Мониторинг внеклеточных уровней нейромедиаторов в различных областях мозга свободно движущихся животных предлагает идеи о связи между выпуска нейротрансмиттера и поведения. В естественных условиях микродиализа в сочетании с электрохимическими обнаружения обеспечивает отличную анатомические и химические разрешение, а также информацию о том, как базальной нейротрансмиссии изменяется с помощью фармакологических или физиологических манипуляций.
Abstract
Способности измерять базальную внеклеточного уровня нейротрансмиттеров в мозгу проснуться животных позволяет для определения влияния различных системных вызовов (фармакологическая или физиологического) к ЦНС. Например, можно непосредственно оценить, как средний мозг животного прогнозы дофамина реагировать на дофамин-рилизинг наркотики, такие как D-амфетамина или природные раздражители, как пища. В этом видео мы покажем вам, как имплантат руководство канюли, ориентированные на конкретные сайты в головном мозге крыс, как вставить имплантат и микродиализа зонда и как использовать высокоэффективной жидкостной хроматографии в сочетании с электрохимическими обнаружения (ВЭЖХ-ЕС) для измерения уровня внеклеточного окисляемых нейротрансмиттеров и метаболитов. Местные точное введение наркотиков через микродиализа зонда позволяет изысканные работы на месте специфику в механизм соединения с действий. Эта техника имеет отличные анатомические и химические разрешение, но лишь скромные временным разрешением, как микродиализа образцы обычно обрабатываются каждые 20-30 минут, чтобы обеспечить определяемый уровень нейромедиатора. Дополнительные бывших естественных инструментов (например, нарежьте и клеточных культур электрофизиологии) может помочь с мониторингом в режиме реального времени нейротрансмиссии.
Protocol
Резюме Два-месячный средний возраст C57BL/6J мышей или эквивалентную или три месяца средний возраст Sprague Dawley крыс или эквивалента анестезии с кетамином (60 мг / кг для крыс, 100 мг / кг для мышей) и ксилазина (10 мг / кг, внутрибрюшинно или для видов). Торможение осуществляется с использованием ?…
Discussion
В естественных условиях микродиализа является инструментом для измерения нескольких нейротрансмиттеров и метаболитов в различных участках мозга живого животного. Впрочем, это только мониторы внеклеточных уровней нейрохимических веществ и она не дает временное разрешение на мониторе нейромед…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Поддержка DK065872 (ЕПС), Фонд Смит Семья премии передовых технологий в области биомедицинских исследований (ЕПС), F31 DA023760.
Geiger, B. M., Frank, L. E., Caldera-Siu, A. D., Pothos, E. N. Survivable Stereotaxic Surgery in Rodents . J. Vis. Exp. (20), e880, doi:10.3791/880 (2008).