دراسة النشوء الأحيائي الأغشية مع الفحص الجيني مراسل Luciferase المستندة
Summary
هنا ، نحن تصف إجراءات لدراسة التغيرات في البلعمة التي يسببها التعبير الجيني مع نهج مراسل الجين luciferase المستندة إلى استخدام مزدوج GloTM نظام الفحص Luciferase من Promega.
Abstract
لدراسة مسارات مختلفة من التنسيق توليف الدهون أثناء نشوء حيوي غشاء من المفيد للعمل مع نظام تجريبي حيث نشوء حيوي الغشاء يحدث بسرعة وبطريقة محرض. لقد وجدنا أن البلعمة من الخرز اللاتكس هو عملي لهذه الأغراض كخلايا توليف الدهون بسرعة لتجديد الغشاء غشاء برك كما فقدت التفاف المواد خلال الإحاطة الجسيمات. هنا ، نحن تصف إجراءات لدراسة التغيرات في البلعمة التي يسببها التعبير الجيني مع نهج مراسل الجين luciferase المستندة إلى استخدام مزدوج بالشبكة نظام الفحص Luciferase من Promega.
Protocol
خلية ثقافة تزرع الثقافات المخزون الكلى الجنينية البشرية 293 (HEK293) خلايا في 10 سم ، والأطباق الثقافة في "وسيط" ، ويتألف من متوسطة Dulbecco في التعديل النسر (DMEM) تستكمل مع مزيج من المضادات الحيوية (100 وحدة لكل مل من البنسلين …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Cite This Article
Zhang, S., Nohturfft, A. Studying Membrane Biogenesis with a Luciferase-Based Reporter Gene Assay. J. Vis. Exp. (19), e920, doi:10.3791/920 (2008).