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Mutagenèse dirigée maison des plasmides entiers
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Homemade Site Directed Mutagenesis of Whole Plasmids
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Mutagenèse dirigée maison des plasmides entiers

DOI:
10.3791/1135-v

•

07:11 min

•

May 11, 2009

•

,
1Department of Biology,Johannes Gutenberg-University Mainz, Germany, 2Proteomics division, AlPlanta,Neustadt an der Weinstrasse, Germany

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:10Introduction
  • 00:47What We Need
  • 02:47Thermocycling Reaction
  • 03:29Thermocycling Conditions
  • 04:09Gel Check After Reaction
  • 04:28DpnI Digestion and Transformation
  • 04:58Transformation
  • 05:30Screening of Clones
  • 06:47Conclusion

Summary

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Mutagenèse dirigée de plasmides ensemble est un moyen simple de créer des variations légèrement différentes d'un plasmide d'origine. Ici nous démontrons une manière facile et rentable d'introduire des substitutions de bases dans un plasmide standard en utilisant des réactifs.

Tags

Site Directed MutagenesisWhole PlasmidsCloned Target GeneSubstitutionDeletionInsertionAmplifying PlasmidMutagenic PrimersBase SubstitutionsProtocolCost-effectiveCommercial KitsReaction Cost ReductionCritical StepsMutagenic Primer Design

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