Survivable chirurgie stéréotaxique chez les rongeurs
Summary
La surveillance des niveaux de neurotransmetteurs extracellulaire dans les régions cérébrales distinctes d'animaux se déplaçant librement offre un aperçu sur le lien entre la libération des neurotransmetteurs et des comportements. En microdialyse in vivo couplée à une détection électrochimique fournit anatomiques et une résolution excellentes chimiques et des informations sur la façon dont la neurotransmission basale est altérée par des manipulations pharmacologiques ou physiologiques.
Abstract
La capacité de mesurer extracellulaire niveaux de base de neurotransmetteurs dans le cerveau d'animaux éveillés permet la détermination des effets des différents défis systémiques (pharmacologiques ou physiologiques) dans le SNC. Par exemple, on peut mesurer directement la manière dont les projections de l'animal dopamine du mésencéphale répondre à la dopamine libérant des médicaments comme des stimuli d-amphétamine ou naturels, comme la nourriture. Dans cette vidéo, nous vous montrons comment implanter canules Guide cibler des sites spécifiques du cerveau de rat, comment insérer et implanter une sonde de microdialyse et comment utiliser la chromatographie liquide haute performance couplée à une détection électrochimique (HPLC-EC) pour mesurer les niveaux extracellulaires de neurotransmetteurs oxydables et des métabolites. Local précise l'introduction de la drogue à travers la sonde de microdialyse permet un travail affiné sur la spécificité du site dans le mécanisme un composé s de l'action. Cette technique a anatomiques et une résolution excellentes chimiques, mais seulement une résolution temporelle modestes que des échantillons de microdialyse sont habituellement traitées toutes les 20-30 minutes pour assurer des niveaux de neurotransmetteurs détectable. Complémentaire des outils ex vivo (c'est à dire, trancher et de culture de cellules électrophysiologie) peut aider à la surveillance en temps réel la neurotransmission.
Protocol
Discussion
En microdialyse in vivo est l'outil de choix pour mesurer les neurotransmetteurs multiples et de ses métabolites dans des sites distincts du cerveau d'un animal vivant. Cependant, il ne contrôle que les niveaux extracellulaires de neurotransmetteurs et il n'offre pas la résolution de temps pour surveiller l'exocytose des neurotransmetteurs en temps réel. Grâce à une version de la technique appelée «net-flux», la concentration des neurotransmetteurs réelles sur un site donné peut être calculé, ce qui peut donner …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Soutenu par DK065872 (PEV), un Prix Smith Family Foundation de l'excellence en recherche biomédicale (PEV), F31 DA023760.
References
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