Electroporation من مايكوباكتيريا

Summary

استراتيجيات الإمراض الفطرية لا تزال غير مفهومة تماما. معدل النمو البطيء في معظم الأنواع ، والطبيعة التي لا يمكن اختراقها الجدار الخلوي ، ومخاطر العمل مع الممرضة متفطرات تجعل من الصعب دراسة ومسؤولة إلى حد كبير عن سوء فهمنا لهذه الكائنات. في هذا الفيديو سوف نظهر تقنية electroporation ، الذي ينطوي على تعريض الخلايا إلى دفعة قصيرة الكهربائية عالية للسماح بدخول الحمض النووي. هذا هو الأسلوب الأكثر استخداما على نطاق واسع لإدخال الحمض النووي في الخلايا الفطرية.

Abstract

عالية الكفاءة التحول هو وجود قيود كبيرة في دراسة متفطرات. يمكن للجنس المتفطرة يكون من الصعب تحويل ؛ هذا هو السبب الرئيسي لجدار الخلية وشمعي سميك ، ولكن يضاف إلى ذلك حقيقة أن وضعت أحدث التقنيات الجزيئية للأنواع بفارق ذات الصلة مثل القولونية والعصوية الرقيقة. على الرغم من هذه العقبات ، وقد تم تحديد البلازميدات الفطرية والتي وصفتها الآن تحول الحمض النووي من الأنواع الفطرية عديدة. الطريقة الأكثر نجاحا لإدخال الحمض النووي في متفطرات هو electroporation. الكثير من العوامل المساهمة في التحول الناجح ، وهذه تشمل الأنواع / السلالة ، وطبيعة الحمض النووي تحويل ، واختيار علامة المستخدمة ، ومتوسط ​​النمو ، والشروط اللازمة لنبض electroporation. وترد تفاصيل الأساليب الأمثل لتحول بطيئة وسريعة على حد سواء ، المزارع هنا. وذكرت كفاءات التحول عن الأنواع الفطرية المختلفة واختيار مع علامات مختلفة.