לימוד biogenesis ממברנה עם Assay בלוציפראז מבוסס Gene כתב
Summary
כאן אנו מתארים נהלים לחקר שינויים בביטוי גנים phagocytosis המושרה עם גישה בלוציפראז מבוסס כתב הגן באמצעות מערכת כפולה GloTM Assay בלוציפראז מ Promega.
Abstract
כדי לחקור את התיאום של מסלולים שונים סינתזה השומנים במהלך biogenesis קרום כדאי לעבוד עם מערכת ניסיונית שבה biogenesis הממברנה מתרחשת במהירות ובאופן ועין מתנהלת. מצאנו כי phagocytosis חרוזים לטקס היא מעשית למטרות אלה כמו תאים במהירות לסנתז שומנים קרום לחדש בריכות קרום לאיבוד כמו גלישת החומר במהלך היבלעות החלקיקים. כאן אנו מתארים נהלים לחקר שינויים בביטוי גנים phagocytosis המושרה עם גישה בלוציפראז מבוסס כתב הגן באמצעות מערכת Dual-Glo Assay בלוציפראז מ Promega.
Protocol
תא תרבות תרבויות במלאי של כליה עובריים אנושיים 293 (HEK293) התאים גדלים 10 ס"מ מנות התרבות "בינוני", המורכב בינוני השתנה Dulbecco של הנשר (DMEM) בתוספת קוקטייל של אנטיביוטיקה (100 יחידות מ"ל של פניצילין 100 מיקרוגרם לכל מ"ל…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Cite This Article
Zhang, S., Nohturfft, A. Studying Membrane Biogenesis with a Luciferase-Based Reporter Gene Assay. J. Vis. Exp. (19), e920, doi:10.3791/920 (2008).