Immunoblotting (Western blotting) är en snabb och känslig analys för upptäckt och karakterisering av proteiner som fungerar genom att utnyttja den särskilda inneboende i antigen-antikropp erkännande. Denna video innehåller protokoll för protein separation, läskpapper proteiner på membran, immunoprobing och visualisering med hjälp av kromogen eller kemiluminiscent substrat.
Abstract
Immunoblotting (Western blotting) är en snabb och känslig analys för upptäckt och karakterisering av proteiner som fungerar genom att utnyttja den särskilda inneboende i antigen-antikropp erkännande. Det handlar om lösningsgörande och elektrofores separation av proteiner, glykoproteiner, eller lipopolysaccharider med gelelektrofores, följt av kvantitativa överföring och irreversibel bindning till nitrocellulosa, PVDF, eller nylon. Den immunoblotting Tekniken har varit till nytta för att identifiera specifika antigener erkänns av polyklonala eller monoklonala antikroppar och är mycket känslig (1 ng av antigenet kan upptäckas). Denna enhet innehåller protokoll för protein separation, läskpapper proteiner på membran, immunoprobing och visualisering med hjälp av kromogen eller kemiluminiscent substrat.
Protocol
Den fullständiga texten protokollet för denna experimentella strategi finns i nuvarande protokoll i molekylärbiologi