인 유리 덮인 두개골 Windows에서 발생합니다.
Protocol
Discussion
우리가 비디오에서 두 광자 현미경의 사용과 결합하여 보조 수치, 두개골 윈도우 준비에 나타난 것처럼, 생체내 네크로 텍스의 구조와 기능에서 공부하는 매우 강력한 도구입니다. 기술 관련 해부학 및 미세 수술 절차 및이 준비가 필요 기술에 익숙해지로 엄격한 훈련이 필요합니다. 단지 깨끗한 수술은 만성 이미징 사용할 수 있습니다. 두라이 과도하거나 구멍을 조작하면, 준비는 이미지에 사용해서는 안됩니?…
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Carprofen (Rimadyl) | Drug | Pfizer | ||
| Isoflurane (Aerrane) | Surgery | Baxter | ||
| Dexamethasone | Drug | Baxter | ||
| Ortho-Jet Powder | Reagent | LANG | To be mixed with the acrylic | |
| Jet-Acrylic Liquid | Reagent | LANG | To be mixed with Ortho-Jet Powder | |
| Round Glass Cover Slip | Tool | Electron Microscopy Sciences | 72195-05 | 5 mm diameter |
| Gelfoam | Surgery | Pharmacia & Upjohn Co. (Pfizer) |
References
- Svoboda, K., Denk, W., Kleinfeld, D., Tank, D. W. In vivo dendritic calcium dynamics in neocortical pyramidal neurons. Nature. 85, 161-165 (1997).
- Lendvai, B., Stern, E. A., Chen, B., Svoboda, K. Experience-dependent plasticity of dendritic spines in the developing rat barrel cortex in vivo. Nature. 404, 876-881 (2000).
- Trachtenberg, J. T., Chen, B., Knott, G. W., Feng, G., Sanes, J. R., Welker, E., Svoboda, K. Long-term in vivo imaging of experience-dependent synaptic plasticity in adult cortex. Nature. 420, 788-794 (2002).
- Portera-Cailliau, C., Weimer, R. M., DePaola, V., Caroni, P., Svoboda, K. Diverse modes of axon elaboration in the developing neocortex. PLoS Biol. 3, (2005).
- Holtmaat, A., Wilbrecht, L., Knott, G. W., Welker, E., Svoboda, K. Experience-dependent and cell-type-specific spine growth in the neocortex. Nature. 441, 979-983 (2006).
