Rato Epidérmico Neural Stem Cell Crest (EPI-NCSC) Culturas
Summary
Aqui nós mostramos o nosso método para isolar do mouse epidérmicas células da crista neural haste (EPI-NCSC). Técnica envolve a micro-dissecando folículos bigode, isolando o bojo e placeing-lo em cultura de tecidos. EPI-NCSC começam a emigrar a partir de explantes saliência para o substrato dentro de 3-4 dias.
Abstract
EPI-NCSC são remanescentes da crista neural embrionária em um local adulto, o bojo dos folículos pilosos. Eles são células-tronco multipotentes que têm a propriedade fisiológica de gerar uma grande variedade de tipos de células diferenciadas, inclusive neurônios, células nervosas de apoio, células musculares lisas, osso / células de cartilagem e melanócitos. EPI-NCSC são facilmente acessíveis na pele aveludada e podem ser isoladas como uma população altamente puro de células-tronco. Este vídeo fornece um protocolo detalhado para a preparação do mouse EPI-NCSC culturas de folículos bigode. A almofada de bigode de um rato adulto é removido, e os folículos whisker dissecados. Os folículos são então cortadas longitudinalmente e, posteriormente, transversalmente acima e abaixo da região bojo. A protuberância é removida a cápsula de colágeno e colocados em uma placa de cultura. EPI-NCSC começam a emigrar de explantes bojo 3-4 dias depois.
Protocol
Discussion
Em virtude da sua capacidade migratória, EPI-NCSC pode ser isolado como uma população altamente puro de células-tronco, que podem ser expandidos in vitro. Como restos embrionários em um local adulto, EPI-NCSC são candidatos potencialmente atraente para futuras terapias com células de substituição, engenharia biomédica e / ou medicina regenerativa. Nós testamos EPI-NCSC em um modelo do rato de lesão da medula espinhal, onde eles mostram características desejáveis. Através do perfil de expressão gênica por LongSAGE (www.ncbi….
Acknowledgements
Apoiado por: USPHS conceder NS38500, Instituto Nacional de Distúrbios Neurológicos e Derrame, NIH, EUA; Alliance Tecnologia Biomédica da Southeastern Wisconsin, Milwauke, WI, EUA; Bryon Paralysis Foundation Riesch, Milwaukee, WI, EUA; Ordem Fraternal de Eagles, Centro-Oeste Capítulo , EUA; National Spinal Cord Injury Association, Capítulo Milwaukee, EUA; North East England Stem Cell Institute, da Universidade de Newcastle, no Reino Unido.
References
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