Préparation de la 2-dGuo cultures traitées orgue Thymus

Summary

Cette vidéo montre la dissection et l'enlèvement du thymus du fœtus ainsi la préparation des cultures ex vivo de la 2-dGuo traités thymus.

Abstract

Dans le thymus, les CD4 + thymocytes immatures 8 exprimant hasard réarrangés récepteur des cellules T α-et b-gènes de la chaîne subissent les épreuves de sélection positive et négative sur leur capacité à reconnaître complexe majeur d'histocompatibilité self-peptide/major (CMH) exprimées par thymique Les cellules stromales. Dans l'analyse in vivo du rôle des cellules stromales thymiques lors de la sélection intrathymique est rendue difficile par la complexité du microenvironnement cellulaire thymique dans le thymus adulte état stable, et par le manque de stratégies appropriées visant à manipuler l'expression des gènes, en particulier thymique compartiments stromal. Nous avons montré que le microenvironnement thymique peut être facilement manipulées in vitro par l'utilisation de cultures d'organes réagréger thymus, qui permettent la préparation de trois dimensions lobes de thymus de définir les cellules stromales et lymphoïdes. Bien que d'autres systèmes in vitro en charge certains aspects du développement des cellules T, réagréger culture d'organe thymus reste le seul système in vitro en mesure de soutenir efficacement CMH de classe I et II à médiation épreuves de sélection thymocytes, et peut donc être utilisé comme un outil efficace pour étudier la régulation cellulaire et moléculaire de la sélection positive et négative dans le thymus.

Protocol

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