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Visualizing Antigen-spezifischen CD4 + T-Zellen mit MHC Klasse II Tetramere
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JoVE 신문 생물학
Visualizing Antigen Specific CD4+ T Cells using MHC Class II Tetramers
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Visualizing Antigen-spezifischen CD4 + T-Zellen mit MHC Klasse II Tetramere

DOI:
10.3791/1167-v

•

15:42 min

•

March 06, 2009

•

, , ,
1Tetramer Core Laboratory,Benaroya Research Institute, 2Kwok Laboratory,Benaroya Research Institute, 3Nepom Laboratory,Benaroya Research Institute

Chapters

  • 00:00Title
  • 00:09Introduction
  • 01:05T Cell Staining
  • 03:21Reagents and Equipment
  • 05:44Assemble Materials and Equipment at Workspace
  • 06:04Step 1: PBMC Isolation
  • 08:51Step 2: CD4+ Cell Separatioin
  • 11:01Step 3: In Vitro Expansion Culture
  • 13:34Step 4: Visualizing T Cells by Tetramer Staining
  • 15:33Conclusion

Summary

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Dieses Verfahren zeigt die Reinigung und in vitro Expansion von Antigen-spezifischen CD4 + T-Zellen aus ganzen peripheren Blut und deren Visualisierung mit Hilfe der MHC-Klasse II Tetramere. Tetramere erlauben die direkte Visualisierung von T-Zellen mit einem einzigen Antigen-Spezifität und definierte MHC-Klasse II Einschränkung.

Tags

CD4+ T CellsMHC Class II TetramersAntigen SpecificFlow CytometryPeptide Loaded MHCT-cell ReceptorStreptavidinStaining ReagentsIn Vitro AmplificationMononuclear CellsPeripheral BloodFicoll UnderlayNegative SelectionBiotinylated Antibody CocktailMagnetic BeadsAdherent CellsAntigen Presenting CellsIL-2Surface AntibodiesFlow Cytometry Analysis

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